培养基适用性验证方案wm.docx

培养基适用性验证方案 编制人： 日期： 审核人： 日期： 批准人： 日期： 目 录1. 概述2. 验证目的3. 验证依据4. 验证项目5. 验证小组成员及职责6. 验证时间7. 验证材料8. 验证内容8.1. 无菌检查用培养基适用性验证8.2. 计数用培养基适用性验证9. 验证方案的评定与建议10. 验证方案的最终审核意见培养基适用性验证报告1. 概述培养基是无菌检查和微生物限度检查的关键物品之一，培养基的是否符合检验要求，影响着检验结果的准确性、有效性。2. 验证目的 验证培养基是否符合检验要求3. 验证依据中国药典2015版 通则1101 生物检查法4. 验证项目无菌检查用培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、营养肉汤；计数用培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙式葡萄糖琼脂培养基、R2A琼脂培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基5. 验证小组成员姓名部门职责质量部审核验证方案、批准验证方案、并对验证结果报告质量部起草验证方案，负责验证实施过程中的监督检查，确保结果的可靠性。质量部负责验证方案的实施及验证结果的记录，对所测数据准确性负责。6. 验证时间 本次验证于2016年1月18日开始进行，将于2016年1月22日完成7. 验证材料7.1. 仪器设备手提式压力蒸汽灭菌器、生物安全柜 、生化培养箱、 霉菌培养箱、电热鼓风干燥箱、净化工作台7.2. 对照培养基 胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙式葡萄糖琼脂对照培养基、R2A琼脂对照培养基、大豆酪蛋白琼脂对照培养基7.3. 其他器具酒精灯、试管、75%乙醇、灭菌刻度吸量管（1ml）、灭菌硼硅酸玻璃培养皿（90mm15mm）、锥形瓶，移液器，无菌吸头等。7.4. 菌种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、黑曲霉、白色念珠菌；8. 验证内容8.1. 无菌检查用培养基适用性验证8.1.1. 无菌性验证随机选取灭菌后硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基各5瓶，并对培养基分别编号。将硫乙醇酸盐流体培养基置3035培养14天；将改良马丁培养基置2328培养14天，逐日观察。8.1.2. 灵敏度验证取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，并分别编号为1、2号，另取一支不接种作为空白对照，置305培养3天，逐日观察结果；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，并分别编号为1、2号，另一支不接种作为空白对照，置2328培养5天，逐日观察结果。8.1.3. 结果判定无菌性检查，应无菌生长；灵敏度检查，空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管均生长良好，判无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。8.2. 计数用培养基适用性检查 8.2.1. 取铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置3035培养72小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌各50100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙式葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置2328培养120小时，计数。8.2.2. 取铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置3035培养72小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌各50100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙式葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置2328培养120小时，计数。 8.2.3. 大豆酪蛋白琼脂培养基适用性检查同胰酪大豆胨琼脂培养基。8.2.4. 取铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各50100cfu/ml各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注R2A琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置3035培养72小时，计数；同法接种于R2A琼脂对照培养基。8.2.5. 结果判定 若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。9. 验证方案的评定和建议10. 验证方案的最终审核意见培养基适用性验证报告1. 被验证培养基名称批号生产厂家有效期硫乙醇酸盐流体培养基胰酪大豆胨液体培养基胰酪大豆胨琼脂培养基沙式葡萄糖琼脂培养基R2A琼脂培养基大豆酪蛋白琼脂培养基2. 对照培养基对照培养基名称批号来源有效期胰酪大豆胨琼脂培养基沙式葡萄糖琼脂培养基R2A琼脂培养基大豆酪蛋白琼脂培养基3. 仪器设备仪器设备名称型号编号是否检定校准手提式压力蒸汽灭菌器生物安全柜净化工作台生化培养箱霉菌培养箱电热鼓风干燥箱4. 菌种菌种名称菌种编号批号代数来源金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉5. 验证结果5.1. 无菌检查用培养基适用性验证 结果见附件；确认结果： 符合规定 不符合规定5.2. 计数用培养基适用性验证结果 结果见附件；确认结果： 符合规定 不符合规定6. 验证结论 按中国药典2015版 通则1100生物检查法中规定的方法进行相应的培养基的适用性验证，结果附件：无菌检查用培养基适用性验证结果 培养基名称生产厂家批 号数 量检验日期报告日期培养基灵敏度检查菌液（小于100cfu）硫乙醇酸盐流体培养基（12ml/管）菌液（小于100cfu）胰酪大豆胨液体培养基（9ml/管）第1天第2天第3天第1天第2天第3天第4天第5天金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌白色念珠菌生孢梭菌黑曲霉空白对照空白对照结果判定培养基无菌性检查 天数瓶数123456789101112131412345结果判定注：记录时，“+”表示生长良好，“-”表示无生长，“”表示生长微弱，“/”表示不涉及，“”勾选项。检验人/日期： 复核人/日期：计数用培养基适用性验证结果培养基名称生产厂家批 号数 量检验日期报告日期培养基灵敏度检查结果菌种类型样品培养基对照培养基A/B（%）样品培养基菌与对照培养基上的菌落落形态对比平皿1平皿2平均A平皿1平皿2平