（精选课件）某些因素对离体蛙心心脏活动的影响.pptx

离体蛙心灌流及某些离子、药物 对离体蛙心活动的影响,1,主要内容,相关理论知识 实验部分 实验目的 实验对象 实验仪器与药品 实验步骤 结果分析与讨论,2,相关理论知识,正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。,3,相关理论知识,心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋 性、传导性和收缩性。 心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物 质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对 心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显 的影响。,4,影响心肌细胞电生理特性的原因,1.心肌的自动节律性 （1）最大复极电位与阈电位的差距 （2）4期自动除极速度,2.心肌的兴奋性 （1）静息电位水平：依赖于细胞外K+浓度 （2）Na+通道的性状,相关理论知识,5,3.心肌的传导性 主要取决于动作电位0期除极速度和幅度,4.心肌的收缩性 依赖于细胞外钙离子浓度,相关理论知识,影响心肌细胞电生理特性的原因,6,相关理论知识,离子对心脏活动的影响,钾离子 K+参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K+浓度梯度，还与细胞膜对K+通透性有关，因此其影响是多方面的,7,相关理论知识,离子对心脏活动的影响 钙离子 Ca2+对Na+内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作 用，对静息电位无影响。 Ca2+o ，可使心肌细 胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。,8,相关理论知识,迷走神经和乙酰胆碱 迷走神经兴奋时，节后纤维释放Ach,激动心肌 细胞膜上M型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、 负性变时等效应。 心交感神经与去甲肾上腺素 心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上 腺素，激动心肌细胞膜上的受体，产生正性变 力、正性传导、正性变时等效应。,9,实验目的 1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。 2.用离体蛙心灌流的方法观察：,10,实验对象 蟾蜍,11,实验仪器设备 RM6240生物采集系统 张力换能器 蛙类手术器械 蛙心插管 试管夹 缝合线 蛙心夹 铁支架 滴管,实验药品 任氏液 lKCl 3CaC12 l：10,000 E l：10,000 ACh 3乳酸 2.5NaHCO3,12,实验步骤,一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.破坏脑和脊髓 2.暴露心脏,13,一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.观察心脏的解剖结构,实验步骤,（腹面）,（背面）,14,实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。,15,实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一 斜口，将插管插入动脉 圆锥， 在心室收缩时 将插管插入心室，结扎 固定。,16,1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支 架支台上，在心室舒张期 将与换能器相连的蛙心夹 夹在心尖上。,实验步骤 二、连接仪器和装置,17,注意事项,1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗3次。 2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。 3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4.换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。 5.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。,18,观察项目,一、描记正常心搏曲线,曲线幅度 收缩的程度 曲线疏密 心率 曲线基线 舒张的程度,19,二、观察离子、药物和酸碱的影响 1)更换任氏液为3%氯化钙溶液12滴，记录心率和收缩幅度，冲洗（下同） 2)滴加12滴1%氯化钾溶液 3)滴加12滴1：10000去甲肾上腺素溶液 4)滴加12滴1：10000肾上腺素溶液 5)滴加12滴1：10000 乙酰胆碱溶液 6)滴加12滴 2.5%碳酸氢钠溶液 7)滴加12滴3%乳酸溶液,观察项目,20,实验结果,21,结果分析与讨论,1.任氏液：正常对照 2. 3%CaCl2灌流：,22,结果分析与讨论,3. 1%KCl灌流：,23,结果分析与讨论,4. 1:10000 E灌流,4期 If 、I CaT通道,4期自动去极速度,自律性,心率,与心肌1受体结合,Ca2+内流 肌浆网释放Ca2+,兴奋-收缩耦联,收缩力,cAMP,24,结果分析与讨论,5. 1:10000 Ach灌流,与心肌M受体结合,K+外流, Ca2+内流,E-C耦联,收缩力,最大复极电位 4期K+外流,自律性,心率,Ca2+i,25,碳酸氢钠 乳酸,结果分析与讨论,6. 2.5NaHCO3 灌流 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结