DAKO产品简介-.ppt

,DAKO产品简介,DAKO产品结构pharmacoDiagnosticsTMImmumocytochemestryMolecularPathologyFlowCytometryClinicalImmunochemistryMicrobiology,pharmacoDiagnosticsTMDakoHercepTestTM,MolecularPathologyPNAProbesandPNAISHDetection(主要有检测EBV，Kappa，Lambda,Telomere的荧光标记探针）DNAProbesandDNAISHDetection(主要为检测HPV）,MolecularPathologyBandTCellGeneRearrangementProbesforSoutherBlottingandChemiluminescentSystemforNucleicacidBlotting原理：用荧光标记探针做Southern或Northern杂交，再用标记AP的抗荧光的抗体去检测，由于AP能水解底物dioxtane-phosphate,在探针处发出化学光并被胶片所捕捉，通过CCD照相系统显影特点：无放射性较P32方法暴光时间短使用标准胶片,ISHCatalyzedSignalAmplification(CSA)SystemDAKOGenePointTMforBiotinylatedNucleicAcidProbes原理:Step1:Step2:Step3:Step4:Step5:biotinylatedperoxidase-biotinyldepositionapplicationprobeconjugatedtyramideofbiotinylofDABstreptavidintyramideSeep,FlowCytometryClinicalImmunochemistryMicrobiology,ImmumocytochemestryAutomatedStainingSystemsPrimaryAntibodiesVisualizationSystemsAccessory,AutomatedStainingSystemsDakoAutostainer全自动免疫组化染色仪特点：一次完成48张切片试剂开放可同时使用不同的显色系统结果可靠，重复性好软件界面易学易用无需特殊消耗品特点法网,PrimaryAntibodies,VisualizationSystems发展史,Directmethod60年代特点:特异性高，简便快捷缺点：敏感性差，需标记每一个一抗，对于荧光标记抗体：需荧光显微镜，价昂，暗视野对比差，且需新鲜组织不能作回顾性研究。,FITC,Enzyme,Indirectmethod70年代特点:不需标记每一个一抗缺点：敏感性差,Enzyme,PAP,ABC(LSAB),80年代,PAP法:敏感性提高，可用于石蜡切片,ABC法:敏感性较PAP法提高20-40倍LSAB法:,90年代,j,多聚物系统:1mol多聚物骨架10mol二抗70molHRP特点:二步法，简便快捷敏感性增强、背景着色低特异性增强提高一抗稀释度,DAKOARKTM(AnimalResearchKit)单克隆抗体用于小鼠组织降低背景试剂盒原理:Step1:PrimaryAbbiotinylatedPrimary-SecondaryFabfragmentcomplex特点法网+AApplytotissueNormalmouseserumm,如何获得一张成功的免疫组化染色切片三大要素：组织固定抗原修复敏感的检测系统组织固定：目的：保存抗原固定液：10%中性福尔马林固定时间：4-6小时以上不超过48小时特点法网,抗原修复目的：方式：微波高压锅水浴酶消化注意：修复液PH值特点法网,EnvisionSystem操作步骤1、切片脱蜡至水洗2、抗原修复（根据一抗说明而定）抗原修复操作步骤见DAKO中文目录第72页。抗原修复液用枸橼酸缓冲液、PH6.0，编号为GT1002。对于一些核表达的抗体，如：CD3、CD5、ER、PR、AR、bcl-2等，建议用高PH的抗原修复液，编号为S3308。,3、蒸馏水漂洗，置于PBS中。4、阻断内源性过氧化物酶（仅用于Envition标记HRP的试剂）。用3%过氧化氢避光孵育20分钟。5、蒸馏水漂洗，置于PBS中。6、一抗孵育。、注意：孵育时间长短可自行调整，且与孵育温度有关，温度高，时间短，温度低，时间长。如：4冰箱孵育需过夜，37孵育2小时。,7、PBS漂洗5分钟2次。8、Envision/HRP37孵育45-60分钟。9、PBS漂洗5分钟2次。10、DAB显色、镜下控制时间。DAB配制方法：DAKODAB编号GK346810。1ml稀释液加20ulDAB浓缩液注意:无需再加3%过氧化氢,稀释液中已经加有3%过氧化氢。,11、蒸馏水漂洗12、复染及封片,DAKO市场,成都分区主要竞争对手比较特点法网,推广方式比较迈新：定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新方法。每年举办病理科主任联系会；倾力赞助各种病理相关会议；免费技术培训等。客户投诉：无条件更换。中山：定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新方法。赠送病理杂志；代卖各种病理书籍；选择性赞助病理相关会议。客户投诉：无条件更换。,Promotion加大推广力度,树立公司良好形象保证库存品种齐全,加快到货时间举办workshop,关于RTU的市场分析目标客户：部分大医院病理科地市级等中小型医院病理科少部分研究生及研究单位,关于RTU的市场分析技术情况：专业知识薄弱设备简陋不懂英文,关于RTU的市场分析用量：外检量：2000-6000例/年免疫组化用量：4000-10000元（RMB）/年市场占有量约40%,关于RTU的市场分析Promotion:举办workshop定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新