创新课题结题报告书

项目类别项目批准号 华南农业大学大学生科技创新活动项目结题书项目名称： 小白鼠体内耐药大肠杆菌感染模型的建立及治疗药物筛选 申 请 人： 丘丽玲、冯秋芳、李媚 所在院部： 兽医学院 专业年级： 02级动物医学 联系电话： 87344095 指导教师: 曾振灵 职称 ： 教授 立项日期： 二五 年 四 月 十 日结题日期： 二六 年 四 月 一 日华南农业大学大学生科技创新活动项目指导中一、简表项目简况项目名称小白鼠体内耐药大肠杆菌感染模型的建立及治疗药物筛选项目类别A、文科类； B、理科类；申请经费1500元起止年月2005年4月至2006年4月项目组成员姓 名性别出生年月年级专业班级所在学院上学年综合测评分项目中的分工本人签字丘丽玲女1983.802动物医学4班兽医学院80.00致病性耐药大肠杆菌临床分离、鉴定、药敏试验床分离、鉴定、药敏试验李媚女1983.902动物医学1班兽医学院77.73体内耐药大肠杆菌疾病模型的建立冯秋芳女1984.702动物医学2班兽医学院82.04体内耐药大肠杆菌病的治疗药物筛选指导教师情况姓名曾振灵性别男学位博士职称教授、博导研究方向兽医药物动力学，兽药残留及新兽药或其制剂的临床评价研究等授课名称兽医药理学项目简介本研究拟自畜禽养殖场典型大肠杆菌病畜禽体内病变组织分离培养大肠杆菌，细菌培养、鉴定、血清型分类后，采用纸片法或试管二倍稀释法筛选出耐药大肠杆菌。确定耐药大肠杆菌在小白鼠体内的半数致死量，小白鼠肌肉或腹腔注射大肠杆菌，建立体内耐药大肠杆菌典型疾病模型。筛选小白鼠耐药大肠杆菌病的有效治疗药物，验证所筛选出的药物对鸡体内耐药性大肠杆菌感染的临床疗效。本研究对于提供临床畜禽大肠杆菌病的新的药物控制策略，减少该病在养殖生产中带来的经济损失，有着极为重要的理论意义与实际意义。同时，开展本研究对于其他细菌耐药株动物感染的防治也有重要的启发和借鉴意义。二、项目研究的内容与方法（一）研究基本内容：1、畜禽养殖场致病性耐药大肠杆菌临床分离、鉴定、药敏试验；2、小白鼠体内耐药大肠杆菌疾病模型的建立；3、小白鼠体内耐药大肠杆菌病的治疗药物筛选。（二）实施方案：1、自畜禽养殖场典型大肠杆菌病畜禽体内病变组织分离培养大肠杆菌，细菌培养、鉴定、血清型分类后，采用纸片法或试管二倍稀释法筛选出耐药大肠杆菌；2、确定耐药大肠杆菌在小白鼠体内的半数致死量，小白鼠肌肉或腹腔注射大肠杆菌，建立体内耐药大肠杆菌典型疾病模型；3、筛选小白鼠耐药大肠杆菌病的有效治疗药物，治疗药物筛选策略：抗菌药物+灭活酶抑制剂、抗菌药物+药物渗透促进剂、抗菌药物+外输泵抑制剂、抗菌药物+耐药质粒消除剂等。三、项目研究过程与资料查阅情况（一）项目研究过程1、在规模化养殖场采集典型大肠杆菌，培养、鉴定、血清型分类后，采用试管二倍稀释法筛选出耐药大肠杆菌；2、小白鼠腹腔注射大肠杆菌，建立体内耐药大肠杆菌典型疾病模型；3、筛选出小白鼠耐药大肠杆菌病的有效治疗药物：氨苄西林+舒巴坦、环丙沙星+磷酶素、恩诺沙星+利血平、庆大酶素+中草药复方蒲黄，对小白鼠进行治疗，观察疗效；4、实验室对药物进行MIC测定和联合药敏试验，跟体内试验进行对比。（二）资料查阅情况1、使用中国期刊网、数字图书馆、百度等网络资源搜索与研究项目相关的文章、论文20篇；2、从学校图书馆借阅了兽医药理学、兽医药理学实验指导、实验动物学、中兽医学等图书4本；3、从学院资料室查阅相关论文和报刊杂志10篇。四、项目成果完成形式和价值1、经过一年时间的试验，探索出了一套成熟的细菌培养、鉴定、血清型分离、二倍稀释筛选细菌和药物MIC测定以及联合药敏试验技术；2、小白鼠腹腔注射大肠杆菌成功建立体内耐药大肠杆菌典型疾病模型；3、小白鼠体内耐药大肠杆菌的有效药物治疗效果不理想，有待以后进一步研究和试验；4、通过实验室试验找出对临床耐药大肠杆菌感染有较好防治效果的药物或组方；5、培养了较高水平的本科毕业论文2篇。五、经费使用情况小白鼠（含鼠粮）：2100元总计：2100元其中：申请学校经费1500元；指导老师相关课题补助600元六、申请人对该项目研究工作完成后的认识总结项目开展过程中我们遇到了许多困难，但在指导老师的鼓励和大力支持下，我们还是完成了当初预定项目计划的大部分，取得了一定的成果，我们从采集的样品中培养、鉴定、血清型分离出典型的致病性大肠杆菌，成功建立了小白鼠体内大肠杆菌典型致病模型；通过实验室MIC测定和联合药敏试验找出对临床耐药大肠杆菌感染有较好防治效果的药物或组方。在过去一年的实验期间通过亲手的实验操作，我们学习和熟练掌握到了诸如小白鼠体内细菌疾病模型的建立、有效药物的筛选、药物MIC测定和联合药敏试验等平时较难接触到的和常用的实验技术，加深了我们对药物作用机制、效果的认识，提高了我们的实验操作技术和水平。同时，整个的试验过程也使我们深刻地体会到科研项目研究的曲折艰辛和复杂，令我们深刻感受到了科学研究一丝不苟的精神。现在我们的项目研究初有成果，学校创新课题已经告一段落，我们要衷心感谢给予我们这次