原子吸收光谱法间接测定熏制食品中亚硝酸盐含量毕业论文.doc

本 科 生 毕 业 设 计（论 文）论文题目：原子吸收光谱法间接测定熏制食品中亚硝酸盐含量姓名：学号：09053129班级：090531班年级：09级专业：09053学院：0905学院指导教师：完成时间：二0一三年 六月一日作 者 声 明本人以信誉郑重声明：所呈交的学位毕业设计（论文），是本人在指导教师指导下由本人独立撰写完成的，没有剽窃、抄袭、造假等违反道德、学术规范和其他侵权行为。文中引用他人的文献、数据、图件、资料均已明确标注出，不包含他人成果及为获得东华理工大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本设计（论文）的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本毕业设计（论文）引起的法律结果完全由本人承担。本毕业设计（论文）成果归东华理工大学所有。特此声明。毕业设计（论文）作者（签字）： 签字日期： 年 月 日 本人声明：该学位论文是本人指导学生完成的研究成果，已经审阅过论文的全部内容，并能够保证题目、关键词、摘要部分中英文内容的一致性和准确性。 学位论文指导教师签名： 年 月 日东华理工大学2013届本科生毕业论文 实验部原子吸收光谱法间接测定熏制香肠和双汇香脆肠中亚硝酸盐Indirect Determination of Nitrite in Smoked Sausage and Shuanghui Crispy Sausage by Atomic Absorption Spectrometry 2013年 6 月01日东华理工大学2013届本科生毕业论文 摘要摘 要亚硝酸盐是一种允许使用的食品添加剂，在环境水体以及食品中都会或多或少存在。过量的亚硝酸盐对人体有致癌作用，因而亚硝酸盐含量的检测现已成为环境和食品检测中重要指标之一。 目前测定亚硝酸盐的方法有分光光度法、发光分析法，电化学分析法、色谱分析法等。本文间接原子吸收光谱法测定亚硝酸盐含量的方法，为快速准确测定食品和环境样品中亚硝酸盐含量提供了新的途径。亚硝酸盐具有氧化性又具有还原性，建立了一种用原子吸收光谱法间接测定熏制食品中亚硝酸盐含量的方法。在酸性条件下，用高锰酸钾将食品中的亚硝酸盐先转化成二氧化锰沉淀，再用硫酸溶解沉淀，以原子吸收光谱法测定锰的吸光度，从而间接得到亚硝酸盐的含量，回收率在98%98.7%之间。此方法简捷快速，适用于腌制食品和熏制食品中亚硝酸盐含量的测定。关键字：原子吸收光谱法；香脆肠和熏肠；亚硝酸盐；锰II东华理工大学2013届本科生毕业论文 abstractAbstractNitrite is a permitted food additives and it exists in a reasonable amount in environmental water and food. Excessive nitrite can cause cancer in human beings and therefore, determination of nitrite has become an important indicator in environmental and food detection. Nowadays, there are many ways to determine the amount of nitrite, such as spectrophotometry, luminescence analysis, electrochemical analysis and chromatography analysis and so on. Atomic absorption spectroscopy is used in this thesis to determine the amount of nitrite, serving as a new, quick and accurate way to determine the amount of nitrite in food and environmental sample. Due to the oxidability and reducibility of nitrite, atomic absorption spectroscopy can be used indirectly to determine the amount of nitrite in smoked food and pickled food. Under the acidic condition, potassium permanganate is firstly used to transfer nitrite in the food into manganese dioxide precipitation, which is then dissolved by sulfuric acid. Atomic absorption spectroscopy is applied to determine the absorbance of manganese in order to learn the amount of nitrite. Precision rate of this method is somewhere between 98 percent and 98.7 percent. This easy and fast method is very useful in determining the amount of nitrite in smoked food and pickled food.Key words: atomic absorption spectrometry; crispy sausage and smoked sausage; nitrite; manganese目 录 摘 要IAbstractII一、绪论1（一）研究背景1（二）亚硝酸盐对人体的危害1（三）本课题研究的意义极其展望1（四）亚硝酸的测定方法研究进展2(五)原子吸收光谱法4二、实验部分9（一）主要试剂及其相关试剂的配置9（二）样品10（三）主要仪器10（四）仪器工作条件10（五）标准工作曲线的绘制11（六）样品预处理11（七）样品测定11三、 结果与讨论12（一）实验数据12（二）线性范围12（三）样品分析13（三）回收率实验14（四）讨论14四、结 论16致 谢17参考文献18东华理工大学2013届本科生毕业论文 绪论一、绪论（一）研究背景亚硝酸盐（NO2-）是氮循环的中间产物，不稳定广泛存在于水体、土壤和各类食品中。根据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原为氨。硝酸盐和亚硝酸盐是肉类腌制中常用的发色和防腐添加剂。它的用途是加入肉制品中千分之零点五的硝酸盐或千分之零点一五的亚硝酸盐，经过腌制，可使肉制品色泽鲜红和固实而改善感官性状。如火腿、香肠、腊肠、咸鱼、牛肉和肉类罐头，就是这个过程制作的。而且亚硝酸盐还有助于增进肉品的味道，还具有抑制细菌、尤其是肉毒杆菌的生长和繁殖，大大延长肉制品的货架寿命。这种作用十分重要，因为许多腌肉制品都是真空包装的，而肉毒杆菌是在真空条件下生长繁殖的。（二） 亚硝酸盐对人体的危害硝酸盐的主要是由于它在食物、水中或胃肠道内，尤其是在婴幼儿的胃肠道内被还原成亚硝酸盐而所导致的危害。亚硝酸盐是食品添加剂中急性毒性最强最猛的物质之一，对人体的中毒量为0.30.5克，致死量为3克。硝酸盐在自然界广泛分布，人类的食物和饮水中均含一定量的硝酸盐。硝酸盐在某些还原菌如大肠杆菌、沙门氏菌、莫根氏变形杆菌等生长繁殖的各种因素(温度、水分、pH、渗透压等)都可促进硝酸盐还原为亚硝酸盐1曹会兰. 亚硝酸盐对人体的危害和预防J. 微量元素与健康研究, 2003, 20(2): 57-58.1】。当食物中的亚硝酸盐大量被人体吸收进入血液时，可将二价铁离子氧化成三价铁离子，使体内的正常血红蛋白转变为高铁血红蛋白，体内的高铁血红蛋白大量增加，形成高铁血红蛋白症。高铁血红蛋白已失去携氧的能力这就可能造成人体的贫血。最初，皮肤粘膜可出现青紫，如20%的血红蛋白已转变为高铁血红蛋白，则造成机体组织的缺氧症状。中枢神经系统对缺氧最为敏感，如缺氧的时间较久，可引起呼吸困难，循环衰竭以及中枢神经系统的损害严重的话可能死亡。鉴于亚硝酸钠在熏制食品中的使用的必然性以及对人体的危害故必须采取方法对熏制食品进行亚硝酸的检测。（三）研究意义2013年是中国食品安全问题突出的一年，近几年食品问题的出现给人们敲响了警钟。越来越多我们身边的食品问题出现让我们生活提心吊胆，像最近的问题奶粉问题油条等等，其中食品添加剂的滥用和过度使用最值得人们关注，因为添加剂的使用能够明显的提升食品的卖像和保质期然而往往是这种外表光鲜亮丽的才是最危险的，本课题检测的熏制香肠和双汇香脆肠一般鲜红亮丽但其中的亚硝酸盐是否过量我们不清楚，所以本课题专门研究其中亚硝酸盐是否过量，这样我们选择购买时才心里有数。本课题借助东华理工大学分析测试中心的优势，应用原子吸收光谱法间接测定熏制香肠和双汇香脆肠中亚硝酸盐的含量。（四）亚硝酸的测定方法及其研究进展近年来，国内外已报道的测定的方法很多，有紫外光度法、间接原子吸收光谱法、增敏光度法、极谱法、离子色谱法 、催化光度法、催化电位法 、流动注射分析光度法、漆酚树脂传感器直接电位法等。重氮化光度法1.重氮偶合比色法目前国内外测定亚硝酸盐的标准方法仍为重氮偶合比色法，即在稀磷酸介质中, NO2-与对氨基苯酰氨（或对氨基苯磺酸）反应生成重氨盐，然后再与N-(1-萘基)-乙二胺或（a-萘胺）偶联生成红色染料，用光度法进行测定，进而求出NO2- 的量。该法虽然有较高的灵敏度和选择性，但是所需试剂和显色反应稳定性较差，试剂本身都是毒性大的致癌物质，同时Cu2+,Fe3+,I-等对测定都有干扰，给测定带来不便2李党生, 张尧旺. 亚硝酸盐测定方法研究进展J. 黄河水利职业技术学院学报, 2005, 17(1): 50-50.2】。所以人们一直试图对此进行改进，或建立新的方法体系来测定亚硝酸盐的含量。董存智等研究了在盐酸介质中微量的亚硝酸根与天青I发生重氮化反应问题，建立了测量微量亚硝酸根的新方法。此方法的线形范围为(020)ug/25ml, 此表观摩尔吸光系数为2.21104 Lmol-1ml-1。方法已用于水中微量亚硝酸根的测定。天青为硫蒽型碱性染料，它含有一个伯胺基，在强酸性介质中易与亚硝酸根发生重氮化反应，而生成重氮化合物3董存智, 宋武美. 基于重氮化反应分光光度法测定微量亚硝酸根J. 分析试验室, 2000, 19(6): 59-61.3】。增敏光度法 ，是在选择对硝基苯胺进行重氮化反应后，以2甲基8羟基喹啉作为偶联试剂的情况下，借鉴广泛应用于金属阳离子测定的增敏作用，在形成的偶氮染料中加入阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲基铵（CTMAB），进行增敏测定4刘海军. 对氨基苯甲酸光度法测定水中 NO2J. 中国给水排水, 2000, 16(2): 51-52.4】。2.亚硝化光度法陈友太研究了藏红T与亚硝酸根在硫酸介质中的显色反应，反应产物在近紫外区有一灵敏的吸收峰，其max为350nm, NO2-浓度在(01.8ug/ml)内服从比耳定律，按工作曲线斜率算得表观摩尔吸光系数为5.22104 Lmol-1ml-1,方法具有较好的选择性5陈友太. 吸光光度法测定内燃机车冷却液中亚硝酸根含量J. 理化检验: 化学分册, 1998, 34(12): 537-538.5】。3.催化光度法催化(褪色)光度法的原理是基于亚硝酸根在稀磷酸溶液中催化EvanSBlue一氯酸钾氧化还原反应，利用硫酸介质中亚硝酸根催化氧化氯酸钾氧化吡啶橙的褪色反应，建立了微量亚硝酸根的催化光度法用于肉制品中亚硝酸盐的测定，与国家标准方法相符6郑肇生, 吴和舟, 赵文忠. 催化光度法测定超痕量亚硝酸根J. 高等学校化学学报, 1991, 12(11): 1457-1458.6】。4.紫外光度法采用紫外分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量，在酸性条件下，亚硝酸盐与间苯二酚及锆氧离子反应生成有色螯合物，建立了一种简易快速的测定食品中微量砸硝酸盐的方法，通过对猪肉、午餐肉、火腿肠、香肠等几种样品中的亚硝酸盐进行测定，回收率达到90以上。该分析方法操作简便、快速、干扰少，有良好的选择性，显色反应产物的稳定性高，是一种较为理想的测定肉制品中亚硝酸盐的方法7蒋志斌. 催化光度法测定肉制品中亚硝酸根含量J. 微量元素与健康研究, 2003, 20(5): 46-48.7】。 姚野梅等应用紫外吸收直接法测定养殖水中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的含量，并对方法可行性进行了实验论证。他们从硝酸盐、亚硝酸盐紫外吸收光谱得知以氮计的相同浓度的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮在波长219nm处的吸收相等8姚野梅, 李锦才, 周冬香, 等. 水中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的测定J. 化学世界, 1996, 11: 601-604.8】。为此，他们选用219nm波长测定其中一份试液的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的总量，另取一份试液加入一定量的氨基磺酸，破坏试液中的亚硝酸盐氮，再测定的结果仅是硝酸盐氮的含量，由总量减去硝酸盐氮的含量即为亚硝酸盐氮的含量。这种方法具有简单、快速、测定范围广（可测渔业用水、地面水）、检测成本低、毒性小等特点，但本法灵敏度较低，含氮量小于0.02g/L的水样，应采用其他更灵敏的方法。因为浓度大于6g/L时，不呈线性关系。 阎保平等利用多元线性解析理论可分辨重叠光谱的功能。研究了用二元线性解析-紫外吸收光度法同时测定NO3-和NO2-，以导数光度法能消除低频背景和高频噪音干扰及线性解析法分辨能力强的特点9 贺艳, 董玲玲, 艾菁, 等. 一种新的测定亚硝酸根的化学传感器J. 化学世界, 2006, 8: 000.9】。他们在PH为5-8条件测量的光吸收值192238nm，用线性解析-导数技术处理，同时测定试样中03.2mg/L的NO3-和NO2-，所测定的相对标准偏差小于或等于5%，加标回收率在90.9%111.1%之间。方力等研究了硝酸盐及亚硝酸盐的紫外吸收光谱，利用基于BP算法的人工神经网络对光谱数据进行处理10夏一恺, 王苏勤, 叶国英. 人工神经网络在环境监测中的应用近况J. 理化检验 (化学分册), 2006, 9: 033.10】。又提出了同时测定水样中硝酸盐氮及亚硝酸盐氮的新方法，对人工合成试样和实际水样进行了测定，取得了满意的结果。5. 流动注射光度法 马泓冰等采用流动注射分析技术，以分光光度计为检测器，建立了同时测定血清中NO3-和NO2-的方法。他们以a-萘胺-7-磺酸为显色剂，在520nm比色，测定流路中装有锌-镉还原柱，将NO3-在线还原为NO2-。分析速度达45样/h，NO3-和NO2-的检出限分别为0.01mg/L,0.003mg/L，相对标准偏差分别为1.0%，0.5%11苏苓, 李建国, 马泓冰, 等. 流动注射催化动力学光度法测定痕量锰J. 光谱实验室, 2003, 20(4): 501-504.11】。反向流动注射分析法比流动注射分析法灵敏度高得多，试剂消耗量也大大减少，选择性好，分析速度快。6.离子色谱法 目前应用离子色谱法测定亚硝酸盐含量还不很广泛，实验方法也都大体一致。其基本原理是利用离子交换的原理，连续对多种阳离子进行定量和定性分析。水样注入碳酸盐碳酸氢盐溶液，并流经系列的离子交换柱，基于待测阳离子对低容量强碱性阳离子树脂（分离柱）的相对亲和力不同而彼此分开。被分离的阳离子，在流经强酸性阳离子树脂（抑制柱）时，被转换为高电导的酸型，碳酸盐 碳酸氢盐则转变成弱电导的碳酸（清除背景电导）12杨敏, 林国剑, 钟国华, 等. 离子色谱法测定蔬菜硝酸盐含量J. 理化检验: 化学分册, 2005, 41(6): 412-414.12】。用电导检测器测量被转变为相应酸型的阳离子，与标准进行比较，根据保留时间定性，峰高或峰面积定量。该方法的测定下限一般为0.1mg/L。7.极谱法示波极谱分析法是指在特殊条件下进行电解分析以测定电解过程中所得到的电流-电压曲线来做定量定性分析的电化学方法。示波极谱法是新的极谱技术之一，该方法的优点是灵敏度高、适用范围广、检出限低和测量误差小等优点13蒋治良, 梁爱惠, 戴国忠. 催化反应-示波极谱测定痕量亚硝酸根NO_2-MR-BrO_3-催化体系J. 高等学校化学学报, 1992, 6: 009.13】。示波极谱法的原理是将样品经沉淀蛋白质、去除脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，在弱碱性条件下再与8-羟基喹啉偶合合成染料，该偶合染料在汞电极上还原产生电流，电流与亚硝酸盐浓度成线性关系，可与标准曲线定量。在示波极谱仪上采用三电极体系，即以滴汞电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极进行测定。测定时要注意显色条件的严格控制、8-羟基喹啉溶液的配制及样品的前处理。采用单扫描示波极谱法测定香肠中的亚硝酸盐的含量，测定结果与分光光度法测定的结果基本一致。该法的检测限为310-9gmL。 吴敦虎等采用JP3-1示波极谱仪，滴汞电极1.5次微分，在-0.6-1.9V范围内，通过对多种组分的试验，确定了在2.0010-3mol/L盐酸(PH=2)底液中，在-1.32V处产生的极谱波14李党生, 张尧旺. 亚硝酸盐测定方法研究进展J. 黄河水利职业技术学院学报, 2005, 17(1): 50-50.14】。 谢莉等人又研究了在稀盐酸介质中丫啶红与亚硝酸根发生亚硝化反应，建立了以极谱法测定亚硝酸根的新方法。反应产物的次微分波的峰谷电位为 -0.49V，亚硝酸根的浓度在0.020.6ug/ml范围内与峰高呈线性关系，检出限为 6.210-3ug/ml,相对标准偏差为1.84%15 Nielsen D R, Biggar J W, Erh K T. Spatial variability of field-measured soil-water propertiesJ. HILGARDIA, VOL 42, NO 7, P 215-259, NOVEMBER 1973. 25 FIG, 14 TAB, 37 REF., 1973.。用于测定环境水样中亚硝酸根，结果满意。对其反应机理进行了初步探讨，此法具有操作简便、试剂稳定、灵敏度较高、重现性好等优点，是极谱法测定亚硝酸根的一个很好实例。8.催化电位法 李贵荣等根据稀磷酸介质中亚硝酸根对溴酸钾氧化结晶紫（CV）的氧化还原反应具有明显催化作用的特性，以结晶紫四苯硼离子缔合物为电活性物质，研制出结晶紫选择性电极，用于跟踪反应过程中结晶紫的浓度变化，从而建立了一种测定亚硝酸根的催化电位法16 徐莉, 乔锦丽, 丁蕾, 等. CoPy/C 催化剂应用碱性介质氧还原催化的电化学性能 (英文)J. 物理化学学报, 2011, 10: 002.。由于结晶紫选择电极的响应范围宽，且与样品颜色无关，所以该法克服了催化光度法受指示剂浓度和有色样品的限制，提高了方法的适用性。 (五)原子吸收光谱法1.间接原子吸收光谱法通过测量其它元素而换算求得被测元素或物质含量的方法称为间接法17 Fang Z. Flow injection atomic absorption spectrometryM. New York: Wiley, 1995.。化学反应法使被测物质与某一定量可测出元素形成一定组成的化合物，经过分离后，或者测定生成化合物中的可测元素，或者测定尚未反应的可测元素，都可以换算出被测物质的含量。可利用的化学反应有以下几种： 沉淀反应法利用样品中的被测物与阳离子反应生成一种难溶化合物，测定溶液中过量的金属离子或沉淀中的金属离子，从而间接计算被测物含量例如欲测定溶液中的氯离子，可向溶液中加人已知量过量的硝酸银溶液，使生成氯化银沉淀18 宋雅茹, 王尚芝, 周艳霞, 等. 火焰原子吸收光谱法测定盐酸环丙沙星J. 北京师范大学学报 (自然科学版), 2002, 38(1): 80-83.。分离后测定溶液中剩余的Ag+，或将沉淀溶解后，测定其中的Ag+，即可计算出原样中氯元素的含量。这一方法在制作工作曲线时须经与试样一样的沉淀、分离处理，较费时间，但可以避免沉淀反应本身带来的误差和一些操作误差 配合反应法分析物与1种或2种试剂反应，形成金属配合物或离子对缔合物、螯合物等，经分离后用原子吸收法测定配合物中的金属离子，间接计算分析物19 李雯, 杜秀月. 原子吸收光谱法及其应用J. 盐湖研究, 2003, 11(4): 67-72.。例如盐酸可卡因(或可卡因)与硫氰酸钴反应，生成蓝色配合物，该配合物在水相中沉淀。离心分离可得蓝色固体。此固体能完全溶于氯仿中，形成蓝色溶液。将氯仿挥发干，用稀硝酸溶解可卡因配合物，用原子吸收法测定钴，通过钴计算盐酸可卡因或可卡因。2. 原子吸收光谱法之原子化法原子吸收光谱法作为分析化学领域应用最为广泛的定量分析方法之一, 是测量物质所产生的蒸气中原子对电磁辐射的吸收强度的一种仪器分析方法。原子吸收光谱仪是由光源、原子化系统、光学系统、检测系统和显示装置五大部分组成的, 其中原子化系统在整个装置中具有至关重要的作用, 原子化效率的高低直接影响到测量的准确度和灵敏度20 张薇, 张卓勇, 施燕支, 等. 火焰原子吸收光谱法测定山药中多种微量元素J. 光谱学与光谱分析, 2006, 26(5): 963-965.。无论是传统的原子化法, 还是近些年才有的原子化法, 都为不同元素的测定提供了较为高效的原子化方式, 以下将对不同的原子化法分别讨论。1 火焰原子化法适用于测定易原子化的元素, 是原子吸收光谱法应用最为普遍的一种, 对大多数元素有较高的灵敏度和检测极限, 且重现性好, 易于操作21 刘立行, 李萍, 李玉泽. 非完全消化-火焰原子吸收光谱法测定鸡蛋中钙和镁J. 理化检验. 化学分册, 2000, 12: 000.。 石墨炉原子化法火焰原子化虽好, 但缺点在于仅有10%的试液被原子化, 而90%由废液管排出, 这样低的原子化效率成为提高灵敏度的主要障碍, 而石墨炉原子化装置可提高原子化效率, 使灵敏度提高10 200倍22 周林爱, 曹民杰, 汤楠. 石墨炉原子吸收法测定灵芝孢子粉中的痕量硒与锗J. 分析试验室, 2001, 20(4): 87-89.。该法一种是利用热解作用, 使金属氧化物解离, 它适用于有色金属、碱土金属; 另一种是利用较强的碳还原气氛使一些金属氧化物被还原成自由原子, 它主要针对于易氧化难解离的碱金属及一些过渡元素23 铁梅, 张崴, 李晶, 等. 石墨炉原子吸收法测定食用菌中硒J. 光谱学与光谱分析, 2006, 26(1): 151-153.。另外, 石墨炉原子化又有平台原子化和探针原子化两种进样技术, 用样量都在几个微升到几十微升之间, 尤其是对某些元素测定的灵敏度和检测限有极为显著的改善。 氢化物原子化法对某些易形成氢化物的元素, 如Sb、As、Bi、Pb、Se、Te、Hg和Sn用火焰原子化法测定时灵敏度很低24 孙汉文, 锁然. 氢化物原子荧光法测定中草药中痕量铅J. 理化检验: 化学分册, 2002, 38(10): 506-508.,若采用在酸性介质中用硼氢化钠处理得到氢化物, 可将检测限降低至ng/mL级的浓度。 其它原子化法 原子化法, 针对挥发元素, 操作方便, 易于掌握, 但抗干扰能力差, 测定误差较大,耗气量较大；粉末燃烧法, 测定Hg、Bi 等元素时, 此法灵敏度高于普通火焰法；溅射原子化法, 适用于易生成难溶化合物的元素和放射性元素；电极放电原子化法, 适用于难熔氧化物的金属Al、Ti、Mo、W的测定；等离子体原子化法,适用于难熔金属Al、Y、Ti、V、Nb、Re；激光原子化法, 适用于任何形式的固体材料, 比如测定石墨中的Ca、Ag、Cu、Li; 闪光原子化法, 是一种用高温炉和高频感应加热炉的方法。2.原子吸收光谱法的优缺点 原子吸收光谱法选择性强, 因其原子吸收的谱线仅发生在主线系, 且谱线很窄, 所以光谱干扰小、选择性强、测定快速简便、灵敏度高, 在常规分析中大多元素能达到10-6级, 若采用萃取法、离子交换法或其它富集方法还可进行10-9级的测定。分析范围广, 目前可测定元素多达73种, 既可测定低含量或主量元素, 又可测定微量、痕量、甚至超痕量元素25 李雯, 杜秀月. 原子吸收光谱法及其应用J. 盐湖研究, 2003, 11(4): 67-72.；既可测定金属类金属元素, 又可间接测定某些非金属元素和有机物; 既可测定液态样品, 又可测定气态或某些固态样品。抗干扰能力强, 原子吸收光谱法谱线的强度受温度影响较小, 且无需测定相对背景的信号强度, 不必激发, 故化学干扰也少很多。精密度高, 常规低含量测定时, 精密度为1% 3%, 若采用自动进样技术或高精度测量方法, 其相对偏差小于1%。当然原子吸收光谱法也有其局限性, 它不能对多元素同时分析, 对难溶元素的测定灵敏度也不十分令人满意, 对共振谱线处于真空紫外区的元素, 如P、S等还无法测定。另外, 标准工作曲线的线性范围窄, 给实际工作带来不便, 对于某些复杂样品的分析, 还需要进一步消除干扰。3间接原子吸收光谱法在测熏制和腌制食品亚硝酸盐含量的应用原子吸收光谱法可广泛用于微量及痕量物质的测定。食品和饮料申的20多种元素，已有满意的原子吸收测定方法；在生化、土壤、水体、临床、石油产品、药品、涂料分析方面用原子光谱法测定微量元素的报道近年来也越来越多26 Terrell R E. PetroleumJ. Analytical Chemistry, 1981, 53(5): 88R-142R.。原子吸收光谱法已成为分析实验中重要的分析手段之一。腌制和熏制食品是常见的食品，但在腌制和熏制过程中会产生多种有害物质，亚硝酸盐就是其中之。亚硝酸盐会对人体造成许多不良影响，甚至可以增加癌症的发病率。科学工作者设计并完善了多种方法对亚硝酸盐进行检测，并取得了很大的进展。本实验采用原子吸收光谱法间接测定腌制及熏制食品中亚硝酸盐的含量，并进行了回收率实验。方法简捷快速，可操作性强。16东华理工大学2013届本科生毕业论文 实验部二、实验部分（一）主要试剂及其相关试剂的配置表1 主要试剂Table 1 Reagents化学名称 分子式纯度 高锰酸钾kMnO4分析纯（96%） 浓硫酸H2SO4分析纯（98.0%） 二次蒸馏水H2O锰的标准溶液NO2-1、 高锰酸钾溶液的制备用电子天平称取1.58g KMnO4 固体溶于烧杯中，定容于100ml容量瓶中，得到0.1moL/L KMnO4溶液。2、1.0mol/L和6.0mol/L硫酸溶液的配制：(1)1mol/L硫酸溶液，用移液管移取5.4ml的98%浓硫酸于烧杯中，稀释，然后定容于100ml容量瓶中。 (2) 6mol/L的硫酸溶液，用移液管移取32.6ml的98%浓硫酸于烧杯中，稀释，然后定容于100ml容量瓶中。 3、锰标准溶液的配制： 将20g/ml的锰标准溶液用二次蒸馏水稀释并配制成实验所需要的标准溶液，锰的标准溶液浓度分别为:1 5mg/L锰标准溶液：取25ml的20g/mL锰标准溶液加入到100ml容量瓶稀释定容。2 2mg/L锰标准溶液：取10ml的20g/mL锰标准溶液于100ml容量瓶稀释定容。3 1mg/L锰标准溶液：取25ml 2mg/L的锰标准溶液于50ml容量瓶中稀释定容。4 3mg/L锰标准溶液：取25ml的2mg/L的锰标准溶液再取25ml的4mg/L的锰标准溶液于50ml容量瓶中。5 4mg/L锰标准溶液：用10ml移液管移取10ml的20mg/mL的锰标准溶液于50ml容量瓶中稀释定容。6 6mg/L锰标准溶液：取25ml的20mg/L的锰标准溶液再取50ml的2mg/L的锰标准溶液于100ml容量瓶中稀释定容。4、亚硝酸钠标准溶液的配制：准确称取5 g亚硝酸钠固体粉末，溶于40mL二次蒸馏水中，搅拌，使其完全溶解，转移于l00mL容量瓶中，定容。并逐级稀释10倍、100倍、1000倍置于l00mL容量瓶中。（二）样品熏制香肠（市售）。双汇香脆肠（双汇集团唐山双汇食品有限责任公司）。（三）主要仪器表2 主要设备一览表Table 2 Main Equipment List设备名称 型号及规格 产地原子吸收光谱仪 Solaar-929 美国ATIUNICAM公司锰空心阴极灯北京真空仪表电子天平 JY4001上海精密科学仪器有限公司 分析天平 BS124S 北京赛多利斯天平有限公司高速离心机80-1 江苏省金坛市医疗器厂容量瓶50ml和100ml等移液管5ml，10ml，25ml （四）仪器工作条件 原子吸收分光光度计的工作条件如下： 波长279. 5nm 狭缝宽度0. 2nm 灯电流l0mA 火焰高度7mm 燃气流速33.3 mL/s（五）标准工作曲线的绘制 将锰标准溶液用二次蒸馏水逐级稀释到1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 g/mL，用Solaar-929测得锰元素在不同浓度下的吸光度值，绘制锰元素的标准工作曲线。（六）样品预处理1.熏制香肠的预处理准确称取5g香肠，切成片状，平铺在不锈钢小盘中，在沙浴上于250260下加热干燥，油脂受热熔化溢出，用滤纸擦去干肠片表面的油分。在研钵内研成粉末状，加50mL二次蒸馏水充分浸泡，使其中的亚硝酸盐充分溶解，抽滤，并收集滤液于烧杯中。将滤后残渣用滤布包裹，收集留存在残渣中的样品溶液，以确保样品中的盐分全部转移到烧杯中。用移液管准确移取l0mL的滤液，置于50mL容量瓶中。加二次蒸馏水稀释，定容，待测。2.双汇香脆肠的预处理 准确称取5g香肠，切成片状，平铺在不锈钢小盘中，在沙浴上于250260下加热干燥，油脂受热熔化溢出，用滤纸擦去干肠片表面的油分。在研钵内研成粉末状，加50mL二次蒸馏水充分浸泡，使其中的亚硝酸盐充分溶解，抽滤，并收集滤液于烧杯中。将滤后残渣用滤布包裹，收集留存在残渣中的样品溶液，以确保样品中的盐分全部转移到烧杯中。用移液管准确移取l0mL的滤液，置于50mL容量瓶中。加二次蒸馏水稀释，定容，待测。（七）样品测定 取预处理后的各种样品溶液l0mL，分别加入0.1mol/L高锰酸钾溶液20mL，再逐滴加入浓度为1mol/L的硫酸溶液，调节pH=3，产生棕褐色二氧化锰沉淀。静置1h，使沉淀完全。通过观察溶液颜色，调整高锰酸钾和稀硫酸用量，以保证亚硝酸盐反应完全。用离心机离心沉降沉淀，并洗涤。在沉淀中逐滴加入6mol/L硫酸，微热使其溶解，溶液呈较淡的肉红色，甚至无色。冷却后，稀释定容于l00mL容量瓶中。测定前，将原溶液用l00mL容量瓶逐级稀释到原子吸收分光光度计可测定的浓度范围内。东华理工大学2013届本科生毕业论文 结果与讨论 三、 结果与讨论（一）实验数据表 3 香肠热处理前后质量变化Table 3 sausage mass change before and after annealing加热前加热后熏制香肠50g3.7g双汇香脆肠5.0g4.8g（二）线性范围锰元素在1.0mg/L6. 0mg/L浓度范围内，吸光度与浓度呈线性关系，其相关系数为0. 9938。锰标准溶液测定数据见表4。表 4 锰标准溶液数据Manganese standard solution data in Table 4溶液编号123456吸光度A0.05790.11820.15610.23620.29970.3592浓度 (mg/L)1.02.03.04.05.06.0 图1 锰标准溶液曲线Figure 1 Manganese standard solution curve in 由图像可知其标准曲线为y = 0.0609x - 0.0086线性度R = 0.9938 NaNO2（三）样品分析按仪器工作条件对样品进行测定，得到相关数据如下表：