关于奶牛乳房炎的研究进展.doc

第二部分 论文奶牛乳房炎的研究进展摘要：奶牛乳房炎是世界范围内最常见而又最难防治的奶牛疾病之一，奶牛乳房炎是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病。本文综合了近几年奶牛乳房炎的疫苗研究进展情况，阐述了奶牛乳房炎的影响、病原微生物的入侵、乳腺内感染、乳房组织对感染的反应，着重介绍了奶牛乳房炎的研究近况，最后针对如何预防和治疗奶牛的乳房炎，提出了防治相结合的更为有效的综合措施和几点建议。关键词：奶牛乳房炎；危害；发病机制；预防诊断；防治引言：奶牛乳房炎又名奶牛乳腺炎，是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病，是危害奶牛业发展的四大疾病之一1。奶牛乳房炎是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病，它是造成奶牛业经济损失的最主要的原因。在美国，每年由此造成的经济损失高达20亿美元；在世界范围内，每年的牛奶生产损失可达380万t；在我国，每年用于治疗奶牛乳房炎的费用近亿元人民币2。奶牛乳房炎发生原因众多，病原体感染和环境等其他因素的影响都不可忽视。控制乳房炎的发生，关键问题就是做好预防和治疗，本文就奶牛乳房炎的危害、类型、病因、诊断、防治等进行了综述，旨在对奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据。1 危害11 奶产量减低奶牛乳房炎时，奶中体细胞数升高。体细胞数与产奶量损失密切相关。正常乳汁中体细胞计数在2050万个ml之间,当牛群体细胞数为50100万个/ml时,潜在损失的产奶量约为12;体细胞数为100500万个/ml时，损失的产奶量为20。发生临床型乳房炎时,体细胞数超过500万个ml。发病症状严重者，出现泌乳停止，如以每日25千克计，如在泌乳第三个月发病，此类病例将损失牛奶4000千克3。12 影响食品卫生如乳中有害病菌及其毒素含量过高，能直接引起消费者发生相关的疾病。对乳房炎病牛的治疗。目前普遍采用抗生素疗法，抗生素的大量应用，造成原料奶抗生素残留等问题。敏感者饮用含相应抗生素的乳后可引起过敏反应。更多的情况下，消费者可能闪长期饮用残留有抗生素的乳而使人体内微生物产生耐性，给医治疾病带来困难。因此，包括我国在内的很多国家已出台了相关的法规。规定经抗生素治疗的奶牛须有休药期，休药期内所产的奶不得出售。此外，由于乳中有抗生素残留，接种乳酸菌后不易繁殖，使乳酸生成受阻，极大地影响乳制品的加工3。1.3 对牛奶品质的影响乳房炎对牛奶质量的影响主要体现在降低鲜奶质量，由于奶中含有大量的体细胞，使鲜奶受到一定程度的污染，从而影响乳制品的质量和风味。牛奶中体细胞过多可降低乳蛋白、乳糖和乳脂肪的含量4。乳房炎对牛奶的质量影响见下表：14 其他危害乳房炎发生以后，牛体抵抗力降低，经布氏杆菌、结核杆菌等细菌混合感染后，会直接或间接地引起人畜共患病，从而危及人类的健康。乳房炎引起的疼痛可继发牛前胃迟缓，使牛慢慢消瘦，甚至引发败血症而死亡5。如果牛在繁殖期感染了乳房炎，不仅降低妊娠率，还会增加其流产率；奶牛在发情期前患有乳房炎，则大多数牛会不表现发情行为，这是因为乳房炎推迟了发情周期，患乳房炎的奶牛雌激素水平会降低，缺乏黄体激素刺激排卵6。因此，对奶牛乳房炎的预防和防治应引起足够的重视。2乳房炎的分类及症状奶牛乳房炎是由病原微生物感染而引起乳房组织及乳头发炎的一种疾病。根据不同的分类方法、依据及症状表现主要有以下两种分类方式。2.1按病原菌分类乳房炎病原微生物分为两大类：一类为传染性病原菌，包括无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌等，此类菌常定植于被感染的乳腺通过挤奶工或挤奶机从病牛向健康牛传播；另一类为环境性病原菌包括大肠杆菌类及其它革兰氏阴性菌、凝固酶阴性葡萄球菌、环境链球菌等，是乳牛场的环境中的常在菌，常由各种原因经乳头口进入乳池而引起感染3。2.2按奶牛乳房和乳汁有无分类在临床上，根据奶牛乳房和乳汁有无将奶牛乳房炎分为临床型乳房炎和亚临床型乳房炎(即隐型乳房炎)。 临床型乳房炎的主要表现：患牛乳房出现红、肿、热、痛，乳汁异常变化(乳汁中有絮片、凝块、水样状，乳汁颜色发黄或发红)，产奶量减少或无奶，乳房触摸有硬块，有的患牛出现体温高、精神沉郁、食欲不佳等全身症状7。其可分为急性乳房炎、亚急性乳房炎和慢性乳房炎。除此之外，根据炎症性质还可分为浆液性乳房炎、卡他性乳房炎、纤维蛋白性乳房炎、化脓性乳房炎、出血性乳房炎和坏疽性乳房炎。亚临床型乳房炎，又称奶牛隐型乳房炎，是奶牛中发生最多的一种乳房炎，乳汁的pH70，呈偏碱性；乳内有乳块、絮状物和纤维，为无临床症状表现的一种乳房炎，是临床型乳房炎发展的基础。隐性乳房炎流行面广，为临床型乳房炎的2040倍8。乳房和乳汁无肉眼可见异常，在乳汁检查中的体细胞数增加(乳汁中体细胞为150万个mL以上)，乳中能检出致病菌，由于隐性乳房炎无临床症状表现和乳汁无异常肉眼变化，往往被人所忽视9。隐性乳房炎的主要影响是使产奶量下降、品质降低，而且有时会发展为临床型乳房炎。3 病原与流行规律31发病原因引起奶牛乳房炎的原因很多，其中生物源性因素是引起奶牛乳房炎的主要原因，其次环境因素管理因素以及疾病继发等均能成为奶牛乳房炎的诱因。311 病原菌 乳房炎主要由多种非特定的病原微生物引起，有球菌、杆菌、霉形体和病毒，共达150多种，较常见的有23 种10。主要病原菌包括金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、化脓棒状杆菌、大肠杆菌类等。次要病原菌包括凝固酶阴性葡萄球菌、牛棒状杆菌、表皮葡萄球菌、微球菌等11。病原体主要通过乳头管扫和乳头管进入乳房，是感染乳房炎的主要途径12。312环境因素和管理因素 当乳房受到摩擦、挤压、碰撞、刺划等机械因素，尤以幼畜吮乳时用力碰撞和徒手挤乳方法不当，使乳腺损伤，并通过厩舍、运动场、挤乳手指和用具而引起感染12。313其他因素 泌乳期饲喂精料过多而乳腺分泌机能加强，应用激素治疗生殖器官疾病而引起的激素平衡失调，是本病的诱因13。某些传染病(布氏杆菌病，结核病等)也常并发乳房炎。另外，体内某些脏器疾病产生的毒素，病原微生物产生的毒素以及饲料，饮水或药物中的毒素也可影响到乳房而引起炎症。还有研究证明乳房炎与遗传有关，与自身、体型、年龄、季节也有一定关系14。32发病规律(1)高温季节5一10月，7、8、9月为高峰，产奶前、后、停奶易发，后乳区高于前乳区，经产牛，老龄牛发病率高于初产牛、青壮年牛，干奶期高于泌乳期，悬重乳房易发。(2)隐性乳房炎感染率极高。感染阳性率为46一857，临床型乳房炎占173、隐性占777。(3)卫生条件差时，感染率极高14。4 奶牛乳房炎的发病机理由于奶牛乳腺特殊的生理结构，易受外界病原微生物的入侵而发生炎症。这种炎症的发生过程主要经历微生物入侵、乳腺内建立感染、引起乳房内炎症等一系列阶段15。41 病原微生物的入侵牛的乳房由4个乳腺体构成，每个乳腺体由一个乳腺乳池、一个乳头乳池、无数个乳导管和具有乳汁分泌功能的乳腺泡组成。由于乳房的特殊结构，一般情况下，病原微生物入侵乳房的主要路径为：乳头表面或乳头管一乳池一乳导管一乳腺泡。病原微生物突破乳头管括约肌的防御作用可由以下4个途径实现：在挤奶过程中侵入。挤奶过程乳头括约肌舒张与收缩交替发生，由于乳头口真空波动，乳头产生乳汁的微型小滴，如果其中含有病原微生物，它们就可能随真空而吸进乳头管进入乳池。在挤奶间隙期间，病原微生物在乳头管内增殖并穿过乳头管而侵入。在对牛乳腺进行药物处理时，如果对乳头口和注射器消毒不严，或是注射器插入乳头管过深，就可能将病原微生物带入乳腺内。机械压力，如手工挤奶时的压榨乳头或奶牛走动或躺卧挤压、乳头末端的机械压力而使细菌侵入15。42 乳腺内感染病原微生物突破乳头管的防线后，侵入乳腺内，乳腺内的保护性物质就成为一种重要的防御机制。乳腺内的巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等免疫细胞能够杀灭进入乳腺的病原微生物，防止乳房炎的发生。但长期对高产奶量奶牛的选育，使每头奶牛的产奶量大大增加，乳腺组织需要源源不断地从血液中吸取营养物质，转化为乳成分并排出体外。由于乳腺组织长期高负荷的运作，使其对病原微生物的抵抗力降低。病原微牛物不能被及时的清除，在接近乳头的乳区下部的乳管壁或分泌组织中生长和繁殖，并逐渐建立感染区，然后向上扩散到乳区的其他部位。扩散的速度和范围，因入侵病原微生物的数量、繁殖速度、毒力强弱和黏附乳腺上皮的能力等因素而异16。43 炎症形成病原菌感染乳腺后，乳腺组织可释放一种化学物质，这种化学物质能够吸引大量的白细胞主要是嗜中性多形核白细胞(PMN)进入乳腺。进入乳腺的PMN有两大作用：释放一种可改变血管渗透性的物质，使液体自由进入乳腺组织，以稀释刺激乳腺的物质，中和有毒产物；在乳腺泡、乳导管和乳池周围聚集，然后进入乳汁，吞噬和消化病原微生物，减少病原微生物数量。感染乳区退化的泌乳细胞和白细胞一起，阻塞排乳导管，致使其余有泌乳功能的乳腺泡功能退化，形成瘢痕组织。在炎性反应的初期，受损害乳区血管扩张，血流变慢，血管通透性增加，血管中含有的炎性介质(如组织胺、白细胞三烯、细菌毒素)以及血液中的凝固因子增多，加剧炎性反应17。5 诊断51 一般检查方法乳房炎的临床检查主要用望、闻、问、切4种诊断方法，来判断超急性、急性、亚急性和慢性乳腺炎，有时须检查奶汁和触(切)乳房18。临床型乳房炎可产生明显的临床症状，如泌乳量下降、乳房肿胀、乳房的炎症变化等。较易做出诊断，确诊特定的病原体须做病原分离培养、生化鉴定及动物实验。对奶牛隐性乳房炎的诊断方法有多种：乳汁体细胞计数法、CMT法、乳盘实验法、Na-Gase法、氯化钙凝乳试验及改良法、乳房炎简易诊断液法、兰州LMT隐乳试验法、牛乳酶学试验、乳中乳酸脱氢酶、谷氨酸丙酮酸转氨酶、血清白蛋白含薰测定、微生物学培养、SMT试剂诊断法、免疫学诊断等。其中体细胞计数、NaGase法、CMT法、兰州LMT隐乳试验等应用较多，且方法简单可靠319。52 病原学检查由于大多数奶牛乳房炎都是由细菌所引起的，所以确诊特定的病原体对于奶牛乳房炎的治疗就尤为关键，确诊特定的病原体需做病原分离培养、生化鉴定及动物试验。多数乳房炎的发生是由于病原菌感染引起，而引起乳房炎的病原菌又极其复杂。病原学调查的目的就是查清乳房炎患牛的病原，为在治疗上选有效药物提供依据，从而进一步控制本病的发生9。6 防治措施61 预防目前，各国奶牛业均强调改善奶牛挤奶卫生条件。严格执行挤奶操作规程。这有利于减少传染性病原菌的传播，减少传染性和隐性乳房炎的发生。预防乳房炎的关键措施，除了要保持牛场(舍)的良好环境、牛体卫生和严格执行科学的挤奶程序以外，科学饲养和疫苗接种近些年也关注的比较多。611 科学喂养研究表明奶牛群乳房炎发病率及严重程度与其本身胡萝卜素、维生素A、维生素E、硒、锌、铜的营养状况有关。奶牛日粮中补饲适量胡萝卜素、维生素A、维生素E、硒、锌、铜等抗氧化性微量养分可对乳房炎的发生起到不同程度的防御作用20。据报道饲过多的精料会使乳房炎的易感性增加。控制高产奶牛精粗比例和青贮料采食量，使优质粗纤维摄人量不低于日粮的21可有效防止乳房肿胀或硬结，减少乳房炎发生率。控制副料喂量特别是啤酒糟喂量，增喂微量元素等可有效降低乳房炎发生率5。因此应在饲喂奶牛全价日粮保证营养充足的基础上添加多种微量元素可有助于提高奶牛的抗病力。612干奶期预防主要是向乳房内注入长效药物，杀灭己侵入和以后侵入的病原体，有的长效期可达48周11。613疾病防治保持厩舍、运动场、挤乳人员手指和挤乳用具的清洁，以创造良好的卫生条件，做好传染病的防检工作，正确进行挤乳，挤乳前先用温水将乳房洗净并认真按摩，挤乳时用力均匀并尽量挤尽乳汁，先挤健畜后挤病畜，逐渐停乳，停乳后注意乳房的充盈度和收缩情况，发现异常及时检查处理。分娩前，乳房明显膨胀时，适当减少多汁饲料精料的饲喂量；分娩后，控制饮水适当增加运动和挤乳次数，有乳房征兆时，除采取医疗措施外，并根据情况隔离患畜11。614营养平衡给予奶牛营养充足的平衡日粮，注意补充维生素、矿物质，特别是维生素A、维生素E、胡萝卜素、硒、锌等微量抗氧化成分，如维生素E1OOIU/d、硒3-6mg/d可提高抗病力，降低乳房炎发病率、日粮不平衡、矿物质失衡，出现凝集，造成酸奶。615定期检测定期检测隐性乳房炎，做到早发现、早预防、早治疗定期检测至少2次/年，多发季节1次/月。干奶期检测：干奶前7-lOd进行11。616 疫苗接种给健康奶牛接种乳房炎疫苗是预防奶牛乳房炎的重要措施。目前研究较多的是金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的疫苗。研制的金黄色葡萄球菌疫苗或类毒素已用于金黄色葡萄球菌性乳房炎的防治中。试验结果表明：不论是灭活苗还是活苗都能提高奶牛自发性治愈率降低I隘床型乳房炎的发生率，且活苗免疫后的血清抗体效价明显高于灭活苗。目前研究较多的是大肠杆Ecoli(0111B4)J5Ecoli J5菌苗免疫可提高奶牛血清和乳汁中Ecoli J5核心抗原的效价，同时能够交叉抵抗Ecoli 727的感染。关于链球菌的疫苗研究较少，主要是因为无乳链球菌和乳房链球菌，但效果都不理想。国内研究的乳房炎疫苗多为乳房炎多联苗，取得了较好的效果21。62 治疗621 抗生素治疗抗生素一直是人们首选的用于奶牛乳房炎治疗的药物，是控制奶牛乳房炎的基本药物。理想的方法是根据临床症状和药敏试验结果。选用不同的药物、药物组合及给药方式(全身治疗或局部治疗)进行治疗。常用的药物有青霉素、链霉素、丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、氯霉素、磺胺类药物等。但随着抗生素长期大潮量的广泛使用，细菌穗药性、药物残窝等阉题被普遍关注，抗生素的使用受到限制。新型磷效、低残黯、价格低廉的新一代抗生素的研究开发是抗生素控制乳房炎的重要发展方向。氟喹诺酮类药物(环丙沙星、愚诺沙星等)是新一代化学合成抗菌药物的典型代表。研究表明，该药具有抗蘸广、抗菌活性强、剐作用小、与其他抗菌药无交叉耐药性等优点，该类药能进入吞噬细胞内，也能通过血乳屏障，达到杀菌的目的22。622 中草药治疗中草药主要以自然界的植物、动物和矿物质为原料。是动物体最易吸收的纯天然物质，含有多种生物有效成分且毒副作用甚微，几乎无残留、无抗药性，不污染环境。尤其是在治疗奶牛乳房炎方面具有独特优势，如散结消肿、通经下乳等功能，在治愈乳房炎的同时，还可增强奶牛乳汁分泌功能。利用补气、活血的药物可以减少隐性乳房炎的发生，如引萼、自芍、蓑甍、蒲黄、丹参、益母草等中药制成添加剂喂奶牛，可显著提高奶牛淋巴细胞的吞噬能力，降低隐性乳房炎的发生率。岳春旺等(2000)用中草药散剂“乳炎康”治疗乳房炎效果很好。戴鼎震等(2004)用蒲公英、连翘、金银花、当归、川芎、柴胡、木通、等中药组方对69头患隐性乳房炎的牛治疗，有效率力84，治愈率为74。张树蒡(2004)给临床乳房炎快速诊断液诊断为阳性的奶牛饲喂由穿心莲等组成的中药复方，结果试验奶牛体细胞数下降了75，隐性乳房炎转阴率为8781。据报道中西医结合治疗乳房炎也取得了较好的效果。马树东等用乳房炎消肿散内服结合特效米先治疗奶牛乳房炎，治愈率为85623。623 生物制剂治疗疫苗的使用为奶牛乳房炎的治疗提供了新的途径目前已开发用于治疗的疫苗主要有以下几种： 灭活苗。应用活的或灭活的菌体苗、分离的肽糖、类毒素和粘附素等制作的疫苗统称为传统苗。其中灭活苗是应用最广泛的。早期的研究着重于金葡菌和链球菌的灭活苗，其方法是用甲醛和- 丙烯内脂灭活裂解细胞毒素。灭活苗能刺激机体产生大量IgGl抗体，IgGl可有效凝集菌体、中和毒素，但调理能力较低，不能有效调理中性粒细胞对金葡菌的吞噬24。由于金葡菌菌株相当复杂，故该菌菌苗很难产生交叉保护。所以，运用自家菌苗对抗变化的病原体(当地免疫法)是普遍的实践方法。活苗。用金黄色葡萄球菌活苗免疫羊或牛，可保护强毒金黄色葡萄球菌的感染。在对实验性乳房炎的免疫、增强体外吞噬作用及由乳腺内中性白细胞对病原菌的杀灭方面，活苗明显优于灭活苗25。金葡菌活苗可刺激抗体产生高水平的抗毒素抗体，据报道接种菌苗的奶牛其乳汁和血清中抗-毒素和-毒素抗体比非接种牛显著升高24。新型DNA 疫苗。随着分子生物学技术的出现，越来越多的研究者把研究重点由传统疫苗转向新型的基因工程疫苗。用编码金黄色葡萄球菌抗原（至少包含两种抗原的嵌合体）的质粒DNA 进行免疫已经成为预防乳房炎的新策略。研究者用金黄色葡萄球菌两个保守的表位抗原GapB 和GapC构建GapC/B 复合体作为疫苗的主要成分。在小鼠体内，通过判定IgG、IgG1、IgG2a的总水平和IL-4、IFN-分泌型细胞的数量，表明在小鼠体内GapC/B蛋白能诱导出极强的体液和细胞应答。实验证明，化学嵌合体蛋白GapC/B 可以作为候选基因进行进一步的疫苗研究21。要有效控制乳房炎，应在充分了解乳房炎致病菌与奶牛乳腺的相互作用以及乳腺组织防御机能等知识的基础上，考虑病原宿主药物之间的相互关系。一个理想的乳房炎疫苗免疫应是细菌抗原在体内触发体液免疫的同时，诱导PMN进入乳腺，刺激PMN的吞噬和杀菌作用，PMN 的游出及乳中调理性抗体的呈现应同时发生26。因此，要筛选出良好的免疫佐剂，在使用安全的条件下尽可能提高抗原的免疫原性以及乳腺免疫反应强度，特别是促进PMN 吞噬杀菌功能，彻底清除入侵病原菌10。小结奶牛乳房炎是多因素综合造成的危害奶牛业的常见疾病之一，通过对奶牛乳房炎危害、类型、病因、诊断、防治等方面的论述，为有效预防和治疗奶牛乳房炎提供了一定的参考依据,但是，奶牛乳房炎是一个世界性奶牛业问题，虽然治疗方法众多，但仍未有一种方法能够对乳房炎药到病除，治疗时仍需要综合考虑，同时注重预防，只有这样才能从根本上解决奶牛乳房炎，才能使奶牛业更好发展。参考文献：1 聂爱琴，郑明学，古少鹏，等奶牛乳房炎的病因分析J科技情报开发与经济，2003，13(3) ：1832 冯万宇， 史同瑞，许腊梅.奶牛乳房炎的诊断与稿制研究进展J黑龙江畜牧兽医,2008，(4)：79-803 张太翔， 田国华， 张金玲， 田国宁.浅谈奶牛乳房炎J中国畜禽种业2009，5(6)：95-964 高树新，许尚忠，李金泉. 奶牛乳房炎研究进展J中国草食动物，2004，24(5）：46-195 赵青山奶牛乳房炎的危害与防治J青海畜牧兽医杂志，2005，35(3)1536 阚远征奶牛乳房炎引发的经济损失J乳业科学与技术，2006，117(2)：937 杜彦奎奶牛乳房炎的类型及其防治措施J.疫病防治，2007(5)，308 王会珍奶牛乳房炎的危害及分类J山东省农业管理干部学院学报，2007，23(4)11529 寨鸿瑞，田甜，朱伟，王开功，周碧君，文明，奶牛乳房炎研究进展J 贵州农业科学2009，37(8) 10 林锋强，潘抗君，胡松华.奶牛乳房炎疫苗研究进展J.中国奶牛，2002 ，（1）11 储明星，石万海，邝霞，等.浅谈奶牛乳房炎J.中国奶牛，2001，（3）：39-4012 黄忍.奶牛乳房炎研究进展J.山东