关于渗漉法提取白芷总香豆素的工艺研究

1 / 5 关于渗漉法提取白芷总香豆素的工艺研究 摘要 :目的优化渗漉法提取白芷香豆素的提取工艺。方法采用单因素和正交实验设计，以白芷总香豆素的含量为评价指标，对白芷香豆素类化合物进行渗漉提取。结果渗漉法提取总香豆素含量高达 10.144 mg/g，其最佳工艺条件为： 8倍量 75%乙醇，浸泡 8 h，渗漉速度 0.5 ml/min。结论建立的数学模型和优化结果合理，渗漉法提取白芷香豆素可行。 关键词 : 渗漉法 白芷香豆素 欧前胡素 白芷为伞形科当归属植物白芷 Angelica dahurica（ Fisch ex Hoffm） Benth et Hook f或杭白芷 A dahurica (Fisch ex Hoffm ) Benth.et Hook F var formosana (Boiss )Shan et Yuan 的干燥根。其性温，气芳香，味辛、微苦，具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的作用，被临床广泛应用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带和疮疡肿痛等症，并有较好的疗效 1。白芷中总香豆素类为其镇痛的主要成分，又以欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡素为其中主要成分，其止痛效果已被充分肯定 2。 为了进一步促进白芷香豆素的开发利用，对其有效成分的提取方法的研究是十分必要的。目前常用的白芷香豆素的提取方法以热回流法报道最多。该方法不仅加热时间过2 / 5 长，而且消耗溶剂多。而渗漉法除了具有操作简便、提取率高的优点以外，更重要的是，它可以避免香豆素成分受热损失。本文以白芷总香豆素为评价指标，通过单因素和正交实验设计，考察溶媒浓度、用量、浸泡时间和渗漉速度等因素对提取效果的影响，确定渗漉法提取白芷中香豆素类成分的最佳工艺条件 ,并将该工艺与超声波提取法、热回流法等进行了比较。 1 器材 1.1 仪器 752 型紫外分光度计 (上海光谱仪器有限公司 )； SL500锈钢渗漉缺缺罐 (衡阳市金山中药设备制造有限公司 )；RE-52A 旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）； SHB-3 循环式真空泵 (郑州杜甫仪器厂 )； HH-S 数显恒温水浴锅 (江苏省金坛市医疗仪器厂 )； ISO9001 电子天平 (北京赛多利斯天平有限公司 )。 1.2 试剂甲醇、乙醇均为分析纯（成都科龙试剂厂）；95%医用酒精；欧前胡素对照品（购自中国药品生物制品检定所）。 1.3 药材 白芷 Angelica dahurica（ Fisch ex Hoffm） Benth.et Hook f购自成都市荷花池药材市场。 2 方法与结果 3 / 5 2.1 总香豆素含量测定 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称量欧前胡素对照品 5.22 mg，置于 100 ml 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制得 0.052 2 mg/ml 对照品溶液。 2.1.2 最佳测定波长的确定 将对照品和样品在 200 400 nm处分别进行波长扫描 ,两者在 300 nm 处有吸收 ,而且峰形变化平缓 ,有利于含量测定，因此以 300 nm 作为测定波长。 2.1.3 标准曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液 1.0， 1.5， 2.0， 2.5， 3.0 ml，用甲醇定容至 10 ml，以甲醇为空白，于 300nm 处测定吸光度。以浓度（ C）为横坐标，吸光度（ A）为纵坐标作图，得回归方程： A=47.4C+0.017(r=0.999 7,n=5)。结果表明，欧前胡素对照品溶液浓度在 5.22 15.66 g/ml 的浓度范围内具有良好的线性关系。 2.1.4 供试品溶液的制备与含量测定 精密量取提取液 5 ml，水浴挥干溶剂，加入甲醇溶解并定容至 50 ml，摇匀， 作为供试品溶液，稀释，以甲醇为空白，于 300 nm 处测定吸光度，并根据标准曲线计算白芷总香豆素含量。 4 / 5 2.2 提取工艺条件选择 2.2.1 提取溶媒考察 为正交设计因素水平设计提供初步依据，对水和醇两种溶媒进行考察。称取 20 g白芷初粉（ 30目），分别用水和乙醇进行提取，提取液浓缩并定容至一定体积，按含量测定方法计算水提液和醇提液中总香豆素的含量。结果见表 1。 表 1 不同提取溶媒的比较（略） 实验结果表明，以乙醇作为提取溶剂，能提取较高含量的总香豆素，因此采用乙醇渗漉提取白芷总香豆 素。 2.2.2 粒度考察 由于药材的粒度与有效成分的提取效果有关，因此，我们分别选择 10， 20， 30 目和 40 目的药材进行考察。以 6倍量的 95%乙醇，热回流提取 3 次， 1 h/次为提取条件，分别进行提取，减压回收乙醇，将提取液浓缩至一定体积，总香豆素的含量选择适宜粒度的药材进行渗漉提取。结果见表2。表 2 粒度的比较 上述结果表明， 6 倍量 95%乙醇提取 3 次， 1 h/次，粒度为 20 目时，白芷总香豆素含量为最大，因此，采用 20目的药材进行下步工艺。 2.3 渗漉法提取白芷总香豆素工艺条件优 化 2.3.1 因素水平设计在对提取溶媒和粒度考察的基础上，采用正交实验法，选用 L9（ 34）正交表，以乙醇浓度、5 / 5 乙醇用量、浸泡时间、渗漉速度为因素，各因素分别设计 3个水平。结果见表 3。表 3 渗漉法提取白芷总香豆素实验因素水平（略） 2.3.2 提取方法与结果 称取 20 g白芷样品（ 20目），乙醇润湿 2 h后装柱，用以上各条件进行实验，收集渗漉液，测定含量。结果见表4。表 4 正交实验设计表及结果（略） 从直观分析结果表明，渗漉法提取白芷总香豆素的影响因素主次顺序为： ABCD。方差分析结果表明， A 因素的影响有显著意义 P 2魏玉平，刘 俊，颜小林，等白芷治疗头痛的提取工艺评判指标的研究