三氧化二砷抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及机制探讨.ppt

三氧化二砷抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及机制探讨,复旦大学附属中山医院 刘厚宝,面临的 困境,胆囊癌的发病率逐年上升 大多数患者确诊时已属中晚期 切除率低 放化疗均不敏感 5年生存率5%,三氧化二砷,“Proud of China” “Ancient remedy performs new tricks” Science,1996,Aug 2（卷首语） 在血液系统肿瘤的基础和临床取得突破性进展 在实体瘤的研究领域颇受关注 2005年底被批准为治疗原发性肝癌的适应证 对胆囊癌有效？,三氧化二砷和胆囊癌,两者之间的研究很少 国外 OVID,MEDLINE,ELSEVIER 共2篇，收录于BBRC 国内 中文科技目录 共15篇,临床应用,将As2O3用于4例中晚期胆囊癌患者，2个疗程，1例获得完全缓解（8个月） 钱军,秦叔逵,何泽明,等.三氧化二砷注射液治疗中晚期原发性肝胆癌的临床研究J.中华肿瘤杂志,2001,23(6):487-489,目 的,本研究旨在观察As2O3对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制，期冀为将其应用于胆囊癌临床治疗提供理论依据。,中山医院普外科,胆囊癌细胞 GBC-SD 复苏，转移，培养，观察生长情况,雌性裸小鼠 BALB/c-nu/nu 以0.5ml/只，皮下注射 ，观察瘤的生长情况,观察细胞生长至对数生长期 收获细胞，以NS配置成1106浓度,材料与方法,中山医院普外科,材料与方法,中山医院普外科,体积,瘤重,Cyclin d1,Bcl-2 表达,每3天观察实验组及对照组的肿瘤体积,观察至21天处死裸鼠，测量瘤重，并计算肿瘤生长抑制率,免疫组化法测定两组肿瘤组织中Cyclin D1蛋白表达的情况,免疫组化法测定两组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达的情况,材料与方法,中山医院普外科,材料与方法,公式： V(瘤体积) = ab2 /2 (a为长径，b为短径),结果在SPSS11.5软件下进行,两组均数之间进行t检验，P 0.05表示差异有显著性。,两组肿瘤体积的比较,结 果,中山医院普外科,结 果,中山医院普外科,免疫组化对Cyclin D1表达的检测,As2O3组Cyclin D1的蛋白表达量较对照组明显下降,免疫组化对Bcl-2表达的检测,As2O3组Bcl-2的蛋白表达量较对照组明显下降,Western Blot检测Bcl-2、Cyclin D1蛋白的表达情况,讨 论,本研究使用亚砷酸注射液10mg/kg实验，最终发现亚砷酸组的瘤体积和瘤重均较阴性对照组明显减小。其肿瘤细胞生长抑制率为46.98%。 说明10mg/kg剂量的亚砷酸能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长，亚砷酸对其起到抗癌作用。,中山医院普外科,中山医院普外科,4. 抑制内皮细胞增生，抗肿瘤血管形成，抑制VEGF的表达,5. 影响肿瘤抑癌基因，癌转移基因的表达，影响肿瘤细胞的细胞周期等,1. 上调细胞凋亡促进基因如Bax，Fas等的表达，下调抑制基因如Bcl-2等的表达,2. 选择性的抑制肿瘤细胞增殖，并使其破碎坏死,3. 抑制端粒酶活性,亚砷酸（As2O3）抗癌作用的可能机制,As2O3,讨 论,Cyclin D1,细胞周期进程的启动子 Cyclin D1 上升,更多细胞从静止期进入增殖期,肿瘤细胞增殖加快 Cyclin D1 下降,更多细胞从增殖期进入静止期,肿瘤细胞增殖减缓 文献报道：降低乳腺癌细胞 、肝癌细胞的Cyclin D1能使癌细胞生长、增殖及侵袭力下降,Bcl-2与胆囊癌,40 例原发性胆囊癌中28 例Bcl-2反应阳性 Bcl-2表达与在胆囊癌的分期密切相关 胆囊癌组织中细胞凋亡与Bcl-2表达密切相关 Bcl-2表达与胆囊癌发生发展密切相关 原发性胆囊癌组织中细胞凋亡与相关基因bcl-2和bax的表达J.陕西医学杂志,2005,34(2)231232,结 论,As2O3 (10mg/kg)可抑制人胆囊癌GBC细胞裸鼠移植瘤的生长，主要通过下调肿瘤组织Cyclin D1和Bcl-2的表达从