涉毒案件检材中可卡因的定性及定量分析方法.pdf

i c s1 3 3 1 0 a9 2 ba 中华人民共和国公共安全行业标准 g a t1 9 7 1 9 9 8 涉毒案件检材中可卡因的 定性及定量分析方法 m e t h o d so fq u a l i t a t i v ea n dq u a n t i t a t i v ea n a l y s i sf o r c o c a i n ei nt h ei l l i c i tt r a f f i c 19 9 8 12 0 8 发布 19 9 9 0 3 0 1 实施 中华人民共和国公安部发布 g a t1 9 7 1 9 9 8 前言 在涉毒案件检材鉴定中，可卡因毒品的检验占相当比例，可卡因在世界几大类常见毒品中占有重要 位置。随着涉毒案件的逐年增加，建立成熟的可卡因标准化分析方法已成必然。 本标准的制定由全国刑事技术标准化技术委员会下达任务，由公安部第二研究所负责完成。本标准 的主要内容包括可疑样品的前处理，气相色谱定性、定量分析和薄层色谱定性分析。本标准制定的方法 经多年的办案实践和九期国际控制滥用药物识别及分析培训班的实验验证，方法定性快速可靠；定量 准确，适用于各级毒物分析实验室使用。 本标准由中华人民共和国公安部提出。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会归v i 。 本标准起草单位：公安部第二研究所。 本标准主要起草人：周恒智、赵敬真。 中华人民共和国公共安全行业标准 涉毒案件检材中可卡因的 g a t1 9 7 1 9 9 8 定性及定量分析方法 m e t h o d so fq u a l i t a t i v ea n dq u a n t i t a t i v ea n a l y s i sf o r c o c a i n ei nt h ei l l i c i tt r a f f i c 1范围 本标准规定了涉毒案件检材中可卡因的定性及定量分析方法。 本标准适用于涉毒案件检材( 粉末、晶体、膏状物及植物叶等) 中可卡因的定性及定量分析。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 g a t1 2 2 1 9 9 5毒物分析名词术语 3 定义 本标准采用g a t1 2 2 中的定义。 第一篇气相色谱法( g c ) 法 4原理 可疑样品中的可卡因经前处理( 如为粉末状或结晶状样品可直接溶解于乙醇中而不需提取净化) 后，用气相色谱火焰离子化检测器( f i d ) 进行检测，与平行操作的对照标准品比较，以保留时间( r 丁) 和 相对保留时间( r r 丁) 值作定性分析；用内标法或外标法，以峰面积为依据，计算检材中可卡因含量。 5 试剂( 所用试剂均为分析纯) 5 1 0 5m o l l 盐酸。 5 2 饱和n a 2 c 0 3 溶液。 5 3 氯仿。 5 4 无水乙醇。 5 5 药物标准溶液 5 5 1 盐酸可卡因标准贮备液：准确称取5 0 0m g 盐酸可卡因装于1 0m l 容量瓶中，加无水乙醇溶解 至刻度，得含盐酸可卡因5 0 0m g m l 的贮备液，置一i o 。c 中保存，使用期2a 。 5 5 2 盐酸可卡因标准使用液：准确吸取盐酸可卡因标准贮备液2m l ，移入1 0m l 容量瓶中，加无水 乙醇至刻度混匀，得1 0 0m g m l 盐酸可卡因的标准使用液，置4 中保存，使用期0 5a 。 中华人民共和国公安部1 9 9 8 1 2 0 8 批准1 9 9 9 0 3 0 1 实施 1 g a t1 9 7 1 9 9 8 5 5 3内标物贮备液：准确称取2 5 0 0m g 内标物( 安定) 置于5 0m l 容量瓶中，加无水乙醇溶解至刻 度，得含内标5 0 0m g m l 的标准贮备液，置一1 0 中保存，使用期2a 。 5 5 4内标物标准使用液：准确吸取内标物标准贮备液1 0m l ，移入5 0m l 容量瓶中，加无水乙醇混 匀至刻度，得1 0 0m g m l 的内标物标准使用液，4 保存，使用期1a 。 5 5 5 混合标准使用液：准确吸取盐酸可卡因及内标物的标准贮备液各2 0m l 置于1 0m l 容量瓶 中，加无水乙醇混匀至刻度，得含盐酸可卡因及内标各1 0 0m g m l 的混合标准使用液，4 保存，使用 期1a 。 6 仪器及器材 6 1 具有火焰离子化检测器( f i d ) 的气相色谱仪。 6 2 积分仪或色谱数据微处理机。 6 3 电动振荡器。 6 4 离心机。 6 5k d 浓缩器或其他浓缩装置。 6 6 1 0p l 、5 0p l 、1 0 0 弘l 微量注射器。 6 7 实验室常用的玻璃器材。 7 前处理方法 7 1 除植物叶以外的各种性状的样品，直接称取检材5 0 0m g ，置于1 0m l 具塞试管中；加5 0m l 含 内标物1 0 0m g m l 的乙醇液( 如果用外标法可直接用乙醇) 振荡使之溶解( 如不溶解可用玻棒轻轻搅 拌) ，离心后供检。 7 2对植物叶样品，绞碎后称取0 5 0g ，置于1 0m l 试管中；加4 0 7 0m l0 5m o l l 盐酸，浸泡振 荡提取3h 以上，离心，酸液过滤于1 0 0m l 分液漏斗中。残渣再用5m l 酸洗渣1 次，过滤合并酸液，用 5 n a o h 水液调节p h 8 ；加p h ( 8 7 土0 2 ) n a h c o 。一n a c 0 3 缓冲液3m l ，用氯仿2 0m l 提取2 次，每 次振荡2 0m i n ，分出氯仿液，合并脱水，浓缩至干，用1 0 0m g m l 安定内标物的甲醇或乙醇液0 5m l 定容后备检。 8 定性分析 8 1色谱分析条件( 参考值) 色谱柱：3 o v 一1 7 或30 a o v 一1 0 1c h r o m o s o r bwh p 8 0 “ - - 1 0 0 目2m 2 6m m ( i d ) 玻璃填充柱；或 者o v 一1 7 、o v 1 0 1 、h p 一1 、h p 一5 等2 5m x 0 2 5m m 0 5 3m m ( i d ) x 0 3 2 u m 石英毛细管柱。 检测器：n d 。 温度：汽化室及检测器2 8 03 0 0 ，柱温2 1 0 2 4 0 。c ( 恒温) ；或者1 8 0 2 8 0 ，速率1 5 m i n ( 程 温) 。 气体流速：高纯氮气2 0 4 0 m l m i n ，空气和氢气按各仪器型号选择自己的最佳比例条件。 以上条件选择以可卡因出峰时间在5 1 0m i n 之间为宜。 8 2 检测 8 2 1进样 吸取1 3p l 混合标准使用液、可卡因及内标标准使用液、检材提取液分别注入设定好条件的色谱 仪中，各进样2 , - - - 3 次。 8 2 2 记录 记录可卡因、内标物、检材样品中各色谱峰的r t 值及峰面积值。 8 3 计算 2 g a t1 9 7 1 9 9 8 8 3 1计算可卡因、内标物和检材样品中各成份的r 丁平均值；以内标物的r r 值为1 ，计算其他成分 的r r t 平均值；计算内标物纯品和添加在检材样品中的内标物峰面积平均值。 8 3 2 计算检材样品中的内标物的回收率： 内标物回收率c ，= 墓盏苇舞蠡募亲靠善筹萋鲁涨。 8 4 色谱图 色谱图见图1 、图2 。 可卡因纯品可卡因糊 h p 5 8 9 0i 型气相色谱仪，3 3 9 6 型微处理机 3 o v 一1 7c h r o m o s o r bwh p 2m 2 6m m 玻璃填充柱 检测器温：f i d 2 8 0 ；汽化室温：2 8 0 柱温：1 8 0 保持1r a i n ，以1 5 m i n 速率升至2 8 0 n 2 ：3 2p s i h 2 ：2 4p s i ；a i r ：3 2p s i r t 值：1 一甲基爱冈宁 1 5 3m i n ；2 一可卡因9 3 1m i n 图1可卡因色谱图( 填充柱) 3 g a t1 9 7 1 9 9 8 a ：古柯叶提取物b ：可卡因粉 h p 一5 8 9 0 b 型g c f i d ，3 3 6 5 化学工作站 h p 一1 5n l 0 5 3m m ( i d ) 0 3 2 肛m 石英毛细柱 柱温：1 9 0 保持1m i n ，升温速率1 0 r a i n 升至2 8 0 保持5m i n 检测器温：2 8 0 ；汽化室温：2 8 0 n 2 ：8p s i h 2 ：3 0p s i i a i r ：4 2p s i r 丁值：1 一可卡因 5 9 0m i n l 2 一安定7 6 6r a i n ( 内标物) i 3 一肉桂酰可卡因8 2 4r a i n 和8 6 3m i n 图2 可卡因色谱图( 毛细柱) 9 定量分析 9 1试样制备 准确称取待定量检材，各2 份，根据不同的外观性状选择第7 章中合适的前处理方法处理检材，最 后以含内标物的乙醇液定容后备检。 检材是树叶，则准确称取研碎的树叶粉末0 5 1 0g ，共2 份。选择第7 章中合适的方法提取检材， 最后以含内标物的乙醇液0 2 “ - 0 5m l 定容后备检。 9 2 分析条件同8 1 。 9 3 进样、记录 分别吸取1 3p l 各试样提取液依次注入设定好条件的色谱仪中，各进样2 次，记录可卡因及检材 4 g a t1 9 7 1 9 9 8 中可卡因色谱峰和内标物色谱峰的峰面积值。 9 4 含量计算公式 校正因子，= 罟蔷臻蠹墓肇萎等嚣旁碧 黼( 以可卡因及内标物混合标样测出) 可卡因含量x c g 1 0 0g ，= 整亘 冀翥葺器翟霉占驾塞爵警铲o ， 9 5 计算相对相差 相对相差( ) = 上1 裂1 0 0 式中：x ，、x 。两份检材平行定量操作测定值5 x 平均值。 1 0 分析结果评价 1 0 1 定性分析结果评价 在定性分析中，如果添加于检材中的内标物回收率在6 0 以上，不论检材出现阳性或阴性结果均 为可靠。如果内标回收率在6 0 以下，检材中未出现相应可卡因色谱峰，则不能作否定结论，应重新操 作。 1 0 2 定量分析结果评价 两份检材在相同条件下测得可卡因含量，如相对相差小于等于1 0 ，说明该检材定量精密度可靠， 其结果按两份检材平均值计算。 第二篇薄层色谱法( t l c 法) 1 1原理 检材中的可卡因经提取、净化、浓缩、薄层色谱分离后，用碘化铋钾试剂显色。检材提出物出现的斑 点与空白检材添加标准提取的标准品、可卡因标准比较，根据r r 值及斑点颜色作为定性分析的依据。 1 2 试剂 1 2 1自铺硅胶g f 。薄层板或高效硅胶g f 。薄层板。 1 2 2改良碘化铋钾显色剂：次硝酸铋2 0 0m g ，加碘化钾5g ，加碘2g ，加0 5m l 浓盐酸及0 5m l 冰 醋酸，再加蒸馏水溶解至2 5 0m l 即得。 1 2 3 乙酸乙酯、苯、氨水、甲醇、环己烷、甲苯、二乙胺、二氧六环、己烷等均为分析纯。 1 2 4 其他试剂同第5 章。 1 3 器材 1 3 1喷雾瓶。 1 3 2 2 5 4n m 波长紫外灯。 1 3 3 展开缸。 1 3 4 其他器材同第6 章。 1 4 操作方法 1 4 1检材处理方法同第7 章。 5 g a t1 9 7 1 9 9 8 1 4 2 点样 离薄层板底部1 5 2 0c m 处，间隔1 0 - - - - 1 5c m ，在薄层板中间点上5 1 0p l 检材提取液，在左 右两边分别点5 1 0 弘l 添加标准品及可卡因标准品标准使用液。 1 4 3 展开 在展开缸中放入下列展开剂的任一种，将点好样品的薄层板放入展开缸内展开。当溶剂前沿距离原 点1 0c m 时取出，自然挥干溶剂。 乙酸乙酯。苯l 浓氨水一6 0l3 5 l 5 ( 系统1 ) ； 甲醇：浓氨水= 1 0 0 l 1 5 ( 系统2 ) ； 环己烷：甲苯：二乙胺= 7 5 ：1 5 ：1 0 ( 系统3 ) ； 氯仿t 二氧六环：乙酸乙酯：浓氨水一2 5 ：6 0 ：1 0 ：5 ( 系统4 ) 。 1 4 4 荧光观察及显色 将经展开挥干溶剂后的薄层板置于2 5 4n m 波长紫外灯下观察，用玻璃铅笔在薄层板背面记下各 斑点位置。 用改良碘化铋钾显色剂进行喷雾( 高效板可用浸渍法) 显色，显橙色斑点