本科毕业论文开题报告素娟.doc

福建农林大学本 科 毕 业 论 文 开 题 报 告论文题目：茶树离体培养体系优化 学 院：_ 园艺 _ _ 专业年级：_ 茶学2011 学 号：_ 3115204041 _ 姓名：_ 韦素娟 _ _指导教师、职称：_ 孙威江教授2014年 3月 15日一、立题意义及国内外的研究现状与存在问题，主要研究内容及拟解决的关键性问题（含文献综述）1. 本项目研究的意义离体培养又称植物组织培养，是近几十年发展起来的一项用于植物无性繁殖的新技术，它主要是以植物细胞的全能性为理论依据，利用植物的器官（根、茎、叶、花、果实、种子）、组织（表皮、胚、胚乳）细胞（如体细胞）以及原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下对其进行培养，诱导出不定芽、愈伤组织、不定根，最后获得完整的再生植株的过程。利用组织培养技术可以培育新品种，且周期比较短，生长快，不存在变异，能够保持母本的一切遗传特征，也可以解决一些植物不产种子或种子少的难题等。2. 本项目研究在国内外的研究现状茶树种质资源保存一般是通过建立茶树资源圃进行保存，即在外界的自然环境条件下进行种质的保存。这种保存方法较可靠，但是也有很多弊端，如消耗人力财力，占地面积广，管理繁琐，容易遭受病虫害、干旱、霜冻等自然灾害。优化茶树的离体培养体系，并将体系运用到种质资源保存，可以缩小占用空间，增大繁殖系数，且让茶树不受外界不利的环境条件或栽培因数的影响。茶树组织培养始于上世纪60年代末，是由英国的剑桥大学用茶树幼嫩精短的一部分材料通过组织培养来研究咖啡碱的离体合成【1】。我国在茶树组织培养方面起步较晚，不过近些年在各研究者的共同努力下，通过对茶树的茎段、叶片、腋芽、种子等进行组织培养，相继获得完整的植株【2】。3.本项目研究的主要内容及拟解决的问题本实验在吴婉婉是师姐的基础上进行。主要是通过黄旦的叶片进行愈伤培养，得到一定愈伤数量后进行愈伤分化，即分化出芽，根。在愈伤培养阶段加入碳粉试探碳粉对的愈伤组织的成长发育是否有影响，以及碳粉是否可以降低愈伤组织的褐化率。愈伤分化的目的主要是通过对植物调节激素的量的控制来筛选出最佳激素配方的培养基。参考文献: 1郭玉琼，陈财珍,等.茶树花药愈伤组织诱导及茶多酚含量测定J.福建茶叶,2001（4）：7-102江苏农业科学第四期，江昌俊.茶树育种学M.北京:中国农业出版社,2005.3杨国伟，兰蓉，等.茶树愈伤组织诱导和组织培养J.江苏农业科学,2006(04):122-124.4程柳,汤浩如.茶树组织培养及影响因素J.安徽农业科学,2007(07):1960-19635张学文,刘选明,等.茶树愈伤组织诱导与共培转化的初步研究J.湖南农学院学报,1994(06):56刘德华.茶树愈伤组织继代培养与体细胞胚发生J.作物学报,1995(04):470-4747袁弟顺,林丽明,等.不同品种茶树愈伤组织的培养与茶氨酸的积累J.福建农业大学学报,2004(02): 178-1819方祖柽.茶树愈伤组织多倍体诱导J. 黄山学院学报,2007(06):8710许益娟.茶树组织培养再生体系优化与遗传转化的研究J.南京农业大学,2012(01):611成浩,杨素娟,等.茶树愈伤组织培养及其儿茶素累积J.茶叶科学,1993(02):109-11412陈志辉.茶树黄观音幼籽愈伤组织诱导与分化初步研究J.福建茶叶,2010(09):32-3513成浩,李素芳.茶树组织培养再生技术的研究J.中国茶叶,1996(03):28-3014吴扬,邓婷婷,等.茶树组织培养的影响因素及应用展望J.茶叶通讯,2009(02)：14-1715黄燕芬,周国兰,等.降低茶树组织培养中外植体褐化程度的研究J.西南农业学报,2009(05):1492-149516陈志辉.茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探J.福建农业学报,2010(06):726-73017杨亚萍,郑新强.茶树组织培养中的褐化控制研究J.茶叶,2013(01):3-718吴婉婉,孙威江.茶树组织培养研究进展J.亚热带农业研究,2013(02):133-13919段运裳.茶树组织培养研究进展J.福建茶叶,2007(02):7-920赵玮.茶树组织培养中外植体褐化的控制J.甘肃农业科技,2008(06):10-1221陈晓玲.茶树离体再生体系与微型嫁接的研究J.安徽农业大学,2011(07):5122邬秀宏,李中林,等.茶树组织培养中外植体褐化控制的研究J.西南农业学报,2012(03)1065-1068二、本课题的主要研究内容和方法、步骤、预期目的1. 研究的主要内容：(1)黄旦愈伤组织的培养（2）愈伤组织的芽的诱导（3）愈伤组织根的诱导（4）移植得到完整植株2. 方法及步骤 愈伤培养基制配：a:MS+2.0 6-BA+1.0 NAA+30g蔗糖+6.5g琼脂+0b:MS+2.0ml 6-BA+1.0NAA+30g蔗糖+6.5g琼脂+0.25g Cc: MS+2.0ml 6-BA+1.0NAA+30g蔗糖+6.5g琼脂+0.5g Cd: MS+2.0ml6-BA+1.0NAA+30g蔗糖+6.5g琼脂+0.75g Cd: MS+2.0ml6-BA+1.0NAA+30g蔗糖+6.5g琼脂+1.0g C实验材料的选取，并进行愈伤接种：取黄旦较嫩鲜叶经过杀菌处理后在无菌工作台上进行实验操作，将叶片切成小块四方形（5mm5mm）接在无菌培养基里。暗处理一周后，在室温162，光照时间12h/d，光照强度10001500Lx。经常去试验室去检查有没有污染，要及时清理，以免造成更多的污染，发现污染的要及时找出原因，作出调整。分析碳对愈伤生长的影响。筛选长好的愈伤组织分化培养基制配：a: MS+0.2mlNAA+30g蔗糖+6.5g琼脂b: MS+0.5mlNAA+30g蔗糖+6.5g琼脂c：MS+1.0mlNAA+30g蔗糖+6.5g琼脂d: MS+1.0ml6-BA+30g蔗糖+6.5g琼脂e: MS+2.5ml6-BA+30g蔗糖+6.5g琼脂f: MS+5.0ml6-BA+30g蔗糖+6.5g琼脂g: MS+1.0mlGA3+30g蔗糖+6.5g琼脂h: MS+2.0mlGA3+30g蔗糖+6.5g琼脂i: MS+3.0mlGA3+30g蔗糖+6.5g琼脂j: MS+0.5mlZT+30g蔗糖+6.5g琼脂在无菌操作台上进行愈伤移植至分化培养基中，在室温162，光照时间12h/d，光照强度10001500Lx条件下培养。经常去试验室去检查有没有污染，要及时清理，以免造成更多的污染。并记录分化情况。获得植株并移植3.预期目的本次实验的成功取决于愈伤组织的培养，得到足够的愈伤才可进行下一步的诱导分化。及筛选出好的分化培养基。三、研究工作总体安排及具体进度2013年12月至2014年3月：茶树织培养研究现状等文献的查阅，收集文献资料和试验材料；2014年3月至4