食品安全国家标准食品接触材料及制品芳香族伯胺迁移量的测定（征求意见稿）

 中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准  GB xxxxxxxx xxxx-xx-xx 发布 xxxx-xx-xx 实施 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 芳香族伯胺迁移量的测定 （征求意见稿） GB  I 前  言 本标准代替SN/T 2893-2011出口食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中芳香族伯胺的测定 气 相色谱-质谱法 本标准与SN/T 2893-2011相比，主要变化如下： 修改了标准的名称“食品安全国家标准 食品接触材料及制品 芳香族伯胺迁移量的测定”； 增加了液相色谱-串联质谱测定方法； 修改了方法检出限。 GB  2 食品安全国家标准  食品接触材料及制品 芳香族伯胺迁移量的测定  1 范围 本标准规定了食品接触材料及制品中芳香族伯胺迁移量的测定方法。 本标准适用于食品接触材料及制品中芳香族伯胺迁移量的测定。 第一法 液相色谱-质谱/质谱法 2 原理 食品接触材料及制品根据GB 31604.1进行迁移试验后，水性、酸性、酒精类食品模拟物中的芳香族 伯胺采用液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。 3 试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯。水为符合GB/T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 水性、酸性、酒精类食品模拟物：所用试剂依据GB 5009.156的规定。 3.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 3.1.3 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 3.1.4 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 3.2 试剂配制 3.2.1 水性、酸性、酒精类食品模拟物：按GB 5009.156操作。 3.2.2 0.1%甲酸：量取1 mL甲酸于容量瓶中，加入一级水定容1 L。 3.3 标准品 26种芳香族伯胺：标准品（见附录A），纯度98%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 26种芳香族伯胺标准储备溶液 （1000 mg/L） ： 准确称取芳香族伯胺标准品各25 mg （精确到0.1 mg） ， 分别置于25 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，于4 冰箱种避光密闭保存，保存期为3个月。 3.4.2 26种芳香族伯胺标准中间溶液 （10 mg/L） ： 分别吸取26种芳香族伯胺标准储备溶液0.5 mL于50 mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，于4 冰箱种避光密闭保存，保存期为1个月。 3.4.3 标准工作溶液的制备：准确吸取26种芳香族伯胺标准中间溶液0 L、5 L、10 L、25 L、50 L、 100 L、 250 L 、 500 L于50 mL容量瓶中， 用水定容， 得到26种芳香族伯胺浓度分别为0 g/L、 1 g/L、 2 g/L、5 g/L、10 g/L、20 g/L、50 g/L、100 g/L的标准工作溶液。采用同样方式，分别用对应水 性、酸性食品、酒精类食品模拟物配置同样浓度系列的26种芳香族伯胺标准工作溶液。 GB  3 4 仪器和设备 4.1 液相色谱串联三重四级杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI） 4.2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。 4.3 微量注射器：10 L、100 L、1000 L。 4.4 0.22 m聚四氟乙烯滤膜针式过滤器。 5 分析步骤 5.1 食品模拟物的制备 5.1.1 总则 本标准方法食品模拟试验采用水性、 酸性、 酒精类食品模拟物， 可以包括水性、 酸性、 酒精类食品。 所需试液通过迁移试验获取，可在4 冰箱中避光保存一周。 5.1.2 迁移试验 注：实际食品模拟物及迁移条件参考GB 31406.1和GB 5009.156的规定。 5.1.3 食品模拟物试液制备 5.1.3.1 水性、酸性、酒精类食品模拟物试液 准确移取迁移试验后得到的水性、酸性、酒精类食品模拟物浸泡液约1 mL，通过0.22 m微孔滤膜 过滤后，供测定用。 5.1.3.2 空白试液的制备 未与食品接触材料及制品接触的水性、酸性、酒精类食品模拟物按5.2.3.1处理即得空白试液。 5.2 仪器参考条件 5.2.1 液相色谱条件 a) 色谱柱：C18柱，柱长：150 mm，柱内径3.0 mm，粒度2.6 m，或同等性能色谱柱； b) 流动相：A为0.1%甲酸，B为乙腈，洗脱梯度见表1； 表1 洗脱梯度表 时间/min A/% B/% 0 90 10 1 90 10 4 60 40 10 5 95 13 5 95 13.6 90 10 15 90 10 c) 流速：0.4 mL/min； d) 柱温：40； e) 进样量：10 L。 5.2.2 质谱条件 a) 离子化模式:电喷雾电离负离子模式(ESI+ ) b) 质谱扫描方式:多反应监测(MRM) c) 其他质谱参考条件参见附录B 中B.1 5.3 食品模拟物试样溶液的测定 GB  4 5.3.1 定量测定 将试样溶液注入液相色谱-质谱/质谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中26种芳香族伯 胺的浓度。 5.3.2 定性测定 按照仪器参考条件（5.2）测定食品模拟物试样溶液和标准工作溶液，如果食品模拟物试样溶液的 质量色谱峰保留时间与标准溶液在 2.5%范围内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的混合基质标准溶 液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表 2 的规定，则可判断样品中存在相应的待测物。26 种芳香 族伯胺的主要参考质谱参数参见附录 B 中表 B.1，26 种芳香族伯胺液相色谱-质谱/质谱多反映检测 （MRM）色谱图参见附录 C 中的图 C.1。 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度，K/% K50 20K50 10K20 K10 允许的相对偏差/% 20 25 30 50 5.4 空白试验 空白试验系指除不加试样外,采用完全相同的分析步骤、试剂和用量,进行平行操作。 6 分析结果的表述 6.1 绘制标准工作曲线 按照 5.2 所列测定条件，对标准工作溶液（3.4.3）进行检测，测定相应的峰面积。以食品模拟物标 准工作曲线中 26 种芳香族伯胺浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线 性方程。 食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺浓度按式（1）计算: a by c         （1） 式中: c   食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的浓度，单位为微克每升(g/L)或微克每千克(g/kg)； y   食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的峰面积； b   回归曲线的截距； a   回归曲线的斜率。 6.2 26 种芳香族伯胺特定迁移量的转化计算 由 6.1 得到的食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的浓度，根据迁移实验中所使用的食品模拟物的 体积和测试试样与食品模拟物检出面积，通过数学换算计算出 26 种芳香族伯胺的特定迁移量，单位以 （mg/kg）或（mg/dm2）表示。具体操作参考 GB 5009.156 的规定。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 20%。 8 其他 本方法对水性、酸性、酒精类食品模拟物中 26 种芳香族伯胺的检出限为 0.01mg/L。 GB  5 第二法 气相色谱-质谱法 9 原理 食品接触材料及制品根据GB 31604.1进行迁移试验后，油性食品模拟物（异辛烷）中的芳香族伯胺 采用气相色谱-质谱法测定，外标法定量。 10 试剂和材料 10.1 试剂 除另有说明外，所有试剂均为分析纯。 10.1.1 油性食品模拟物：异辛烷，色谱纯。 10.1.2 叔丁基甲醚：色谱纯。 10.2 标准品 26种芳香族伯胺：标准品（见附录A），纯度98%。 10.3 标准溶液配制 10.3.1 26种芳香族伯胺标准中间溶液 （10 mg/L） ： 分别移取26种芳香族伯胺标准储备溶液 （3.4.1） 0.5 mL 于50 mL棕色容量瓶中，用叔丁基甲醚定容至刻度，于4 冰箱种避光密闭保存。 10.3.2 标准工作溶液的制备：准确吸取26种芳香族伯胺标准中间溶液（10.3.1）0 mL、0.025 mL、0.125 mL、0.25 mL、0.5 mL、1.25 mL、2.5 mL、5 mL于25 mL容量瓶中，用异辛烷定容，得到26种芳香族伯 胺浓度分别为0 mg/L、0.01 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1 mg/L、2 mg/L的标准 工作溶液。 11 仪器和设备 11.1 气相色谱：配有质量选择检测器（MSD）。 11.2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。 11.3 微量注射器：10 L、100 L、1000 L。 11.4 0.22 m聚四氟乙烯滤膜针式过滤器。 12 分析步骤 12.1 食品模拟物的制备 12.1.1 总则 本标准方法食品模拟试验采用油性食品模拟物异辛烷， 可以包括油性类食品。 所需试液通过迁移试 验获取，可在4冰箱中避光保存一周。 12.1.2 迁移试验 注：实际食品模拟物及迁移条件参考GB 31406.1和GB 5009.156的规定。 12.1.3 食品模拟物试液制备 12.1.3.1 油性类食品模拟物试液 准确移取迁移试验后得到的油性食品模拟物异辛烷浸泡液约1 mL，通过0.22 m微孔滤膜过滤后， 供测定用。 GB  6 12.1.3.2 空白试液的制备 未与食品接触材料及制品接触的油性食品模拟物异辛烷按12.2.3.1处理即得空白试液。 12.2 仪器参考条件 a) 色谱柱：30 m 0.25 mm（内径） 0.25 m（膜厚），DB-5 MS石英毛细管柱或相当者； b) 升温程序： 开始温度60 ； 以5 /min升温至140 ， 保持5 min； 以10 /min升温至220 ， 保持2 min；以2 /min升温至230 ，保持5 min；以10 /min升温至290 ，保持1 min； c) 进样口温度：280 ； d) 离子源温度：230 ； e) 四极杆温度：150 ； f) 电离方式：EI； g) 电离能量：70 eV； h) 载气：氦气，纯度99.999，1.0 mL/min； i) 进样方式：不分流进样，1.0 min后开阀； j) 进样量：1.0 L； k) 扫描方式：选择离子监测方式（SIM）； l) 溶剂延迟：4 min。 12.3 食品模拟物试样溶液的测定 12.3.1 定量测定 将试样溶液注入气相色谱-质谱仪中,得到峰面积,根据标准曲线得到待测液中26种芳香族伯胺的浓 度。 12.3.2 定性测定 按照仪器参考条件（12.2）测定食品模拟物试样溶液和标准工作溶液，如果食品模拟物试样溶液的 质量色谱峰保留时间与标准溶液在 2.5 %范围内； 定性离子对的相对丰度与浓度相当的混合基质标准溶 液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表 3 的规定，则可判断样品中存在相应的待测物。26 种芳香 族伯胺的分子量、定性离子和定量选择离子参见附录 D 中表 D.1，26 种芳香族伯胺气相色谱-质谱选择 离子色谱图参见附录 E 中的图 E.1。 表3 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度，K/% K50 20K50 10K20 K10 允许的相对偏差/% 20 25 30 50 12.4 空白试验 空白试验系指除不加试样外,采用完全相同的分析步骤、试剂和用量,进行平行操作。 13 分析结果的表述 13.1 绘制标准工作曲线 按照 12.2 所列测定条件，对标准工作溶液（10.3.2）进行检测,测定相应的峰面积。以食品模拟物标 准工作曲线中 26 种芳香族伯胺浓度为横坐标,以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性 方程。 食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺浓度按式（2）计算: GB  7 a by c         （2） 式中: c   食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的浓度， 单位为毫克每升 （mg/L） 或毫克每千克 （mg/kg） ；  y   食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的峰面积； b   回归曲线的截距； a   回归曲线的斜率。 13.2 26 种芳香族伯胺 6 特定迁移量的转化计算 由 13.1 得到的食品模拟物试液中 26 种芳香族伯胺的浓度， 根据迁移实验中所使用的食品模拟物的 体积和测试试样与食品模拟物检出面积，通过数学换算计算出 26 种芳香族伯胺的特定迁移量，单位以 （mg/kg）或（mg/dm2）表示。具体操作参考 GB 5009.156 的规定。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 14 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。 15 其他 本方法对油性类食品模拟物异辛烷中 26 种芳香族伯胺的检出限为 0.01 mg/L。 GB  8 附 录 A 26 种芳香族伯胺的中文名称、英文名称和化学文摘编号 表 A.1 26 种芳香族伯胺的中文名称、英文名称、化学文摘编号和分子式 序号 中文名称 英文名称 CAS No. 分子式 1 4氨基联苯 4-Aminodiphenyl 92-67-1 C12H11N 2 联苯胺 Benzidine 92-87-5 C12H12N2 3 4氯邻甲苯胺 4-Chloro-O-Toluidine 95-69-2 C7H8ClN 4 2萘胺 2-Naphthylamine 91-59-8 C10H9N 5 邻氨基偶氮甲苯 O-Aminoazotoluene 97-56-3 C14H15N3 6 2氨基4硝基甲苯 2-Amino-4-Nitrotoluene 99-55-8 C7H8N2O2 7 对氯苯胺 4-Chloroaniline 106-47-8 C6H6ClN 8 2,4二氨基苯甲醚 2,4-Diaminoanisole 615-05-4 C7H10N2O 9 4,4二氨基二苯甲烷 4,4'-Diaminodiphenylmethane 101-77-9 C13H14N2 10 3,3二氯联苯胺 3,3'-Dichlorobenzidine 91-94-1 C12H10Cl2N2 11 3,3二甲氧基联苯胺 3,3'-Dimethoxybenzidine 119-90-4 C14H16N2O2 12 3,3二甲基联苯胺 3,3'-Dimethylbenzidine 119-93-7 C14H16N2 13 3,3二甲基-4，4-二氨基二苯甲 烷 3,3'-Dimethyl-4,4'-Diaminodiphenyl methane 838-88-0 C15H18N2 14 3氨基对甲苯甲醚 P-Cresidine 120-71-8 C8H11NO 15 4,4次甲基双(2氯苯胺) 4,4'-Methylene-Bis-(2-Chloroaniline) 101-14-4 C13H12Cl2N2 16 4,4二氨基二苯醚 4,4'-Oxydianiline 101-80-4 C12H12N2O 17 4,4二氨基二苯硫醚 4,4'-Thiodianiline 139-65-1 C12H12N2S 18 邻甲苯胺 O-Toluidine 95-53-4 C7H9N 19 2,4二氨基甲苯 2,4Toluylenediamine 95-80-7 C7H10N2 20 2,4,5三甲基苯胺 2,4,5-Trimethylaniline 137-17-7 C9H13N 21 对氨基偶氮苯 P-Aminoazobenzene 60-09-3 C12H11N3 22 邻甲氧基苯胺 O-Anisidine 90-04-0 C7H9NO 23 2,4二甲基苯胺 2,4-Xylidine 95-68-1 C8H11N 24 2,6二甲基苯胺 2,6-Xylidine 87-62-7 C8H11N 25 苯胺 Aniline 62-53-3 C6H7N 26 对苯二胺 1,4-Benzenediamine 106-50-3 C6H8N2 GB  9 附 录 B 质谱参考条件 质谱参考条件见 B.1 B.1 参考质谱条件 a) 雾化气:45 psi。 b) 喷雾电压:500 V。 c) 毛细管电压:4000 V。 d) 气流速度:7 L/min。 e) 气流温度:300 。 f) 鞘气(N2)流速:11 L/min。 g) 鞘气(N2)温度:380 。 h) 其他质谱参数见表 B.1。 表 B.1 26 种芳香族伯胺的主要参考质谱参数 序号 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 驻留时间 ms 碎裂电压 V 碰撞能量 eV 1 4氨基联苯 170.1 153.1,152.1 10 120 20,26 2 联苯胺 185.2 168.2,167.1 10 130 18,25 3 4氯邻甲苯胺 142.1 125,107.1 10 120 18,15 4 2萘胺 144.1 127,117 10 120 22,18 5 邻氨基偶氮甲苯 226.3 121.1,91.1 10 105 25,25 6 2氨基4硝基甲苯 153.2 107.1,90 10 115 15,18 7 对氯苯胺 128.1 111.1,93.1 10 120 22,18 8 2,4二氨基苯甲醚 139.1 124.1,108.1 10 112 14,14 9 4,4二氨基二苯甲烷 199.2 106,77 10 145 25,50 10 3,3二氯联苯胺 253.1 217,182.1 10 145 21,28 11 3,3二甲氧基联苯胺 245.2 230.1,213.2 10 135 18,18 12 3,3二甲基联苯胺 213.1 196.1,180.1 10 145 15,35 13 3,3二甲基-4， 4-二氨基 二苯甲烷 227.1 178.1,120.1 10 155 22,25 14 3氨基对甲苯甲醚 138.1 123.1,106.1 10 125 15,25 15 4,4次甲基双(2 氯苯胺) 267.1 195.1,140 10 155 30,30 16 4,4二氨基二苯醚 201.2 184.1,108.1 10 135 18,18 17 4,4二氨基二苯硫醚 217.1 200,124.1 10 135 16,18 18 邻甲苯胺 108.1 93.91 10 118 15,15 19 2,4二氨基甲苯 123.1 108,106.1 10 115 14,22 20 2,4,5三甲基苯胺 136.1 121.1,119.1 10 125 14,14 21 对氨基偶氮苯 198.2 93.2,92.1 10 130 15,20 22 邻甲氧基苯胺 124.1 109.1,92.1 10 110 13,15 23 2,4二甲基苯胺 122.1 107.1,105.1 10 105 15,15 24 2,6二甲基苯胺 122.1 107.1,105.1 10 105 15,15 25 苯胺 94.2 77,51 10 55 20,25 26 对苯二胺 109.1 92,65 10 115 15.21 GB  10 附 录 C 26 种芳香族伯胺液相色谱-质谱/质谱多反应监测（MRM）色谱图 26 种芳香族伯胺液相色谱-质谱/质谱多反应监测（MRM）色谱图见图 C.1。 1  4氨基联苯 2  联苯胺 3  4氯邻甲苯胺 4  2萘胺 5  邻氨基偶氮甲苯 6  2氨基4硝基甲苯 7  对氯苯胺 8  2,4二氨基苯甲醚 9  4,4二氨基二苯甲烷 10  3,3二氯联苯胺 11  3,3二甲氧基联苯胺 12  3,3二甲基联苯胺 13  3,3二甲基-4，4-二氨基二苯甲烷 14  3氨基对甲苯甲醚 15  4,4次甲基双(2氯苯胺) 16  4,4二氨基二苯醚 17  4,4二氨基二苯硫醚 18  邻甲苯胺 19  2,4二氨基甲苯 20  2,4,5三甲基苯胺 21  对氨基偶氮苯 22  邻甲氧基苯胺 23  2,4二甲基苯胺 24  2,6二甲基苯胺 25  苯胺 26  对苯二胺 图 C.1 26 种芳香族伯胺液相色谱-质谱/质谱多反应监测（MRM）色谱图 7 x10 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.7 0.8 0.9 1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 Counts vs. Acquisition Time(min) 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5 9 9.5 10 10.5 11 11.5 12 12.5 13 13.5 14 14.5 0.6 2 9,25 22 18 11,13 12 24 8,14 20 17 15 10 5 16,19 21 1 6 23,4 3 7 26 GB  11 附 录 D 26 种芳香族伯胺的分子量、定性离子和定量选择离子 26 种芳香族伯胺的分子量、定性离子和定量选择离子见表 D.1。 表 D.1 26 种芳香族伯胺的分子量、定性离子和定量选择离子 序号 化学名称 分子量 特征碎片离子（amu） 定性 定量 1 4氨基联苯 169 169,141,115 169 2 联苯胺 184 184,92,156 184 3 4氯邻甲苯胺 141 141,106,77 141 4 2萘胺 143 143,115,89 143 5 邻氨基偶氮甲苯 225 106,225,134 106 6 2氨基4硝基甲苯 152 152,106,77 152 7 对氯苯胺 127 127,65,92 127 8 2,4二氨基苯甲醚 138 123,138,95 123 9 4,4二氨基二苯甲烷 198 198,106,182 198 10 3,3二氯联苯胺 252 252,254,126 252 11 3,3二甲氧基联苯胺 244 244,201,158 244 12 3,3二甲基联苯胺 212 212,106,195 212 13 3,3二甲基-4,4-二氨基二苯 甲烷 226 226,211,120 226 14 3氨基对甲苯甲醚 137 122,137,94 122 15 4,4次甲基双(2氯苯 胺) 266 231,266,195 231 16 4,4二氨基二苯醚 200 200,108,171 200 17 4,4二氨基二苯硫醚 216 216,184,80 216 18 邻甲苯胺 106 106,77,89 106 19 2,4二氨基甲苯 122 121,122,94 121 20 2,4,5三甲基苯胺 135 120,135,134 120 21