原子吸收光谱法测定血中微量元素POC.doc

原子吸收光谱法测定人体血清中微量元素钙、镁、铜、铁、锌1、2、实验部分2.1 仪器和试剂2.1.1 仪器PE原子吸收光谱仪：PP900ATransferpette微量移液管SIGMA离心机：3-152.1.2 试剂及其配制Cu、Fe、Zn标准溶液为1000 mg/L（国家标准物质中心），用时稀释至10 mg/L备用。Ca、Mg标准溶液为1000 mg/L（国家标准物质中心），用时稀释至100 mg/L备用。曲拉通：北京全新拓达科技有限公司，Triton X-100；硝酸：北京化工厂，优级纯GR；盐酸：北京化工厂，优级纯GR；氯化钠：北京化工厂，分析纯AR ；氧化镧：国药集团化学试剂有限公司，高纯试剂；曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通47 mL，加硝酸10 mL，用超纯水定容至1 L，用时稀释10倍后备用。镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧287 g加100 mL超纯水，436 mL盐酸，30 g氯化钠，最后用纯水定容至3 L，用时稀释4倍后备用。2.2 实验步骤2.2.1 样品的预处理取事先存放在冰箱中保存的全血样品，上离心机离心2 min，然后用微量取样器分取500 L血清于5 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入2 mL稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中Cu、Fe、Zn的测定。再分取100L血清于5 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入2 mL稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于Ca、Mg血清中的测定。2.2.2标准曲线的测定取Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起），分别吸取1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0mL于100mL容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，摇匀备用。取Ca标准使用液100 mg/L，分别吸取2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mL于100mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mg/L，摇匀备用。和Ca的标准曲线配制一样，配成Mg的标准曲线为0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5 mg/L，摇匀备用。3、结论血清中微量元素的正常值范围（单位：mg/L）Ca-0.902.00Zn-0.902.00Fe-0.903.00Ca-95.0115.0Mg-21.025.0 其中，注意如果血清溶血则铁元素含量大于3.00 mg/L，这时候测定的铁元素的数值就不准确了，需取样品重新测定。加标回收率元素 测定值mg/L（为样品稀释后数值） 加标量mg/L 加标测定值mg/L 回收率%Zn 0.19 0.20 0.38 95.0Cu 0.29 0.20 0.48 95.0Fe 0.30 0.20 0.49 95.0Ca 4.9 1.0 5.9 100.0Mg 1.0 1.0 2.0 100.0试验方法1、溶液配制1.1 曲拉通与硝酸混合液：取曲拉通30 mL，加硝酸10 mL，用超纯水定容至1 L，用时稀释10倍后备用。1.2 镧盐与氯化钠混合液：取氧化镧58.65 g加50 mL超纯水，250 mL浓盐酸（产生大量热，此步骤一定要慢），最后用纯水定容至1L，备用。1.3 Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L（此使用液三种元素可以配在一起）：分别移取1000 mg/L标准溶液各1 mL于100 mL容量瓶中，配制成10 mg/L标准使用液，摇匀备用。1.4 Ca、Mg标准使用液（混合）Ca标准使用液10 mg/L：移取1000 mg/L Ca标准溶液0.25 mL于25 mL容量瓶中，配制成10 mg/L标准使用液，摇匀备用。Mg的标准使用液5 mg/L：移取1000 mg/L Mg标准溶液0.125 mL于25 mL容量瓶中，配制成5 mg/L标准使用液，摇匀备用。2、 实验步骤2.1 样品的预处理取2.5 mL血清于15 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入10 mL稀释后的曲拉通与硝酸的混合液，摇匀备用，此试样用于血清中Cu、Fe、Zn的测定。再分取100 L血清于15 mL已经烘干的干净小塑料管中，加入10 mL稀释后的镧盐与氯化钠的混合液，摇匀备用，此液用于Ca、Mg血清中的测定。2.2标准曲线的测定取Cu、Fe、Zn标准使用液10 mg/L，分别吸取0.25 、0.50 、0.75 、1.0 、1.25 mL于25 mL容量瓶中，用稀释后的曲拉通和硝酸混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50 mg/L，摇匀备用。取Ca标准使用液10 mg/L，分别吸取0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 mL于10mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为0.5 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 mg/L，摇匀备用。取Mg的标准使用液5 mg/L，分别吸取0.1 、0.2 、0.4 、0.6 、0.8 mL于10 mL容量瓶中，用稀释后的镧盐和氯化钠混合液稀释至刻度，此标准溶液曲线分别为配成Mg的标准曲线为0.05 、0.10 、0.20 、0.30 、0.40 mg/L，摇匀备用。2.3进样3、结果计算血清中微量元素的正常值范围（单位：mg/L）Cu-0.902.00Zn-0.902.00Fe-0.903.00Ca-95.0115.0Mg-21.025.0 加标回收率元素 测定值mg/L（为样品稀释后数值） 加标量mg/L 加标测定值mg/L 回收率%Zn 0.19 0.20 0.38 95.0Cu 0.29 0.20 0.48 95.0Fe 0.30 0.20 0.49 95.0Ca 4.9 1.0 5.9 100.0Mg 1.0 1.0 2.0 100.0原子吸收光谱法测定儿童指血与血清种微量元素发布时间：2011-03-21 来源：安徽省医学协会信息中心【摘要】 目的 通过检测儿童指血与血清5种微量元素铜、锌、钙、镁、铁(Cu、Zn、Ca、Mg、Fe)进行比较，以了解二者的差异。方法 40例014岁儿童同时采集指血和静脉血分离血清用BH5100型原子吸收光谱仪测定5种微量元素(Cu、Zn、Ca、Mg、Fe)。结果 测定指血铜与血清铜比较二者差异无显著性（P0.05)，测定指血与血清锌、钙、镁、铁比较二者差异有显著性(P0.001)。结论 原子吸收光谱法测定儿童指血与血清5种微量元素除铜外其相关性较差，实验室必须测定大样本正常人群以确立本地区指血与血清五种微量元素各自的正常参考范围。【关键词】 儿童 指血 血清 微量元素微量元素在人体内按其生理作用的不同分为必需微量元素和非必需微量元素，Cu、Zn、Ca、Mg、Fe为人体必需微量元素，在人体中具有重要的生理作用。目前，原子吸收光谱法测定此5种微量元素多采用指血，因其简便，尤其对婴儿不易采静脉血者，更为适用。但指血测定此5种微量元素，影响因素较多，北京博晖创新光电技术有限公司推出BH5100型原子吸收光谱仪，该仪器既可测定指血Cu、Zn、Ca、Mg、Fe，又可以测定血清Cu、Zn、Ca、Mg、Fe。本研究旨在比较两种标本在同一仪器测定的相关性。1 资料与方法1.1 一般资料 2007年7月1日25日来我院检测微量元素的儿童（014岁）共40例。1.2 仪器与试剂 北京博晖创新光电技术有限公司生产的BH5100型原子吸收光谱仪及其配套试剂：（1）血清五元素专用稀释液，批号：053702；（2）全血五元素专用稀释液，批号：013715；（3）血清五元素校标液，批号：070326；全血五元素校标液，批号：070514；（4）质控液，批号：070409。1.3 方法1.3.1 检测方法 40例014岁儿童采集指血40l分别加入全血5元素专用稀释液中，同时抽取空腹静脉血23ml,离心分离后取血清300l分别加入血清5元素专用稀释液中,充分混匀后按仪器操作说明测定。1.3.2 统计学处理 采用SPSS10.0统计软件，统计学分析采用样本均数t检验。2 结果 40例儿童指血与血清5种微量元素测定结果对照见表1。表1 40例儿童指血与血清5种微量元素测定结果注：各微量元素指血与血清结果比较t检验，*P0.053 讨论Cu、Zn、Ca、Mg、Fe 5种微量元素在人体构成细胞成分，以酶和辅基激活剂的形式参与蛋白质、酶、激素和维生素的合成、分解与转化1，儿童正处于生长发育的关键时期，体内微量元素含量过高或缺乏直接影响其身心健康。闫福堂等用同法研究西安儿童血清5种微量元素，结果显示儿童血清锌、钙、铁缺乏率较高2，因此应重视儿童体内微量元素的检测。而准确地测量血液中微量元素，指导临床有针对性地补充微量元素尤为重要。血铜、锌首选测定方法为原子吸收光谱法3，本研究从表可看出用原子吸收光谱法测定儿童指血与血清铜比较二者差异无显著性（P0.05)，测定指血与血清锌、钙、镁、铁二者差异有显著性(P0.001)；原子吸收光谱法测定儿童指血与血清Cu相关性较好(r为0.70)，而该法测定指血与血清锌、钙、镁、铁相关性较差（相关系数分别为0.31、0.25、0.40、0.29）。其原因为血液中的锌80%存在于红细胞的碳酸酐酶中，故指血中锌明显高于血清中的锌，血液中的钙几乎全部存在于血浆(血清)中，故血清钙明显高于全血钙，细胞内液镁含量明显高于细胞外液含量，故指血镁测定结果明显高于血清镁，人体大部分的铁分布在血红蛋白中约占人体总铁量的70.17%，全血铁的缺乏和血清铁的缺乏各有其临床意义。原子吸收光谱法测定儿童指血与血清5种微量元素除铜外其相关性较差，实验室必须测定大样本正常人群以确立本