尿中甲醇的顶空气相色谱测定方法.pdf

i “ i s 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 ws / t 6 2 一 1 9 9 6 尿中甲醇的顶空气相色谱测定方法 u r in e -d e t e r m i n a t i o n o f m e t h a n o l -h e a d s p a c e - g a s c h r o m a t o g r a p h i c m e t h o d 1 9 9 6 一 1 0 一 1 4 发布1 9 9 7 一 0 5 一 0 1 实施 中华人民共和国卫生部发 布 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 尿 中甲醇的顶空气相色谱测定方法ws / t 62 一 199 6 ur i n e -de t e r min a t i o n o f me t h a n o l -he a d s p a c e - g a s c h r o ma t o g r a p h i c me t h o d 主题内容与适用范围 本标准规定了 尿中甲 醇的 顶空气相色谱测定方法。 本法最低检测浓度为。 . 5 m g / l , 本标准适用于接触甲醇工人尿中甲醇含量的测定。 2原理 在密闭的瓶内， 甲醇分子从液相中逸出液面至气相中， 在一定温度下， 甲醇分子在气液两相之间达 到动态平衡， 此时甲醇在气相中的浓度和在液相中的浓度成正比， 气相中的甲醇经g d x - 1 0 2 柱分离， 氢 焰离子化检测器检测， 保留时间定性， 峰高( 或峰面积) 定量。 仪 器 i， 气相色谱仪， 氢焰离子化检测器。 3 . 2 顶空瓶, 3 0 ml玻璃瓶， 带配套硅橡胶帽， 见图 图 1 顶空瓶 1 一硅橡胶瓶帽 2 -3 0 ml玻璃瓶; 3 一样品 恒温水浴箱， 控温精度士1 c o 具塞比色管或玻璃瓶， 1 0 0 ml , 容量瓶， 5 0 m l 和2 5 m l , 微量注射器， 1 u l和5 0 p l , 注射器， 1 m l和1 0 0 m l , 尿比重计。 内嘴d护门气j砂u ，几口1，j汽砚曰曰砚 中华人民共和国卫生部1 9 9 6 - 1 0 一 1 4批准1 9 9 7 一 0 5 一 0 1 实施 1 ws / t 6 2 一1 9 9 6 4 试剂 4 门试验用水， 去离子水， 比电阻大于 5 0 0 k c z “ c m; 或用全玻璃蒸馏器重蒸所得的水。 4 . 2 担体， gd x - 1 0 2 ( 6 0 - 8 0目) ， 使用前经 2 0 0 通氮气活化 1 -2 天。 4 . 3 无水硫酸钠， 分析纯。 4 . 4 甲醇， 色谱纯。 4 . 5 甲 醇标准溶液， 于5 0 m l 容量瓶中加入约2 0 m l 水， 用微量注射器准确吸取5 0 ja l甲 醇注入容量 瓶中， 加水至刻度。此溶液1 m l相当于。 . 7 9 2 m g甲 醇。 临用前用水稀释成五个不同 浓度的 标准应用 液。 其浓度为: 4 0 . 0 , 1 2 0 . 0 , 2 0 0 . 0 , 2 8 0 . 0 , 4 0 0 . 0 p g / m l , 4 . 6 质控样， 用加标的模拟尿、 接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。 5 采样、 运输和保存 用磨口玻璃比色管或磨口玻璃瓶( 3 . 4 ) 收集接触者班后尿样， 尿祥不少于5 0 m l, 混匀后， 尽快测量 比重， 迅速送实验室， 于4 冰箱中可保存三天。 : .: 分析步骤 仪器操作条件 色谱柱: 柱长 1 . 6 m， 内径 4 m m， 玻璃柱。 柱填料: g d x - 1 0 2 , 6 0 - 8 0 目 。 温度: 柱温 1 3 0 0c。 载气: 高 纯氮， 流速6 0 m l / m in , 空白试验 取 2 ml正常人混合尿与样品同时进行测定。 样品处理 尿样( 5 ) 充分摇匀后即可测定， 不必再作处理。 标准曲线的绘制 1 取6 个顶空玻璃瓶， 分别加入2 g 无水硫酸钠。 2 按下表配制标准管。 甲醇标准管的配制 管号12345 6 不同浓度的甲醇标准溶液( 4 . 5 ) , ml 0 . 00 .10 . 10 . 10 . 10. 1 正常人混合尿， ml2 . 01 . 91 . s1 . s1 . s1 . s 甲 醇浓度. p g / m l 02 . 06 . 01 0 . 01 4 . 02 0 . 0 6 . 4 . 3 立即用配套的硅橡胶瓶帽封紧瓶口， 混匀后 ， 移入 6 5 水浴中恒温 6 0 mi n 。在保温条件下用 1 m l 注射器从瓶塞处抽取瓶内上部空气各 。 . 5 m l注入色谱仪， 按 6 . 1 条操作条件， 重复进样三次。 6 . 4 . 4 以甲醇浓度为横坐标， 峰高( 或峰面积) 的平均值为纵坐标， 绘制标准曲线。 6 . 5 样品测定 6 . 5 . 1 同6 . 4 . 1 条操作。 6 . 5 . 2 取各管样品( 6 - 3 ) 及对照样( 6 - 2 ) 各2 m l ， 分别置于顶空瓶内。 6 . 5 . 3 同6 . 4 . 3 条操作。 ws / t 6 2 一 1 9 9 6 6 . 5 . 4 用保留时间定性， 根据峰高( 或峰面积) 在标准曲线上查出甲醇的浓度。 甲醇色谱图见图2 。 在测 定前后以及每测定 1 0 份样品后， 测定一次质控样。 甲 静 图 2 尿中甲醇色谱图 7 计算 了 . ， 按式( 1 ) 计算尿样换算成标准比重( 1 . 0 2 0 ) 下的浓度校正系数( k ) , 石 =一 互0 2 0 - 1 . 0 0 0 实测 比重 一 1 . 0 0 0 “ “， ， ” ” 。 ， ， ” (1) 7 . 2 按式( 2 ) 计算尿中甲醇的浓度 x = 式中: x尿中甲醇的浓度， mg / l ; 由标准曲线查得的甲醉浓度， mg / l , (2 ) 8 说明 8 . ， 本法的检测限为。 . 5 m g / l , 测量范围0 2 0 m g / l ; 当 尿中甲 醇浓度为1 . 0 2 0 . 0 m g / l时， 变异 系数为4 . 6 0 0 -9 . 3 0 o ; 尿中甲醇浓度为 1 . 0 - 2 0 . 0 mg / l时， 加标回收率为 8 8 . 6 % 9 5 . 0 %. 8 . 2 采集尿样时， 工人要脱离生产场所， 换下工作服， 洗净手、 臂及面部。 以防甲醇污染。采样后应尽早 送实验室。于4 冰箱中可保存三天。 83 乙醇和尿中杂质能分离， 不干扰测定。 8 . 4 尿中甲 醇测定时加入无水硫酸钠可以减少蒸气压力， 提高方法灵敏度。 8 . 5 甲醉分子易挥发， 顶空瓶的气密性要良好， 以防止水浴加温挥发损失。 8 . 6 质控样使用加标的模拟尿时可考察准确度和精密度。使用接触者尿和加标的正常尿时， 可考察精 密度。但人尿不易久存。模拟