Masslynx 操作指南 waters.pdf

5/21/2016 开机开机步骤步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的 CPU 会通过网线与计算机 主机建立通讯联系，这个时间大约需要 1 至 2 分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入 Idle 状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具 体根据液相色谱不同型号来执行，下面以 2695 为例）。 a. 打开脱气机 (Degasser On)。 b. 湿灌注(Wet Prime)。 c. Purge Injector。 d. 平衡色谱柱。 3. 双击桌面上的 MassLynx 4.0 图标进入质谱软件。 注：如果进入 Masslynx 软件时出现提示：“The embedded system is not responding, The system will run in standalone mode”， 则说明质谱内置的 CPU(EPC)与电脑主机的通讯联系还未建立，此时无法控 制质谱，请稍等后再进入软件，如果打开软件仅为处理数据则没有关系（质谱主机电源未开时进入软件也 会有同样提示）。 Waters 中国有限公司 - 2 - 5/21/2016 4. 检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过 3000 小时，请及时更换机械泵油。 5. 点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口 。 6. 选择菜单“Options Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真 空。几分钟后，ZQ 就会达到真空要求，ZQ 前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7. 点击真空状态图标 ，检查真空规的状态 ，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为 90 psi。 9. 设置源温度 （Source Temp）到目标温度。 Waters 中国有限公司 - 3 - 5/21/2016 质谱调谐窗口各项参数设定质谱调谐窗口各项参数设定 电喷雾电离源（电喷雾电离源（ESI） 1. 在质谱调谐窗口选定要使用的离子模式。 2. 点击进入下面 Source 界面，设定 Source 界面里的各项参数。 Capillary(KV) 加在 ESI 源内毛细管上的高压，正离子模式一般是在 2.5-3.75KV 之间 优化，负离子模式一般是在 2.0-3.0KV 之间优化。在负离子模式时， 如果毛细管电压设置过高容易引起放电现象。 Cone(V) 样品锥孔电压，一般在 10-100V 之间优化，通常来说，分子量小的样 品选择的锥孔电压要相对小，当提高锥孔电压时，可能得到的碎片信 息会多一些。 Extractor (V) 二级锥孔电压，一般在 05V 之间优化。 RF Len(V) 六级杆透镜电压，一般在 00.5V 之间优化。 Source Temp 源温度，一般在 80120之间优化，一般来讲，温度的设定与进 Waters 中国有限公司 - 4 - 5/21/2016 入质谱流动相流速大小有关。 如果用注射泵直接进样，流速在 540Ul/min 时，设为 80，当液相 色谱流速在 100300Ul/min 时，设定为 120150。 Desolvation Temp 脱溶剂气温度，一般在 120300之间优化，与流动相流速大小、 流动相含水比例高低、是否容易气化相关。 用注射泵直接进样，流速在 540Ul/min 时，设为 120，当液相色 谱流速在 100300Ul/min 时，设为 300。 Desolvation (L/hr) 脱溶剂气流量，一般在 3001000L/Hour 之间优化，与流动相流速大 小、流动相含水比例高低、是否容易气化相关。 Cone(L/hr) 锥孔气的流量，一般在 0100L/Hour 之间优化。 3. 点击图标，进入 Analyser 界面，设定 Analyser 界面里的各项参数。 LM Resolution 低质量数分辨率， 典型值 15.0。 HM Resolution 高质量数分辨率， 典型值 15.0。 Waters 中国有限公司 - 5 - 5/21/2016 一般来讲，分辨率越高，灵敏度越低，分辨率越差，灵敏度越高。 注意：当改变分辨率的时候，质量数也会有轻微的偏移，所以在不同分辨率的条件下，应该做质量数校正。注意：当改变分辨率的时候，质量数也会有轻微的偏移，所以在不同分辨率的条件下，应该做质量数校正。 Ion Energy 离子能量，一般在 01 之间优化。 Multiplier 光电倍增管电压，典型值 650V。 大气压化学电离源（大气压化学电离源（APCI） Corona 高压放电针电流，正离子模式一般在 010uA之间优化，负离子模式 一般在 05uA之间优化。 Source Temp 源温度，一般在 120150之间优化。 APCI Probe Temp APCI加热器温度，一般在 300600之间优化。 其余参数设定与 ESI相同。 创创建建项项目目和打开项目和打开项目 （ Project） 为了便于进行数据管理，可以创建不同的项目（Project），项目的后缀为 .pro，每个项目 Waters 中国有限公司 - 6 - 5/21/2016 都有对应的子目录进行相应文件的管理。 1. 从主菜单中选择“File Project Wizard”，会引导你去创建一个新的项目。 2. 输入项目名称（Project name）、描述(Description)、 存放的路径(Location)，点击 “Next” ，进入下一步。 3. 选择 a) Create new project，完全新建一个项目。 b) Current project as Template，将会把上一次所使用项目的子目录（Acqudb、Methdb、 Sampledb）里的方法拷贝到你新建的项目中去。 c) Create using existing project as template，选择某项目，并把该项目里的方法拷贝到你新 建的项目中去（公司建议用户选择 D 为母板进行项目创建） 4. 点击 Finish，新的项目会被创建，而且软件会自动切换到新的项目中。 注意：你会注意：你会看见一个提示看见一个提示 “current sample list is invalid” ，没有关系，（因为现在的样品表是空的）点，没有关系，（因为现在的样品表是空的）点 击击 OK 并继续。并继续。 5. 若要打开另外一个项目，在软件主界面选择，或 FileOpen Project，选择要打开的项 目。 每个项目包括 5 个子目录： a) Acqudb 所有采集方法文件，包括质谱方法(*.exp)、液相方法(*.wat)、已存的调谐文 件(*.ipr)、质量校正文件(*.cal)。 b) Curvedb 定量校正曲线。 c) Data 已采集的数据文件(*.raw)。 d) Methdb 定量方法。 e) Peakdb 峰列表。 f) Sampledb 样品表(*.spl)。 质质量校正量校正 质量校正（Calibration）是与仪器的调谐（Tuning optimization）分开进行的，为了保证质量 Waters 中国有限公司 - 7 - 5/21/2016 的准确，在仪器安装及维护后，必须进行校正，或者按照您所制定的标准操作程序进行。 通常质谱被校正后，校正结果可以被储存起来，以备日后调用。ZQ 采用的是金属钼四级 杆，非常稳定，日常工作情况下质谱是不用校正的，只需调用以前做的校正表即可。 1. 双击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱校正和调谐窗口 。 2. 点击真空状态图标 去检查真空状态 ，以确认真空已达到要求。 注意注意：如果 ZQ 在放空状态（ vented），选择菜单， “Options Pump”这时机械泵将开始工作，同时分子 涡轮泵开始抽真空，几分钟后，ZQ 会达到真空要求，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum” 将变绿。 3. 点击分析表头 并输入下列参数，如果需要进行其他不同分辨率条件下的校正，则 对应输入 LM Resolution 和 HM Resolution 的值。 Settings Generic Start Conditions LM Resolution 15 HM Resolution 15 Ion Energy 0.5 Multiplier 650 Syringe Pump Flow 10 注意注意: 必须按回车键（必须按回车键（Enter）才能使参数被输入。）才能使参数被输入。 选择，选择，Ion Mode Electrospray + ， 在在 Electrospray + 条件下所做的校正可以用条件下所做的校正可以用 于其他所有方式。于其他所有方式。 4. 点击 ，按下表输入源参数， 做校正时采用下列常规的 Electrospray+ 条件。 Settings daughter) 12. 274.10 182.10 13. TIC 14. TIC 15. BPI 16. BPI 17. Analog data 18. An1 19. PDA DAD data 20. 254 21. 如果选择第二个离子，则点击 Sec 按钮，输入第二个离子的质荷比。 22. 如果需要选择二质谱离子强度比值，则输入 Primary/Secondary 的比值，点击 OK. 23. 在 Acquisition Function Number 项目中，选择质谱方法所建立的扫描采集功能. Waters 中国有限公司 - 34 - 5/21/2016 24. 在 Concentration of Standards 中，选择样品表所对应的浓度 (CONC_A column)，如果 用内标法定量时，用 Fixed 选项。 25. 在 Peak Location 选项中： 26. 输入色谱峰的保留时间（单位为分钟）或相对保留时间。 a. 注意：可将色谱峰的保留时间以及色谱峰的其它信息拷贝到 QuanLynx 方法中，. 在相应的色谱峰窗口点击右键，可将质谱通道、保留时间、保留时间窗口等参数 拷贝到定量方法中。 27. 在 Integate Parameters 中，点击 peak detection，楞建立积分方法。 . a 注意：选 Apex Track Peak Integration 是对色谱峰进行从峰谷到峰顶积分，而 且它比设置峰宽和预值便加灵敏。 28. 通常情况下都是用缺省值对色谱峰进行积分，而且将 Smooting 参数从 Mean 变为 Savitsky Golah. 从处理方法主界面选择 Edit Propagate/ General Parameters 将上面已经编辑好的设定复 制给所有组份。 选择 File - Save As 并输入方法名。 Waters 中国有限公司 - 35 - 5/21/2016 用用 QuanLynx 进进行行批批处处理理定量分析定量分析 1. 在样品表中，选择要进行定量分析的样品。 2. 选择 QuanLynx ，在 QuanLynx 软件中，选择 Process Sample。 3. 选择三项处理功能： Integrate, Calibrate, and Quantify. 4. 选择相应的定量方法。 5. QuanLynx 软件就能根据所选的定量方法进行自动定量分析，并显示出定量结果 浏览定量报告浏览定量报告 （Brower Resuit） 1. 在 QuanLynx 软件中，选择 Brower Resuit，就可浏览定量结果且打印报告 2. 用 QuanLynx 软件可浏览定量数据，浏览方法是选择 File Import QuanData,，选择相 应的数据结果。 3. 点击 Display在 customize the display 中选择 results table, chromatogram, summary, calibration, colors 和 fonts. a) 在 Summary area 项目中选择 Summary 选择 “List by compound”就能显示 所有组份的结果。 b) 选择 View- Statistics，可查看相同浓度的样品结果 c) 选择 View Totals Bar 可看到同一样品中所有组份的结果。 4. 选择 Display - Slideshow 要显示样品的色谱图，以及各组份的定量结果。 5. 修正 QuanLynx 定量方法和批处理方法： a) 选择 Edit Method，可修正定量方法，然后保存并退出。 b) 选择 Processing Execute. 这将对样品表进行批处理，并建立一新的校正曲 Waters 中国有限公司 - 36 - 5/21/2016 线且对结果进行列表。 c) 打印输出报告 d) 选择 File Report Format 可改变报告输出