医学微生物学培训讲义

1 烟尘及指甲中，藏着大量令人生病的病原微生物。“生水里有 小虫，喝了肚子疼”的道理，以及“不随地吐痰”、“饭前便后洗手”的卫生习惯，早已成为妇孺皆知的普通常识了。然而，这种简单道理，要是在300多年前，莫说一般人们，就连赫赫有名的英国皇家学会也全然不知。本来，这无孔不入的微生物，何时何地不在与人们打交道？甚至在我们体内到处安营扎寨，自由钻进钻出哩。可是，由于人们不能用肉眼看见它们，因而几千年来，人类竟不知道世界上还有微生物这东西存在。那么，是谁第一个发现了这“小人国”里的捣蛋“居民”？他，就是列文虎克！早年的列文虎克由于父亲的早逝，妈妈无力负担他求学，岁时，就来到首都阿姆斯特丹的一个杂货铺里当了学徒。虽然天天早起晚睡，干着脏活累活，然而，他却并没有多少的怨言，因为来到这里虽然时间不长，他却有幸结识了杂货铺对面一位和善的老大爷。老人家中藏书丰富，博学多识，他给年轻的列文虎克讲了许多充满神奇色彩的新鲜而有趣的故事，这使列文虎克懂得了想要知道的关于大自然奥秘的许多东西。于是，他一有空暇就向老人求教，在老人那里借阅图书，老人也非常喜欢这个爱读书、爱提问的好孩子。后来，在一天深夜，他正在伏案读书时，被隔壁眼镜店作坊的工匠磨制镜片的沙沙作响的声音吸引住了。他放下手中的书本，悄悄来到眼镜作坊里。他望着工匠们磨出的一块块镜片，脑际突然浮现出一个奇怪的念头：如果能磨出一块特殊的镜片，让我们能看清许多用肉眼看不清、看不到的东西该多好哇！就是这样一个灵感似的奇想，竟从此使他下定了磨制一块“魔镜”的决心。几年之后，他终于又研制出多台更精制、完美的显微镜英国皇家学会(Royal Society)是英国资助科学发展的组织。成立于1660年。并于1662年、1663年、1669年领到皇家的各种特许证。英女皇是学会的保护人。全称“伦敦皇家自然知识促进学会”。学会宗旨是促进自然科学的发展。它是世界上历史最长而又从未中断过的科学学会。它在英国起着全国科学院的作用。朊病毒朊病毒就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有核酸的病毒。1997年诺贝尔医学或生理学奖的获得者美国生物学家斯垣利普鲁辛纳（ S. B. Prusiner）就是由于研究朊病毒作出卓越贡献而获此殊荣的（Ebola virus）又译作伊波拉病毒，是一种能引起人类和灵长类动物产生埃博拉出血热的烈性传染病病毒，有很高的死亡率，在50至90之间。埃博拉病毒的名称出自非洲扎伊尔的“埃博拉河”。这种病毒来自“Filoviridae”族.“埃博拉”属于丝状病毒，这是一种十分罕见的病毒，1976年在苏丹南部和扎伊尔即现在的刚果（金）的埃博拉河地区发现它的存在后，引起医学界的广泛关注和重视，“埃博拉”由此而得名。“埃博拉”病毒的形状宛如中国古代的“如意”，革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立。 细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。编辑本段革兰氏染色原理G菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：）涂片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。）草酸铵结晶紫染1分钟。）自来水冲洗，去掉浮色。) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。）用蕃红染液复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。青霉素（Benzylpenicillin / Penicillin）又被称为青霉素G、peillin G、 盘尼西林、配尼西林、青霉素钠、苄青霉素钠、青霉素钾、苄青霉素钾。青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素类抗生素是-内酰胺类中一大类抗生素的总称。青霉素类抗生素的毒性很小，由于-内酰胺类作用于细菌的细胞壁，而人类只有细胞膜无细胞壁，故对人类的毒性较小，除能引起严重的过敏反应外，在一般用量下，其毒性不甚明显.是化疗指数最大的抗生素。一、热力灭菌法主要是利用高温使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，代谢发生障碍，导致细胞死亡。常用方法有1干热灭菌法(1) 焚烧彻底的灭菌法，仅适用废弃物及实验动物尸体。(2) 烧灼直接火焰灭菌，适用于接种环、试管、瓶口等。(3) 干烤利用干烤箱，1601702小时，可杀死芽胞，达到灭菌目的。适用于玻璃器皿、金属器械、陶瓷等。(4) 红外线是一种0.771000m波长的电磁波,杀菌所需温度和时间与干烤相似。2湿热灭菌法(1) 巴氏消毒法6230分钟或71.71530秒钟，主要用于杀死酒类、牛奶及乳制品中的病原微生物，不破坏它们的质量。(2) 煮沸法100 5分钟可杀死细菌繁殖体。主要用于消毒食具、污染的器械、刀、剪等。(3) 流动蒸汽消毒法利用常压下100(4) 高压蒸汽灭菌法是最有效最常用的灭菌法。使用高压蒸汽灭菌器，通常在15磅平方吋 (1.05kgcm2)时，温度可达121.3，维持1520分种，可杀死所有微生物，包括细菌的芽胞。耐高温，耐高压，不怕湿的物品，均可用此法灭菌，如手术器械、敷料，手术衣帽、生理盐水、普通培养基等。二、辐射杀菌法1紫外线波长200300nm的紫外线主要作用于 DNA，使一条 DNA链上相邻的二个胸腺嘧啶共价结合而成双聚体，干扰DNA的复制与转录，导致细菌变异或死亡。但其穿透力极弱，不能透过玻璃、纸片、尘埃等，故只能用于物体表面及空气的消毒，常用于手术室、病房、无菌室及超净工作台的消毒。2电离辐射 包括高速电子、X射线、Y射线等，主要产生游离基破坏DNA，杀菌力强，穿透力强。常用于不耐热的塑料制品、也可用于饮料食品，不会破坏营养。3微波波长1mm1m左右的电磁波，常用于非金属器械、药杯及其他用品的消毒。三、滤过除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去。常用的有玻璃滤器和薄膜滤器，适用于血清、抗生素、药液等不耐高温的物质除菌，但不能除去病毒、支原体、衣原体等微生物。四、超声波消毒法超声波为不被人耳感受的高于20千周/S的声波，主要用于粉碎细