阿特拉津实验报告王静.doc

受控编号：ZHJC/GL021 No: 实验报告监 测 项 目：水中阿特拉津的测定监测分析方法：高效液相色谱法 郑州市环境保护监测中心站2012年12月10日编写科室： 中心实验室实验人员： 李迎芳 王 静审核人员：水中阿特拉津的自动固相萃取-高效液相色谱法测定前言阿特拉津，又名莠去津、园去津等，化学名称为：2-氯-4-乙胺基-6-异丙氨基-1，3，5-三氮苯。分子式C8H14ClN5，分子量为215.69，是一种广泛应用的三氮苯类除草剂1。目前的研究发现阿特拉津是一种环境雌激素，在低浓度长期暴露下会对人和生物体的内分泌系统产生干扰作用，引起一系列病症，是人类潜在的致癌物，被认为是一种最具污染力的农药2。阿特拉津的残留物在世界许多国家和地区的地表水和地下水中已有检出3，所以水中的阿特拉津的分析是环境分析中的一项重要内容。相关文献报道的水中阿特拉津富集方法较多的采用液-液萃取法4-6，液液萃取法操作复杂繁琐，时间长，且操作过程中使用较多的有机溶剂，不但污染环境，而且对操作人员的健康危害较大。故我们选择了固相萃取法（SPE）进行了实验。SPE是近年来兴起的一项试样分析前处理新技术，可以直接从液体样品中采集挥发和非挥发性的化合物，该技术溶剂使用量少，高效快速，能够提高分析质量，提高回收率。SPE至今已经发展成为浓缩样品基体中痕量分析物质的一种强有力的工具。实验采用C18柱进行固相萃取，结合高效液相色谱紫外检测法快速测定水中痕量阿特拉津。1 实验部分1.1 主要仪器及试剂高效液相色谱仪（伍丰EX1600，中国上海）；色谱柱：Exformma ODS C18 1504.6 mm；液相专用平头微量注射器：25 L；Auto trace 280全自动固相萃取装置（American Dionex）；SOLEX 18固相萃取小柱（500mg/6mL，American Dionex）；MTN-2800氮吹浓缩仪（中国天津）； 100mg/L的阿特拉津标液，介质为甲醇，国家标准物质中心提供，在4冰箱中保存；甲醇，色谱纯；乙酸乙酯，色谱纯。实验用水为去离子水。1.2 色谱条件柱温：30；进样体积：10L；流动相配比：甲醇/水=60:40；流动相流速：0.8mL/min；紫外检测波长：225nm。1.3 样品的保存样品采集后应尽快分析，否则应放在4冰箱中保存，保存时间不能超过7d。1.4 分析步骤 萃取时依次用10mL乙酸乙酯，10mL甲醇，10mL去离子水湿润固相萃取柱，活化流速为2mL/min。活化完毕，取500mL水样调pH至中性，以5mL/min流速通过固相萃取柱，进行上样。后用高纯氮吹干SPE柱，用5mL乙酸乙酯洗脱剂以2mL/min的速度洗脱待测物，收集淋洗液。用高纯氮气将淋洗液中乙酸乙酯挥发干，用甲醇定容至1mL。萃取好的水样经0.45m滤膜过滤后，取10进样分析。2 结果与讨论2.1 色谱条件的选择基于杂质峰对阿特拉津峰的干扰，本实验选择了1.0g/mL的阿特拉津的加标萃取水样进行了条件优化试验。流动相配比的选择：考察甲醇/水=60:40，70:30，80:20不同成分配比进行分析，试验结果表明，甲醇/水=60:40为理想配比。柱流速的选择：考察了0.5，0.8，1.0mL/min三种流速对照试验，流动相流速为0.8mL/min时，干扰峰与目标峰能完全分离。检测波长的选择：考察225，254，262nm波长下的吸收，选择波长为225nm。在以上优化的实验条件下，得阿特拉津标准色谱图，如下所示，保留时间为7.84min。图1 浓度为0.4g/mL的阿特拉津标准色谱图2.2 线性范围和检出限测定选定的色谱条件下，对0.2，0.4，0.8，1.6，2.0g/mL系列标准溶液进行色谱分析，得到线性范围0.22.0g/mL的标准曲线，如图2所示。图2 色谱峰面积与阿特拉津浓度的关系曲线，浓度范围为0.2-2.0g/mL方法的最低检测质量浓度(MDL) 可通过以下公式计算。MDL=S t(n-1,1-=0.99)式中: S重复实验的标准偏差n重复实验的次数。t(n-1,1-=0.99)自由度为n-1，置信水平为99%时的斯图登特t值。由单侧t分布表查出当置信水平为99%，自由度为f=n-1=6时，t=3.14，采用浓度为0.04 g/mL(S/N=5)的阿特拉津标准样品，平行测定7次，结果的标准偏差为0.003213g/mL，故得检出限为0.01g/mL，此为浓缩500倍后的检出限，除以浓缩倍数后得检出限为0.02g/L。2.3 加标回收率和精密度测定取自来水分别加入一定体积的阿特拉津使用液，使其浓度为1.0，1.6g/mL进行回收率测定。每点平行做6组，进行精密度的测定。表1自来水中阿特拉津加标含量的测定结果(n =6)。编号加标浓度（g/mL）测定平均值(g/mL)回收率平均值(%)RSD(%)11.00.9809983.221.61.4649911.52.4 实际水样的测定用该方法测定河南省部分饮用水源地样品，水样中均未检出阿特拉津，加标后分离效果较好，杂质峰不影响检测，说明该方法准确可靠，可用于检测环境水中阿特拉津的含量。3 结论采用固相萃取-高效液相色谱法测定环境水中阿特拉津，选择乙酸乙酯为固相萃取洗脱剂，