乙肝患者血清标志物和病毒含量的相关性研究.doc

乙肝患者血清标志物和病毒含量的相关性研究70理想.tba是一种结合型胆汁酸,主要在肝脏内合成,然后被肝细胞分泌人胆汁,随胆汁至肠道后,在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸.健康人的血清中胆汁酸含量极微,而当肝细胞受损或肝内,外阻塞时,胆汁酸代谢就会出现异常,总胆汁酸就会升高,因此血清tba水平是反映肝实质损伤的一项重要指标.文献3报道,tba与ggt和0【一l一岩藻糖苷酶(afu)联合检测可提高phc的诊断率,本文中tba单项指标诊断phc阳性率仅为64.2%.ggt广泛分布于人体组织中,在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中.正常人血清中ggt主要来自肝脏,它在急性肝炎,慢性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高,phc可引起血中水平显着升高.本研究中ggt水平在肝硬化及phc中均显着性升高.粱淑新等报道,ggt在phc中的诊断阳性率高达95%,但其特异性不高,严重限制其在phc诊断方面的应用.alt是一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶,广泛存在于人体中,以肝脏细胞的细胞浆中最多.当人体内各组织器官活动或病变时,就会把其中的alt释放到血液中,使血清alt水平升高.肝炎或者肝硬化时,患者血清中的alt水平会显着升高,alt是肝脏病变程度的一个重要指标.从表3可知,afp+tba联检与afp+ggt联检和afp+alt联检相比,afp+tba联检对于phc组的诊断阳性率为86.6%,而afp+ggt联检对于肝硬化组的诊断阳性率为81.0%.afp+tba+ggt联检对&clinmed,adr.201i.vo1.18.no.2于phc组和肝硬化组的诊断阳性率分别为92.5%和88.1%.当afp与tba,ggt和alt四项指标联合检测时,对于phc组和肝硬化组的诊断阳性率均升高,分别为94.0%和90.5%.因此,与单项指标检测相比,afp与tba,ggt和alt四项指标联合检测可以明显提高phc和肝硬化的诊断阳性率.总之,本研究表明,单项血清指标检测有一定的局限性,容易造成漏诊和误诊.afp与tba,ggt和alt四项指标联检,可以明显提高phc和肝硬化的诊断阳性率.但是联合检测并非指标越多越好,联检最大的好处是能提高阳性率,尽可能避免漏诊和误诊,为临床进一步明确诊断提供参考,但在同时也增加了假阳性的比率.因此,联合检测虽然可提高对肝癌的诊断水平,且检测方法简单易行,但只能作为筛选指标.要确诊phc,仍需要结合影像学资料以及病理学资料分析,以避免误诊的可能.参考文献:1danieeb,bencivengaa,megnaas,eta1.alphafetopmteinandultrasonographyscreeningforhepatocellularcarcinomaj.gastroenter-ology,2004,127(5):108?112.2paczesnys,krijanovskioi,brauntm,eta1.abiomarkerpanelforacutegraftversushostdiseasej.blood,2009,113(2):273-278.3熊彪,蔡其浩,蒙凯.三项生化指标联合甲胎蛋白诊断原发性肝癌的研究j.当代医学,2008,9(149):3738.4粱淑新,施俊英.临床检验操作技术系列丛书:生物化学检验分册m.北京:军事医学科学出版社,2007:132133.5刘慧玲,马永能,张鹏,等.4种血清标志物联合检测在肝癌诊断中的价值j.检验医学与i临床,2010,7(2):122123.(张增武编辑)乙肝患者血清标志物和病毒含量的相关性研究林琳(民航总医院检验科,北京100123)摘要:为探讨乙肝患者血清病毒标志物(hbvm)和乙肝病毒dna(hbvdna)含量之间的关系,分离618例乙肝患者血清标本,采用电化学发光免疫分析法检测乙肝两对半(hbsag,hbsab,hbeag,hbeab和hbcab),实时荧光定量pcr(rqpcr)方法检测hbvdna含量.结果显示,618例患者血清中,hbvdna和hbvm不同组合之间存在一定的差异.大三阳hbsag(+)+hbeag(+)+hbcab(+)和hbsag(+)+hbeag(+)模式hbvdna阳性率和含量最高,显着高于其他组(p<0.o1),小三阳hbsag(+)+hbeab(+)+hbcab(+)模式hbvdna的阳性率为35.5%,含量4.110copies/ml;hbsag(+)+hbcab(+)模式hbvdna的阳性率为55.6%,含量为3.3x10copies/ml;hbsab(+)+hbeab(+)+hbcab(+)hbvdna的阳性率为4.5%,含量为4.710copies/ml;在hbsab(+)+hbcab(+),hbeab收稿日期:2010.11-08;修回日期:2010?12-06标记免疫分析与临床2011年4月第l8卷第2期(+)+hbcab(+)和hbcab(+)模式中未检测到hbv.dna.结论:乙肝患者hbvm和hbv-dna含量之问存在联系,联合检测hbv.m和hbvdna能够更好地解释病情,对临床诊断及用药具有指导意义.关键词:乙型肝炎;乙肝血清标志物;乙肝病毒dna;荧光定量pcr;电化学发光免疫分析中图分类号:r575.1文献标识码:a文章编号:10061703(2011)02-0070-03thecorrelativeanalysisbetweenhbv-mandhbv-dnainpatientswithhepatitisblinlin(departmentofclinicallaboratory,civilaviationgeneralhospital,beijing100123,china)abstract:toexploretherelationshipbetweenhepatitisbviresserummarkers(hbv.m)andthecontentofhbv-dna,thehbvm(hbsag,hbsab,hbeag,hbeabandhbcab)in618hbvinfectedpatientsweremeasuredbyecliandthecontentofhbvdnaweredetectedbyfluorescencequantitativepcr(fqpcr).theresultsshowedthatthepositiverateandcontentsofhbvdnainhbsag(+),hbeag(+),hbcab(+),hbsag(+)andhbeag(+)groupsweresignificanthigherthanthatofothergroups(p<0.05).thepositiverateofhbvdnainhbsag(+),hbeab(+)andhbcab(+)groupwas35.5%andtheaveragecopieswas4.110copies/ml;inhbsag(+)andhbcab(+)groupwas55.6%andtheaveragecopieswas3.310copies/ml;inhbsab(+),hbeab(+)andhbcab(+)groupwas4.5%andtheaveragecopieswas4.710copies/ml;inhbsab(+)hbcab(+),hbeab(+)hbcab(+)andhbcab(+)groupswasnotdetectable.thecombinationdetectionofhbvmandhbvdnamayhelptoexplainpathogeneticconditionandhassignificanceinthediagnosisandtreatmentofpatientswithhepatitisb.keywords:hepatitisb;hbvm;hbvdna;fqpcr;ecli乙型肝炎病毒(hbv)血清标志物是临床判断患者病情和传染性的重要依据之一,能够反映机体对hbv的免疫反应状态.随着分子生物学的发展,荧光定量pcr检测技术逐渐应用于临床诊断和治疗,它能够直接检测hbvdna的水平,反映hbv的感染活性.我们通过检测乙肝患者血清病毒标志物和血清中病毒的含量,将结果进行对比分析,探讨血清标志物与病毒含量的关系.材料和方法1标本来源2008年9月至2010年5月在我院就诊同时做乙肝两对半和hbvdna检测的门诊和住院的乙肝感染者,共618例,其中男性402例,女性216例,年龄563岁.2仪器与试剂hbv-dna检测试剂(上海科华生物工程有限公司产);基因扩增分析仪(rochelightcycler480);乙肝两对半检测试剂(德国罗氏公司产);电化学发光分析仪(德国罗氏公司产).3检验方法乙肝两对半检测采用电化学发光免疫分析(ecli)法,hbv-dna定量检测采用实时荧光定量pcr(fqpcr)法,所有操作均严格按照说试剂盒说明书进行.4统计学处理使用spss11.5软件对数据进行统计学分析,组间计量资料比较采用t检验,组间阳性率之间的比较采用检验,以p<0.05为差异有统计学意义.结果1elisa检测乙肝两对半结果618例血清样本乙肝血清学标志物出现了8种模式,具体见表,以大三阳hbsag(+)+hbeag(+)+hbcab(+)和/j,三阳hbsag(+)+hbe.ab(+)+hbcab(+)模式最多.2hbvdna定量检测结果以hbvdna含量<110.copies/ml为阴性,hbvdna含量110copies/ml为阳性.618例血清样本中,hbvdna阳性336例,hbv.dna阴性282例,阳性率为54.4%.3hbv?m与hbvdna结果比较不同的血清hbvm模式,hbvdna阳性率和平均含量有差异,其中大三阳和hbsag(+)+hbeag(+)模式的hbv-dna阳性率和平均含量最高,与其余各组比较差异有显着性(p<0.05)./j,三72labeledimmunoassavs&clinmed.aor.2011.vo1.18.no.2阳模式hbvdna阳性率为35.5%,其含量较第1,hbvdna阳性率和含量见表.4组次之,但仍旧高于其他组(p<0.05).各模式表hbvm模式和hbvdna定量的关系讨论大三阳是指表面抗原,e抗原和核心抗体同时阳性,表中第1组即为大三阳.当病人检测是大三阳时,hbv-dna阳性率可达98.9%,同时hbv.dna的拷贝数显着高于其他模式(p<0.05),与文献报道结果相一致.同时我们发现,第4组模式hbvdna阳性率和拷贝数也很高,说明e抗原是乙肝病毒在人体内复制的标志33.hbsag,hbeag同时阳性,在一定程度上提示hbv.dna复制活跃,因此大三阳的病人具有较强的传染性.小三阳指的是表面抗原,e抗体和核心抗体同时阳性,表中第2组即为小三阳.当病人检测是小三阳时,hbvdna阳性率为35.5%,与第1组和第4组相比,hbvdna浓度较低(p<0.05),说明虽然hbeag转阴,但是乙肝病毒在人体内复制并没有停止,仍然具有传染性.hbsag(+)+hbcab(+)模式,hbvdna阳性率为59.6%,低于大三阳组,但高于小三阳组.有人指出这种情况可能与乙肝病毒1896位核苷酸的变异有关,这一点突变阻止了前c区序列的表达和妨碍了hbeag的分泌,但hbvdna仍然在复制,所以这种模式也应加以重视.hbsag,hbeag转阴和hbsab的出现是机体清除乙型肝炎病毒的标志.第6组,第7组和第8组血清中测出hbvdna阳性检出率为零,说明hbsab在清除乙型肝炎病毒时起了关键性作用.hbsab(+)+hbeab(+)+hbcab(+)模式在临床上较常见,过去我们一直认为这种模式是急,慢性乙肝恢复期,或者是曾经感染过乙肝病毒已获得免疫力,产生了保护性hbsab,病毒已被清除,不存在传染性.但是近来有研究显示,hbsag阴性人群中,有相当一部分人血液中存在hbv感染,hbsab(+)+hbeab(+)+hbcab(+)模式中hbvdna阳性率达到了13%_5j.在本研究中,我们也发现该模式中极个别存在病毒低水平复制,仍然有一定的传染性,这一结果与loriot6和kaneko等的报道一致.因此对于hbsag阴性者,仍有必要对其hbv.dna进行检测,以减少对hbv感染的漏诊.综上所述,fqpcr与elisa两种方法均可检测检测乙肝病毒的感染,但fq.pcr能够直接检测血清hbvdna含量,可以准确地反映hbv的感染状态和复制情况,特别是可以防止由于基因变异所导致的乙肝漏诊患者.hbv.m和hbv.dna两者存在紧密的联系,两者同时检查能更准确的判断传染性强弱,同时我们也不排除一些非常规模式的出现,所以hbv.dna的检测尤为重要,它对评价抗病毒治疗效果方面具有较高的临床应用价值.参考文献:1唐芳玫.乙型肝炎病毒dna与血清标志物的关系j.检验医学与临床,2010,7(1):28.29.2徐光明,贺欣,袁水斌,等.血清乙肝五项模式与hbvdna水平之间关系及其l临床应用j.实验与检验医学,2009,27(6):6