L05062阮秋鸣

项目类别项目批准号BL05062附件3 华南农业大学大学生科技创新活动项目结题书项目名称： 铝敏感水稻突变体的筛选 申 请 人： 阮秋鸣 王小奇 所在院部： 生命科学学院 专业年级： 02生物技术 联系电话：指导教师: 钱春梅 职称 副教授 立项日期： 二五 年 四 月 十五 日 结题日期： 二六 年 四 月 五 日华南农业大学大学生科技创新活动项目指导中心 填 表 说 明 一、 填写结题报告书前，请先咨询指导教师或有关专业教师。申请书的各项内容要求实事求是，逐条认真填写。表达明确、严谨，一律要求用打印稿件。 二 、申请书为A4复印纸，于左侧装订成册。一式三份（至少一份原件），由指导教师和所在院（部）审查并签署意见后报大学生科技创新活动项目指导中心。三 、一级标题三号宋体加粗，用“一、二、三”标示；二级标题四号楷体加粗，用“（一）（二）（三）”标示；三级标题四号仿宋加粗，用“1、2、3”标示；四级标题四号仿宋，用“”标示。示例：一、XXXX课题立项与研究的目的意义（一）XXXX课题立项与研究的目的的意义1、XXXX课题立项与研究的目的意义XXXX课题立项与研究的目的意义四、如表格不够，可以加附页。一、简表项目简况项目名称铝敏感的水稻突变体的筛选项目类别A、文科类； B、理科类；申请经费1500元起止年月2005.4-2006.4项目组成员姓 名性别出生年月年级专业班级所在学院上学年综合测评分项目中的分工本人签字阮秋鸣女1983.0802生物技术（1）班生命科学学院75.49诱变处理、筛选王小奇男1982.0302生物技术（2）班生命科学学院70.5诱变处理、筛选指导教师情况姓名钱春梅性别女学位硕士职称副教授研究方向植物逆境生理与分子生物学授课名称植物生理学、高级植物生理学、植物生理专题、果蔬保鲜原理项目简介在酸性土壤中，铝是限制作物生长的一个主要胁迫因子。全球有39.5亿hm2酸性土壤，占可耕土地面积的50。与黑麦、小麦、大麦等相比，水稻是比较耐铝的作物，但其耐性机理至今仍不完全清楚.长期以来，国内学者对植物铝毒害作了许多的研究，结果表明，选择和培育耐铝性较强的植物基因型是缓解铝毒害的最佳方式之一。通过铝敏感/耐铝突变体进行植物的耐铝机理的研究，是获得耐铝基因的有效途径。本项目拟通过物理诱变和化学诱变方法处理耐铝水稻品种湘早糯1号，希望筛选到铝敏感的突变体，为在同一遗传背景下，进行水稻耐铝机理的分子研究提供材料。二、项目研究的内容与方法研究的基本内容：1、经60Co-射线处理筛选铝敏感水稻突变体；2、经EMS处理筛选铝敏感水稻突变体。研究材料：水稻，耐铝品种湘早糯1号（ Xu H S.等，Journal of Plant Nutrition, 2004, 27:1601-160）。研究方法： 1、水稻种子的诱变处理（M0代）：（1）用EMS诱变水稻种子：参照王永胜（作物学报，2002，28：235-239），取约2000粒种子用浓度为0.05mol/L的 PBS缓冲液(pH7.0)浸泡种子5小时，再用0.5%的EMS浸泡不同时间进行诱变，诱变的温度为室温，溶液的酸碱度（pH）为7.5。（2）用60Co-射线诱变水稻种子：各取2000粒种子，分别以20，25，30krad的60Co射线处理水稻种子，剂量率为25R/min。2、M1代盆栽实验将EMS以及60Co-射线诱变后的种子浸种萌发后选取与对照生长情况相近的幼苗进行盆栽，收获种子（M1代）。3、突变体的筛选：将收获的M1代种子浸种2天，在用0.5mmol/L的CaCl2溶液（pH4.5）湿润的滤纸上萌发3天，选取生长与对照一致的水稻幼苗在进行铝处理，处理方法为：在0.5mmol/L的CaCl2溶液（pH4.5）中生长一天，将伸长率与对照差异显著的种子去掉，再在0.5mmol/L的CaCl2溶液（pH4.5）中加入10mol/LAlCl3,生长一天后，筛选伸长量为对照伸长量50的幼苗，将初筛幼苗进行盆栽，收获种子（M2代）,再将种子进行复筛。 三、项目研究过程与资料查阅情况项目研究过程：1. 根据根生长指标确定处理所用的处理剂量是否合适；（已完成）2. 选取适宜的60Co射线处理剂量进行水稻种子的诱变处理（M0代）；并进行盆栽，收获种子（M1代）（已完成）3. 对经60Co射线处理收获的M1代进行筛选，筛选出铝敏感的突变体，并进行盆栽以便进行进一步的确认（正在进行）4. 选取适宜的EMS处理剂量进行水稻种子的诱变处理（M0代）；并进行盆栽，收获种子（M1代）（正在进行）资料查阅情况：华南农业大学图书馆提供的各大科技文献数据库的链接。以“铝毒”、“耐铝”、“突变体”、“60Co射线”、“EMS”为关键词，检索相关文献。四、项目成果完成形式和价值项目完成形式：研究结果将实物提供，需再经两年的筛选实验，根据性状分离比例，最终确认单隐性突变体。项目成果价值：1. 用0.5%EMS处理种子12h以上后，种子的萌发率和幼苗的生长长度均受到抑制，说明处理时间过长。2. 用25krad 60Co射线处理先浸种5小时的水稻湿种子，以及30krad的射线处理水稻干种子后，种子的萌发率和幼苗的生长长度均受到抑制，说明处理剂量过高。 3.用60Co射线处理得到的M1代种子进行突变体的筛选：剂量为25krad和 20krad60Co射线处理湘早糯1号干种子，盆栽，收获种子（M1代）。并对M1代种子进行铝敏感突变体的筛选。将初筛幼苗进行盆栽，收获种子（M2代）,可再将种子进行复筛。 4. 适宜剂量EMS处理得到M1代并进行突变体的筛选：用浓度为0.05mol/L的 PBS缓冲液(pH7.0)浸泡种子5小时，再用0.5%的EMS浸泡8h，诱变的温度为室温，溶液的酸碱度（pH）为7.5。盆栽，收获种子（M1代）。并对M1代种子进行铝敏感突变体的筛选。 五、经费使用情况六、申请人对该项目研究工作完成后的认识总结经过一年的研究工作，加深了对本项目的认识；在一系列的实验中，能逐步解决遇到的各种问题，锻炼了动手能力；通过文献的查阅和阅读，提高了文献检索能力、阅读英文文献和科技论文撰写能力；培养了认真仔细和勤奋踏实的工作作风。七、指导教师对项目完成情况的意见阮秋鸣、王小奇同学，工作勤奋踏实。动手能力强。在老师的指导下能顺利开展工作，自己查资料，摸索方法条件，并能对项目的设计和结果的分析提出自己的看法。本项目通过60Co-射线和EMS诱变处理耐铝水稻品种湘糯1号，已筛选到经60Co-射线诱变得到的（M1代）种子，从中筛选出铝敏感的材料正在进行M2代的培养；EMS诱变处理M0代