液压冲击脑损伤模型.pdf

解螺旋 陪伴医生科研成长 1 液压冲击液压冲击脑脑损伤模型损伤模型 1 1. . 实验原理实验原理 液压冲击损伤模型由来已久，是通过向颅腔内快速注入生理盐水造成创伤性脑损伤。 2 2. . 实验目的实验目的 造成创伤性脑损伤。 3 3. . 实验材料实验材料 3 3.1 .1 主要试剂主要试剂 生理盐水等。解螺旋 3 3.2 .2 主要仪器主要仪器 该装置分两部分，横放的圆形中空钢化玻璃柱(长 60 cm，直径 41.5 cm)和打击架。圆 形玻璃柱(内为 37 生理盐水)装有损伤轴和传感器的一端接触大鼠， 负责制造损伤和监测 压力，而装有活塞的一端则与打击架相连，活塞受打击后推动盐水进入颅腔。 液压冲击损伤装置 打击架上装有一钟摆样打击锤。 通过调节打击锤的高度调节压力大小， 致伤时传感器可 直接读出致伤压力。 根据打击部位不同模型可分为正中打击和侧方打击， 正中打击可造成严 解螺旋 陪伴医生科研成长 2 重脑干损伤，侧方打击脑损伤主要在对冲侧。该模型的缺点是：打击机制与人的受伤机制不 一致，可造成严重的脑干和脊髓损伤。 3 3.3 .3 实验动物实验动物 成年雄性 SD 大鼠（250-300g）或成年雄性 C57/BL6 小鼠（20-25g） 4 4. . 实验步骤实验步骤 1. 冲击前 24 小时，用 2% 戊巴比妥钠经腹腔麻醉。无菌切开皮肤，用魔钻磨出一个直径 约 2mm 的骨孔 （利用小鼠脑立体定位图谱对小鼠海马结构进行空间定位。 选择前卤点后 方 2mm，矢状缝右侧 2mm 作为圆心） ，保证硬膜玩好无破损。 2. 用氰基丙烯酸酯粘合剂将不锈钢螺母粘接与钻孔处， 螺母周围用磷酸锌分和硅胶 H （1:5） 经氰基丙烯酸酯调成的糊状粘合剂固定。 3. 实验前，动物用戊巴比妥钠麻醉，于储液管中住满 37生理盐水，与螺母连接，设置 打击压力（轻型、中型、重型损伤参考：60-80、160-180、260-280 kPa） ，打开压缩空 气钢瓶阀门即冲击装置开关， 是生理盐水冲击动物脑部， 记录冲击瞬间脑局部受力大小。 冲击时程约 20ms。解螺旋 4. 冲击后，取下动物，骨蜡封闭钻孔，缝合切口。 5. 观察指标： 生命体征及死亡率：观察造模后动物生命体征（呼吸、运动、抽搐、意识等）及死 亡数，计算死亡率。 mNSS 评分 MIR 检查：造模后不同时间对动物进行头部 MRI 检查，包括 T1 像、T2 像、脑弥漫性 轴索损伤（DAI）等 Morris 水迷宫实验（选做） 脑组织含水量及组织学观察：在建模后不同时间点 mNSS 评分、MIR 检查等步骤后， 用氯胺酮过度麻醉，4%多聚甲醛经心灌注， 开颅取脑， 以经过挫伤灶的横线为极限， 在极限前侧取约 200mg 脑组织用于测定含水量；去挫伤灶后约 4mm 厚的脑组织进行 固定和石蜡包埋，切片后进行苏木素-伊红染色并进行组织学观察。 解螺旋 陪伴医生科研成长 3 5.5.应用实例应用实例文献文献 1 1- -3 3 1. McGuire JL, DePasquale EAK, Watanabe M, et al. Chronic Dysregulation of Cortical and Subcortical Metabolism After Experimental Traumatic Brain Injury. Mol Neurobiol 2018. 2. Smith D, Rau T, Poulsen A, et al. Convulsive seizures and EEG spikes after lateral fluid-percussion injury in the rat. Epilepsy Res 2018; 147147: 87-94. 3. Chan HH, Wathen CA, Mathews ND, et al. Lateral cerebellar nucleus stimulation promotes motor recovery and suppr