实验 植物叶脉标本的制作.doc

实验 植物叶脉标本的制作 一、 实验目的： 掌握叶脉标本的制作方法；加深对植物叶脉即叶片表面维管束（疏导组织）分布的了解二、实验原理：利用叶片的叶脉和叶肉对化学物质腐蚀的差异性，使用酸性或碱性物质将叶肉腐蚀后，设法除去叶肉，留下尚未被腐蚀的叶脉。叶脉标本可以用来观察叶片的疏导组织，制作后又常用颜料染色作为书签，因此又称作叶脉书签标本。它是在除去叶肉漂洗后再经漂白、染色、压干而成。除去叶肉有两种方法：腐蚀法：配制510%的氢氧化钠或氢氧化钾溶液，放入烧杯中，加入叶片，在酒精灯或电炉上煮沸后，再文火煮制（加热时间一般10-15分钟），煮时要用筷子或玻璃棒等不断的搅动，使之受热均匀。当溶液的颜色由无色变为深褐色（或叶肉有脱落），叶片由硬变软时，用筷子从烧杯中取出，在清水中洗净碱液后，放到盛有清水的培养皿中，使叶片在培养皿底部展平，再用旧牙刷垂直由上而下轻轻拍打叶片或用牙刷轻轻的刷，大部分的叶肉会除去。把含叶肉的混水倒掉，换上清水，并在培养皿底部铺一张白纸，可清晰的看到未除去的叶肉，再用牙刷将其打掉。若无牙刷，从清水中取出一片煮好的叶子，平铺于一只手的手掌上，再用另一只手的食指轻轻摩擦叶片，并不时在清水中洗去以被擦掉的叶肉，即成完整的叶脉标本。然后可进行漂白、染色，压干。腐烂（水沤）法：将新鲜叶片放入水中浸泡，利用各种菌类对各种叶肉蛋白的腐蚀作用使叶肉腐败，叶表皮与叶肉部分分离，并出现隆起。这时，先用镊子将表皮撕掉，轻震或轻拍，部分叶肉会落于水中。没脱离的部分采用上述牙刷打或手擦的方法除去，从而制成完整的叶脉标本。多数落叶不适合用沤制法制作叶脉标本，只有橡皮树等肉质厚、叶脉细软的落叶才适合用腐烂法制作。一般需要半个月左右，浸泡的时间与气温、叶片质地均有密切关系。气温高，叶片薄，一般一周左右；气温低、叶片厚，时间长些，浸渍时注意换水。三、 实验器材：植物叶片、NaOH或KOH、Na2CO3、双氧水或漂白粉、各色普通布料染色剂、烧杯、电炉、石棉网、大号镊子、培养皿、牙刷、玻璃棒、小塑料桶、吸水纸（或草纸）、烘箱、书。四、实验步骤： 1、 采：采集叶片。选取叶脉坚韧，叶质较厚较硬、大小适中、叶面完整、叶脉丰富、形态美观的树叶（如槭树、悬铃木、玉兰、杨树、榕树、菩提叶等叶脉粗壮的叶）。2、 煮：将叶片置于沸腾的NaOH溶液中煮约10-15分钟（视叶片状况而定） 。溶液配制：称取35g NaOH（具强腐蚀性，使用时应特别小心）和25g Na2CO3放入烧杯中，加入1L水混溶，使之溶解，制成溶液。 3、 洗：停止加热，用筷子或镊子将叶片取出,放入盛有清水的小塑料桶中或用流水漂洗干净（一般在两次以上），除去叶片上残留的NaOH溶液。4、 刷：将叶片置于培养皿背部，加少量的水，把牙刷打斜（与水平面大约成45度角），顺叶脉轻轻地刷净地肉（敲打时不时用水洗掉打下地叶肉）。刷时注意：只向一个方向刷（绝对不能来回刷），以免将叶脉刷坏。刷时先从背面开始，刷净背面再刷正面，主叶脉边沿处可用垂直敲打法。5、漂白：将刷洗干净的叶脉放入用20%的双氧水（或漂白粉10克溶于1L水中制成漂白液备用）溶液中片刻，待叶脉标本基本变白后取出用清水漂洗干净。 6、染色绘图：将普通染布用的染料用温水调和加热制成染色液，然后将已漂白的叶脉标本放入浸泡3-4分钟或用玻璃棒滴管等沾取染色液涂抹到叶脉标本上，制成单色或彩色的叶脉标本，也可以在叶脉上绘图。7、烘干压制：将染色后的叶脉标本平铺于培养皿背部，放于105烘箱5分钟左右，取出夹于书本中压干，即成色彩绚丽的叶脉标本。8、 粘贴、过胶：晾干后，可用纸粘住，过胶保存。五、 注意事项 1、 必须选择叶脉坚韧、清晰、完整的叶片。 2、 在碱液煮制过程中，要根据植物的种类、叶片厚薄、碱液浓度大小、碱性强弱等条件决定煮制时间。叶片较薄、碱液浓度大（用NaOH或KOH等强碱），煮制时间要短一些。相反，叶片较厚、碱液浓度小（用Na2CO3），煮制时间要常一些。3、 为保证在实验中既能较容易拍打掉叶肉，又不至于煮的太烂，实验时要根据叶片厚度进行观察。当煮至叶肉较易去掉时，要及时移开火焰或熄火，再借助于烧杯中的余热保持几分钟，就会达到容易去掉叶肉的程度。如移开火焰或熄火时，叶肉已经很容易去掉了，要及时