丹参滴丸的药学研究.ppt

,丹参滴丸的药学研究,级,汇报人： 学号 ：,目录,选题的目的及意义,丹参简介,制备工艺的优化,制剂成型工艺的研究,主要的评价,第 3 页,一.选题的目的及意义,WHO报导：全世界每年患心脑血管病死亡的人数近1200 万。我国每年新发病例就有130万,每年死亡高达60万,占所 有疾病导致死亡率第一位,并且数字还在逐年增加!其发病率 之高, 死亡人数之多,可谓触目凉心。 但是，自 20 世纪 80 年代以来，由于新药研发的难度加大, 研发角度转向：经过成百上千年的临床验证的，疗效确切、 安全性高的以植物药为代表的天然药物上来。 新型纯中药制剂丹参滴丸，是中医的传统理论与现代 药学新技术相结合的结晶，是在丹参片的基础上改制成的 滴丸剂型，具有活血化瘀.理气止痛等作用的特点。主要用 于冠心病、心绞痛等心血管疾病的治疗。,第 4 页,选题的目的及意义,相较于其他剂型，具有药效迅速，生物利用度高的特点。此剂型尤其适用于难溶性不易吸收的药物,扩张血管、改善微循环和抗心肌缺血缺氧等作用 主用于心血管疾病的治疗，可以有效缓解心绞痛和胸闷的症状。,口服或舌下含服.一次1袋.一日3次.孕妇、有出血倾向者慎用,丹参滴丸优点及用法,第 5 页,二.丹参简介,多年生草本。茎高4080cm。叶常为单数羽状 复叶；小叶37叶，卵形或椭圆状卵形。轮伞 花序至多花，组成顶生或腋生假总状花序，花 萼紫色，花期46月，果期78月。 生于山坡 草地、林下、溪旁。主产四川、山西等地,丹参的主要活性成分：水溶性的代表成分丹酚 酸B(Salvianolic acid B) 和脂溶性的代表成分丹参 酮A(TanshinoneIA),第 6 页,三.制备工艺的优化,丹参的鉴别与检查,性状鉴别 本品根茎短粗，根数条，略弯曲，有的分枝并具须状细根，长1020cm，直径0.31cm。 表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹。老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落。质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色。 气微，味微苦涩。,第 7 页,制备工艺的优化,显微鉴别 本品粉末红棕色。 石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，也有延长呈纤维状，边缘不平整，直径1470m，长可达257m，孔沟明显，有的胞腔内含黄棕色物。 木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径1227m，具缘纹孔点状，纹孔斜裂缝状或十字形，孔沟稀疏。 网纹导管和具缘纹孔导管直径1160m,第 8 页,制备工艺的优化,薄层鉴别（丹参酮 IIA） 取药材粉末 1g 加乙醚 20ml，振摇，放置 1 小时；滤过，待滤液挥干，残渣加入乙酸乙酯 1ml 使溶解，做为供试品溶液。另取丹参对照药材 1g，同法制成对照药材溶液。再取丹参酮 IIA 对照品，加入乙酸乙酯制成每 1ml 含 2mg 的溶液，做为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2015 版）试验，吸取上述三种溶液各 5l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以石油醚(6090 ) -乙酸乙酯（10:2）为展开剂，展开，取出，晾干。,第 9 页,制备工艺的优化,薄层鉴别（丹酚酸 B ） 取药材粉末 0.2g，加入 75%甲醇 25ml 加热回流1小时，过滤，滤液浓缩至 1ml 作为供试溶液。另取丹酚酸 B 对照品适量，加入 75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2015 版）试验，吸取上述溶液各5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上， 以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2:3:4:0.5:2)为展开剂，展开，取出，晾干。,第 10 页,制备工艺的优化,水分检查 取丹参粉末3g，精密称定。然后将粉末平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，打开瓶盖在100105干燥5 小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中冷却30分钟，精密称定，再在上述温度下干燥 1 小时，冷却称重。至连续两次称重的差异不超过5mg为止。计算供试品中水分含量(%)。 根据试验结果规定，本品水分不得超过10%,总灰分检查 将丹参药材粉碎，取能通过二号筛的粉末5g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量，缓缓炽热至完全炭化，逐渐升温至550使完全灰化并至恒重，根据残渣重量计算供试品中总灰分的量(%) 根据试验结果规定，本品总灰分不得超过9.0%,第 11 页,制备工艺的优化,炮制与加工（微波真空法） 取丹參，置入真空气相置換式润药机，抽真空使相对真空度达到-70KPa至-80KPa，維持真空度不变加入黄酒，所加入黄酒的质量与上述丹參质量的比例关系为0.1:1，恢复常压，闷润20-30min，将上述物料平铺在托盘上，物料厚度为1.0-2.0cm，置入微波炉中加热，微波频率245050MHz，炉内温度130-150，加热6-10min，期间物料翻动1-2次，结束时，取出物料，放凉，即得。所述相对真空度为-75KPa。所述闷润的时间为25min。所述平铺在托盘上的物料厚度为1. 5cm。所述微波炉内温度为140。,第 12 页,制备工艺的优化,提取工艺条件优化（丹参酮 IIA） 目前提取丹参酮 IIA的方法有很多文献报道主要有渗漉法，超声提取法，水蒸气蒸馏法，加热回流提取法和超临界CO2萃取法等 1.渗漉法：虽然可以改变溶剂浓度，但提取周期过长 2.超声提取法：此法无加热过程，溶剂难以进入药材内部 3.水蒸气蒸馏法：该法适用于分子量小的苯醌类化合物。但是，丹参酮A 的分子量比较大 4.加热回流提取法：由于加热时间短以及提取到一定阶段缺乏浓度梯度，不利于成分的进一步溶出。 5.超临界CO2萃取法：具有无毒、快速、廉价、低温等优点，其溶解性能可通过调节压力和温度来控制。因而可获得选择性丹参酮A 萃取物。,第 13 页,制备工艺的优化,正交设计优化超临界 CO2提取丹参酮A 的工艺 超临界 CO2萃取的主要参数为温度、压力、夹带剂的量和 CO2流量。现以这四个因素建立 L9（34）正交设计表对工艺进行筛选。,第 14 页,制备工艺的优化,结论 1.温度：在一定压力下,提高温度,可使萃取率升高。但温度升得过高又会使丹参酮A 溶解能力降低，萃取率下降 2.压力：丹参酮A 得率随着压力的升高而升高，当压力在 15Mpa 之下，萃取物以油脂为主，丹参酮类成分含量极少,故超临界萃取的压力一般都控制在 1545MPa。 3.夹带剂：增加夹带剂(乙醇)的用量可增加产品浸膏的收率。但预试验显示，当夹带剂用量超过 50时，提取率不再提高。 因此，超临界CO2萃取丹参酮A 的最佳工艺为 55，15MPa，加 150ml无水乙醇(300g丹参)，CO2流量为 40L/h，在此工艺下丹参酮A 产量最大。,第 15 页,制备工艺的优化,正交设计优化水提工艺（丹酚酸 B） 水提取的主要参数为加水量、提取时间、提取次数等。现以这三个因素建立 L9（34）正交设计表对工艺进行筛选。,第 16 页,制备工艺的优化,结论 1.干膏收率：可认为各因素影响大小顺序为 CAB；再从各因素水平来看（K值分析），因素A、C为 K3 K2K1，因素B为 K3K1K2，初步认为其提取条件以 A1B1C1为佳。 2.丹酚酸B含量：可认为各因素影响大小顺序为 CBA；再从各因素水平来看（K 值分析），因素 A、B、C均为K3 K2K1，初步认为其提取条件以A3B3C3为佳。 初步认为其提取条件以 A3B3C3为佳。,第 17 页,制备工艺的优化,正交设计优化水提工艺 方差分析结果表明，因素 C 对出膏率及丹酚酸 B含量均有显著影响，因素 A、B 对出膏率及丹酚酸 B 含量均无显著影响，考虑实际生产以有效成分含量为主，为减少能耗及生产周期，因此确定 A1B2C3，即 6 倍量水，提取 3 次，每次 1.5 小时。,第 18 页,制备工艺的优化,工艺路线设计,丹参,炮制后的丹参,微波真空法,预处理后，粉碎，过40目。超临界 CO2萃取：55，15MPa， 加 150ml无水乙醇/300g丹参，CO2流量为 40L/h,滤液（丹参酮A ）,药渣,药渣,滤液,大孔吸附树脂精制后，浓缩,丹酚酸 B 浸膏,浓缩,丹参酮A 浸膏,水提（6 倍量水，提取 3 次，每次1.5 小时),第 19 页,四.制剂成型工艺的研究,制剂处方,2015年药典 复方丹参滴丸 【处方】 丹参 三七 冰片 【制法】以上三味，冰片研细；丹 参 、三七加水煎煮，煎液滤 过 ，滤液浓缩，加人乙醇，静置使沉淀，取上清液，回收乙醇， 浓缩成稠膏，备用。取聚乙二醇适量，加热使熔融，加人上述 稠膏和冰片细粉，混 匀,滴人冷却的液体石蜡中，制成滴丸， 或包薄膜衣，即得。,第 20 页,制剂成型工艺的研究,PEG4000: PEG6000 = 3:1 时，基质较易滴出，且空白滴丸成型性较好，滴丸圆整，硬度比较合适。,基质选择,第 21 页,制剂成型工艺的研究,基质与药物比例,选择基质与药物比例为 3:1 较为合适。,第 22 页,制剂成型工艺的研究,滴制温度及冷却剂温度的选择,结果 滴制温度：控制在 80时比较合适。但应充分考虑到丹参有效成分在温度过高时容易破坏，故生产时一批量不宜太多。 冷却剂温度：上常温下低温的冷却剂对滴丸的冷却效果较好。,第 23 页,制剂成型工艺的研究,冷却剂种类的选择,以二甲基硅油为冷却剂时，滴丸下降速度比较合适，滴丸形状较为规则，故选择二甲基硅油为冷却剂。,第 24 页,制剂成型工艺的研究,滴距、滴口内外径、滴速的选择,即最佳滴制条件为滴距 4cm，滴口内外径 3/4.5mm，滴速为 60d/min。,第 25 页,制剂成型工艺的研究,丹参滴丸的优化工艺条件,PEG4000:PEG6000=3:1为基质 二甲基硅油为冷却剂 药液温度为:80 冷却液的温度为:上常温下低温 药物基质 =13 滴距为:4cm 滴口内外径:3/4.5mm 滴速为:60滴/min 结论 该方法确定的丹参滴丸制备工艺稳定可行。,第 26 页,制剂成型工艺的研究,基质,药物,均匀分散,滴制,冷却,洗丸,干燥,薄膜包衣,选丸,质量检查,包装,第 27 页,制剂成型工艺的研究,优化后的制剂处方,【处方】 丹参 【制法】取丹参脂溶性有效部位与水溶性有效部位提取物，以 1:1 比例混合均匀作为原料药物，粉碎，过六号筛。与 PEG4000: PEG6000（3:1）以 1:3 熔融混匀，80保温，在滴距4cm，滴口内外径3/4.5mm，滴速为60d/min的条件下滴入上边常温下边低温的二甲基硅油中，制成 1000 丸，即得。 【性状】本品为棕褐色滴丸，气微，味苦。,第 28 页,五.主要的评价,稳定性评价（加速试验）,第 29 页,主要的评价,第 30 页,主要的评价,安全性评价,急毒实验 方法：将丹参滴丸用蒸馏水配制成最大浓度3.5g生药/ml。取昆明种健康小鼠20只，体重1822g，雌雄各半，禁食16h后，按体重给小鼠灌服最大浓度（3.5g生药/ml）最大体积0.4ml/10g）的丹参滴丸22.5g生药/kg。观察小鼠灌胃后即刻至7日内动物的一般行为、步态、被毛、尿、粪便等毒性反应情况。 结果：20只小鼠口服丹参滴丸后，活动及饮食一切正常，未出现异常状态。实验结果还表明，丹参滴丸22.5g 生药/kg未引起小鼠死亡。据此得出的最大耐受剂量为 22.5g 生药/kg，相当于人正常用量的150倍。,第 31 页,主要的评价,药效评价,丹参滴丸对垂体后叶素致家兔心肌缺血的影响 取健康家兔 6 只，随机分为阴性对照组、阳性对照组、试验组共三组，试验组给药剂量为 230mg kg-1d-1，阳性对照组给药剂量为 62mg kg-1d-1，连续给药 10 天，于末次给药后 1h，给家兔耳缘静脉注射垂体后叶素 2.5U/kg（取垂体后叶素原液（1ml6U）3ml 用生理盐水稀释至 9ml，使浓度为 2U/ml），记录心电图及心率的