索灵高血压产品及TPA介绍（PPT53页).ppt

,索灵肾素醛固酮介绍,鉴微知著，精准降压,索灵诊断科学事务部鲍雯妍,索灵：源自意大利的免疫诊断专家,欧洲品质，服务全球,意大利总部,生产基地6,世界各地分公司27,研发中心5,员工1,620,独立分销商80,各国集团业务60,历史：专注免疫诊断五十年,匠人精神，不断研发优质、独特的产品以满足客户需求,1968,索灵作为SorinBiomedicaS.p.A的分部创立专注RIA产品,2000,管理层收购，独立为DiaSorinS.p.A,2000-2007,意大利证券交易所上市开始从ELISA转换至CLIA技术,收购Biotrin，加强IVD市场”专家”地位收购Murex产品线，进入血站市场,2008,2010,推出全新的LiaisonXL检测仪器,国内高血压防控现状,高血压沉默的杀手,继发性高血压可治愈的高血压10%-15%3000万,*数据来源：中国居民营养与慢性病状况报告（2015）,*2010中国高血压防治指南*2017AHA/ACC高血压指南*2017美国内分泌协会关于内分泌高血压筛查的声明,可治愈的高血压：原发性醛固酮增多症,JeromeWConn（1907-1981）,原发性醛固酮增多症（PrimaryAldosteronism，PA）：肾上腺皮质增生或肿瘤分泌过多醛固酮，而引起潴钠排钾、血容量增多,导致血压上升，同时肾素活性被抑制的一种病症特征：高血压、伴随或不伴随低血钾、醛固酮、肾素,1955年JeromeWConn首次报道原醛症：34女性，严重高血压伴低血钾、碱中毒，手术后标本示右侧肾上腺4cm腺瘤，术后血钾正常。,原发性醛固酮增多症：患病率,难治性高血压中20%,*Hypertension,2003,42(2):161-165*Hypertension,2007,50(3):447-453.,高血压,难治性高血压,高血压人群中原醛的患病率不容忽视,原发性醛固酮增多症：危害,*ArchEndocrinolMetab.2017;61(3):305-12.,醛固酮分泌过多可造成的心血管、肾功能损害、胰岛素抵抗（独立于高血压以外的作用）低血钾损害：神经肌肉功能障碍（肌无力和麻痹）、失钾性肾病及肾盂肾炎、心率失常、心肌肥厚,原发性醛固酮增多症：诊疗,2008年美国内分泌学原醛诊疗指南,2016国内原醛诊疗专家共识,2016版美国内分泌协会新原发性醛固酮增多症诊疗指南,原发性醛固酮增多症：筛查人群,持续性血压高于150/100mmHg；难治性高血压；高血压合并自发性或利尿剂所致低钾血症高血压合并肾上腺意外瘤；高血压合并阻塞性呼吸睡眠暂停；早发性高血压家族史；早发脑血管意外家族史的高血压（小于40岁）一级亲属中有原醛的高血压患者,哪些高血压病人应该筛查原醛症？,原发性醛固酮增多症：筛查人群,所有初诊高血压患者都筛查原醛,哪些高血压病人应该筛查原醛症？,原发性醛固酮增多症：筛查指标,低肾素,肾上腺CT,高醛固酮,立位ARR,低血钾,灵敏度差：1cm腺瘤易忽视特异性差：无功能瘤的误判,特异性低：肾素随年龄增加而降低,灵敏度低：仅9%-37%的原醛患者存在低血钾,敏感性低：27%原醛患者血清醛固酮低于15ng/dl（正常中值）,首选指标立位血清醛固酮与血浆肾素比值灵敏度与特异性最佳选择,Perscheletal.ClinChem.2004,单独用醛固酮或肾素：重叠,ARR：分开,(健康人群vs.PA患者),原发性醛固酮增多症：筛查指标,原发性醛固酮增多症：筛查指标,MulateroPetal.,JClinEndocrinolMetab.2004,ARR切点值,2016年3月中华内分泌杂志-原发性醛固酮增多症诊疗共识,原发性醛固酮增多症：确诊试验,抑制试验，观察醛固酮分泌是否受抑制,原发性醛固酮增多症：分型诊断,不同亚型，不同治疗方案分型方法：肾上腺CT初步肾上腺静脉采血金标准比较两侧醛固酮分泌,原发性醛固酮增多症：治疗,如何检测肾素与醛固酮？,鉴微知著，精准降压,总肾素,肾素前体（Prorenin）,活性肾素（Renin）,无酶活活性部位被多肽片段覆盖,有酶活该分子来源于肾素前体切去部分肽段释放活性部位,肾素检测的挑战,肾素检测：技术发展,肾素Renin,肾素活性ReninActivity，PRA,直接肾素浓度DirectRenin,通过检测一定条件下肾素的作用产物血管紧张素I的浓度变化，来间接反应体内的肾素活性放射免疫检测,通过特异性抗体，直接检测体内的肾素的浓度放射免疫检测,化学发光免疫检测,内在的,产生的,肝脏,肾素前体,肾素,肾脏,血管紧张素原,血管紧张素I（AgI）,血管紧张素II（AgII）,PRA=AgI(RIA1)-AgI(RIA2)(单位：ng/mL/h),2次,4C,AgI,37C,PRA,1hr,1hr,pH5.7,RIA1,RIA2,抑制剂,肾素检测：传统血浆肾素活性检测(PRA),肾素检测：直接肾素浓度(DRC),夹心法（三明治法）,特异性的单克隆抗体识别肾素分子的特定表位单位:U/mL或mU/L,主要问题：间接检测，干扰因素多（底物、时间、pH）、准确度和精密度不佳；室间难以比对操作复杂：两管血、前处理繁琐（抑制剂、温度)、自动化程度低放免检测:存在放射污染实验时间长:国产16-24小时,肾素的测定血浆肾素活性(PRA),血浆肾素活性(PlasmaReninActivity)酶活性测定法通过放免测定由血管紧张素原分解产生的血管紧张素I间接得到单位常用ng/mL/h，提示血管紧张素I的转换水平,是间接肾素酶活性,主要优势：直接检测，减少干扰、提高准确度与精密度；国际溯源操作简单：一管血，与醛固酮同时检测，样本前处理简便,自动化程度高化学发光检测:无放射污染快速检测:首次结果时间仅需40分钟,血浆肾素浓度(PlasmaReninConcentration)使用单克隆抗体识别肾素分子的特定表位直接定量检测血浆肾素,使用PRC得出的ARR可以明显区分患者和正常人群单位U/mL(mU/L)有国际单位（WHO68/356），是直接提示肾素浓度,肾素的测定直接肾素浓度(PRC),*2008版美国内分泌协会原发性醛固酮增多症诊疗指南推荐使用索灵诊断LIAISON直接肾素检测方法,肾素检测：指南建议,1步三明治法30孵育,Liasion直接肾素检测试剂盒,(*)校准品和质控品均为冻干粉,LIAISON直接肾素检测试剂盒采用化学发光免疫法(CLIA)，在体外定量测定EDTA血浆样本中的肾素含量，辅助高血压诊疗,仅EDTA血浆在室温下收集和处理血液，无需使用预冻存管如果暂时不处理，即刻冻存在-20C记录采集的时间和姿势（卧位、立位）注意：避免反复冻融，冷激活（肾素原肾素）增加样品中肾素含量,样品收集处理,醛固酮检测：技术发展,50年代开始，已淘汰,80年代开始，逐步淘汰,2008年开发金标准，价格昂贵，技术难度高,2012年推出方便快捷，检测效果佳,*2012年底意大利索灵诊断公司在全球率先推出全自动化学发光平台上检测的LIAISON醛固酮试剂盒；目前唯一通过CFDA认证进口化学发光平台用于醛固酮检测,醛固酮检测的挑战,醛固酮免疫检测，特别是化学发光方法学的开发挑战重重：醛固酮在血液循环中浓度很低，仅有pM级（卧位范围仅有100-400pM）相较放免或其他方法如LC-MS，化学发光的样本量通常较小（100ul,其他方法学可能可以有200或者500-1000ul）与放免方法相比，孵育时间必须缩短（放免可以过夜孵育，而化学发光需要限制到40分钟）,用于醛固酮的定量检测（竞争法，单克隆抗体）丰富的样本类型：血清EDTA血浆尿液（目前唯一提供尿液CLIA检测产品）快速检测：首次结果时间-55分钟产品性能：检测范围：0.97-100ng/dL机上稳定性:6周批内CV：5%批间CV：10%优异的灵敏度,产品方案：LIAISON醛固酮检测产品,*建议各实验室根据不同人群建立自己的参考值范围,LIAISON醛固酮-参考范围,CLSIguidelineC28-A3(2008),LIAISON醛固酮-参考范围,LIAISON肾素醛固酮检测,小选择，大不同,部分用户,中国人民解放军总医院（301医院）内分泌科北京阜外心血管医院检验科武汉同济医院检验科上海瑞金医院内分泌研究所(评估中)重庆医科大学附属第一医院内分泌科浙江邵逸夫医院检验科北京海军总医院检验科北京航天总医院检验科北京武警总院检验科北京同仁医院检验科山东齐鲁医院内分泌科大连医科大学附属第一医院核医学科重庆儿童医院核医学科湖南省人民医院核医学科,阜外医院高血压科蔡军教授,重庆附一内分泌李启富教授,索灵肿瘤标志物TPA介绍,*2015年中国肿瘤登记年报,中国肿瘤病情,肿瘤已成常见疾病年新发癌症病例数约310万例年癌症死亡人数约200万例按照平均寿命74岁计算，人一生中患恶性肿瘤的几率是22%常见恶性肿瘤肺癌、女性乳腺癌、胃癌，肝癌、食管癌、结直肠癌、宫颈癌,肺癌居恶性肿瘤（俗称癌症）发病率第一位，乳腺癌居女性发病率第一位,40岁以后重视肿瘤的健康体检,37,肿瘤发病原因,多种综合因素共同导致肿瘤1.遗传因素2.化学污染(烟，酒，化学物质等)3.生物因素（病毒，霉菌等）4.放射污染(紫外线，核辐射等)约5-10%肿瘤与遗传有关(如肠癌、乳腺癌、卵巢癌等)早期症状不典型,5年生存率:早期发现对生存率的影响,乳腺癌,前列腺癌,直肠结肠癌,卵巢癌,90%,92%,93%,65%,100%,73%,79%,40%,100%,56%,51%,20%,32%,8%,18%,100%,睾丸癌,95%,95%,70%,N/A,胰腺癌,40%,20%,8%,2%,Sources:/medlineplus/ency/article/000913.htm,/docroot/CRI/content/CRI_2_4_1X_What_are_the_key_statistics_for_prostate_cancer_36.asp/mediacentre/factsheets/fs297/en/,肿瘤,I期,II期,III期,IV期,血清肿瘤标志物的特性,理想的肿瘤标志物：灵敏度100%；特异性100%；器官特异性；与肿瘤的大小或分期有关；与预后有关；监测肿瘤的复发,39,常见的血清肿瘤标志物,40,单一的肿瘤标志物难以准确反映肿瘤的复杂性，通常采用联合检测和动态监测以提高肿瘤标志物诊断的临床价值。,索灵肿瘤标志物丰富的菜单,41,涵盖几乎所有常见癌症类型能够满足临床实验室联合诊断的需求,组织多肽抗原(TPA),TPA=TissuePolypeptideAntigen是1957年由Bjorklund从各种肿瘤组织中分离出来的一种不含糖和脂的蛋白质,为单链多肽,相对分子质量1700045000。TPA是与角蛋白8、18和19相关的多肽类物质，在上皮性肿瘤中表达增加，由增殖细胞产生和释放，因此，TPA的水平直接反映了细胞增殖、分化率和肿瘤的浸润程度，是肿瘤增值性标志。3种最常见的角蛋白标志物（CKMarker）:,TPA:CK8/CK18/CK19TPS:CK8/CK18CYFRA21-1:CK19,CK19是肺癌的主要形式CK18是乳腺癌的主要形式,42,1.ShimojoK,et.KakuIgaku.1996Jun;33(6):655-661.2.TakahashiH,et.1990Feb;48Suppl:928-930.,TPA在非小细胞肺癌(NSCLC)中阳性率较高TPA与肺癌病程进展有关，随着肺癌恶性程度增加，TPA阳性率增大,TPA可作为非小细胞肺癌的首选标志物,43,95%Specificity,NihoS,ShinkaiT.Tumormarkersinlungcancer.GanToKagakuRyoho.2001Dec;28(13):2089-2093.,TPA可作为非小细胞肺癌的首选标志物,“我们强烈推荐用角蛋白标志物评估每一个非小细胞癌患者。选择使用TPA还是CYFRA则基于非临床因素”Buccheri,美国胸科杂志2003,CorrealMetal.IntJBiolMarkers1994;9:231-238.MizushimaYetal.Oncology1990;47:43-48.BuccheriGetal.Chest2003;124:622-632.,44,肺癌推荐检测菜单,肺癌是最常见，死亡率最高的癌症，5年存活率为13%，通常诊断为晚期组织类型主要分为NSCLC:非小细胞肺癌（80%）3个亚型：腺癌，鳞状细胞癌，大细胞肺癌SCLC:小细胞肺癌（20%）有浸润性，快速生长，易转移,肺癌推荐检测菜单：CEA,TPA,NSECEA,TPA,NSE,CA19-9，CA125,组织多肽抗原TPA与乳腺癌,1.TPA在原发乳腺癌诊断灵敏度比CEA,CA153高TPA:75.9%;CA153：58.6%;CEA:31%2.TPA是早期乳腺癌转移的诊断标志物,BiomedResInt.2015;2015:986024.Br.J.Cancer(1991),64,154-158,乳腺癌推荐标志物组合：TPA+CA15-3+CEA,47,Serumtissuepolypeptideantigen(TPA)andprostaticacidphosphatase(PAP)inpatientswithprostaticcancer.MarczyskaA,KulpaJ,LekoJ,AugustynM.IntUrolNephrol.1988;20(2):123-9.,Serumtissuepolypeptideantigen(TPA):monoclonalorpolyclonalradio-immunometricassayforthefollow-upofbladdercancer.BenninkR,VanPoppelH,BillenJ,DecosterM,BaertL,MortelmansL,BlanckaertN.AnticancerRes.1999Jul-Aug;19(4A):2609-13.,TPA在肿瘤中的广泛应用,Pubmed超过1200篇文献,KeyWords:TissuePolypeptideAntigentumor+Tumor,Evaluationofseventumormarkers(CA50,CA19-9,CA19-9TruQuant,CA72-4,CA195,carcinoembryonicantigen,andtissuepolypeptideantigen)inthepretreatmentseraofpatientswithgastriccarcinoma.WobbesT,ThomasCM,SegersMF,NagengastFM.Cancer.1992Apr15;69(8):2036-41.,ApplicationoftumormarkersSCC-Ag,CEA,andTPAinpatientswithcervicalprecancerouslesions.FarzanehF,ShahghassempourS,NoshineB,ArabM,YaseriM,RafizadehM,AlizadehK.AsianPacJCancerPrev.2014;15(9):3911-4.,Clinicalvalueofserumneo