洗脱剂水性溶剂甲醇.ppt

TraditionalChineseMedicalChemistry,中药化学,第六章黄酮类化合物(flavonoids),内容,理化性质*,提取分离*,结构与分类,检识结构研究中药实例,取代类型分类*,酸性*碱性,物理性质化学性质显色反应*,提取、粗精制分离*,薄层层析HPLC,概述,基本结构生物活性分布生物合成,概述,基本结构,泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。,色原酮(chromone)(苯-吡喃酮),2-苯基色原酮(2-phenyl-chromone),对心血管系统的作用抗肝脏毒作用抗炎作用雌性激素样作用抗菌及抗病毒作用泻下作用解痉作用,生物活性,分布,集中分布于被子植物中，如：唇形科、玄参科、爵麻科、苦苣苔科、菊科蔷薇科、芸香科、豆科、杜鹃花科、姜科；裸子植物，如；松柏纲、银杏纲和凤尾纲苷存在于花、叶、果等组织中苷元存在于木部坚硬组织中,概述,黄酮类化合物生物合成途径,苷元取代基,取代类型,苷类,糖的类型,苷的类型,依据所连糖的类型分为,依据糖的连接位置分为,单糖苷、双糖苷、三糖苷,单糖链苷、双糖链苷,双糖苷、双糖链苷,单糖：葡萄糖glc,半乳糖gal,木糖xyl,鼠李糖rha,葡萄糖醛酸gluA,三糖：龙胆三糖,双糖：芸香糖,龙胆二糖,结构与分类,分类*,三碳链氧化程度,黄酮、二氢黄酮黄酮醇、二氢黄酮醇黄烷类花色素,B环位置,异黄酮、二氢异黄酮高异黄酮双苯吡酮类,三碳链是否成环,查耳酮、二氢查耳酮橙酮,其它：双黄酮、木脂素型黄酮、生物碱型黄酮,依据类型,黄酮(flavones)、二氢黄酮(flavanones),黄酮,二氢黄酮,木犀草素(Luteolin)5,7,3,4-四羟基黄酮,芹菜素(Apigenin)5,7,4-三羟基黄酮,黄酮(flavones)、二氢黄酮(flavanones),黄芩苷(baicalin),R=H橙皮素hesperitinR=芸香糖基橙皮苷,黄酮、二氢黄酮,R=H橙皮素R=芸香糖基橙皮苷,OLAY玉兰油美白橙皮苷,橙皮苷可以快速渗透到肌肤底层，抑制酪氨酸酶活性，有效抑制黑色素的生成，达到出色的美白效果。橙皮苷作用在皮肤上时，能明显促进血液循环。橙皮苷与维他命成分联合作用，更能促进肌肤自我更新，新生后的肌肤呈现出晶莹的通透质感。原蛋白是肌肤的强力后盾，能储存大量的水分，被美容专家誉为“肌肤天然储水槽”，起到对皮肤天然含水量的自我调节作用。橙皮苷可抑制脂质氧化物的形成，同时对自由基也有明显的清除作用。维护着胶原蛋白的活力，肌肤即现丰盈水润。,食品中有较强的抗氧化保鲜作用与柠檬酸合用，效果更佳，,新橙皮苷,杜鹃素farrerol,黄酮(flavones)、二氢黄酮(flavanones),甘草苷(liquiritin)7-羟基二氢黄酮-4-O-葡萄糖苷,甘草素(liquiritinenin)7,4-二羟基二氢黄酮,杜鹃素farrerol,黄酮、二氢黄酮,叶入药，止咳祛痰,平哮喘作用。主治急慢性支气管炎。,甘草苷(liquiritin)7-羟基二氢黄酮-4-O-葡萄糖苷,甘草素(liquiritinenin)7,4-二羟基二氢黄酮,黄酮、二氢黄酮,甘草粉养血活血生肌润肤止痛,黄酮醇(3-羟基黄酮)(flavonols)、二氢黄酮醇(flavanonols),黄酮醇,二氢黄酮醇,黄柏素-7-O-葡萄糖苷(Phellamarin),槲皮素(quecetin)5,7,3,4-四羟基黄酮醇,芦丁(rutin)5,7,3,4-四羟基黄酮醇-3-O-芸香糖苷,黄酮醇(3-羟基黄酮)(flavonols)、二氢黄酮醇(flavanonols),又称维生素P,具有扩张心脑血管之功效，夏天饮槐米茶能防暑、解毒、杀菌等,食品中有较强的抗氧化保鲜作用,在6070下用浓盐酸调pH5，搅匀，静置，抽滤，水洗至洗液呈中性，60干燥。,热水或乙醇重结晶,芦丁的工业生产提取方法如下槐米粉末,加约6倍量水及硼砂适量，煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH89。在保持该pH条件下，微沸2030分钟，随时补充失去的水份，趁热抽滤，药渣加4倍量水，同法再提2次。合并提取液,芦丁粗品,芦丁,芦丁(rutin)5,7,3,4-四羟基黄酮醇-3-O-芸香糖苷,提取液,黄烷类(flavanes),黄烷-3-醇类(flavan-3-ols),黄烷-3,4-二醇类(flavan-3,4-diols),儿茶素,很强的抗氧化功能，饮用绿茶，防晒效果会跟涂抹绿茶护肤品的效果相同。,活肤去角质,可以通过阻断白血病细胞赖以生存的通讯信号来杀死白血病细胞,花色素(花青素、植物色素)(离子型)(anthocyanidins)(补充),花色苷：苷元(3或5或3,5)-糖经酸水解生成苷元和糖,花色素颜色变化,花色素,含花青苷的食用色素有:杜鹃花科越桔红色素，锦葵科玫瑰茄红色素，葡萄科葡萄皮色素，忍冬科蓝锭果红色素，蔷薇科火棘红色素，唇形科紫苏色素；,原花色素,沙棘,原花色素可以降低胆固醇、甘油三酯，抗心肌缺血再灌注损伤而抗动脉粥样硬化，降血压，抗氧化，抗癌，抗衰老，免疫调节作用。,葡萄籽提取物口服可减少女性黄褐斑患者的素色沉着,沙棘总黄酮开发的心达康片(5mg/片)是治疗心绞痛、预防动脉粥样硬化、心肌梗塞、脑血栓的理想天然药物，对治疗心绞痛的总有效率达97.1%。,异黄酮(isoflavones)、二氢异黄酮(isoflavanones),异黄酮,二氢异黄酮,大豆素(daidzein),具有一定的雌激素活性，可以和内源性雌激素受体（ER）结合，而表现出类似雌激素样的作用，如：缓解妇女更年期综合征、心血管疾病的防护、抗肿瘤等,野葛：攀援状灌木；幼枝被锈色柔毛。掌状3小叶；花黄绿色；核果分布四川、云南、贵州、湖南、湖北和台湾。生于海拔(630-)1600一2200米的林下。,葛根无毒、无害，无副作用，卫生部把葛根列为药食两用山地植物，葛根富含人体必需的氨基酸13种；葛根的有效活性成分有异黄酮、葛根素、葛根苷、生物碱等物质，铁、锌、钙、硒、锗等微量元素丰富。,葛根素,本草纲目等都称其葛花具有“解酒醒脾”，“护肝、养胃、补肾”之功能,葛根据本草纲目、中药大辞典、功能性食品等权威资料著述，葛根及其制品有清火、排毒、降血脂、降血压、降胆固醇、降血糖、减肥、通便、预防老年性痴呆，防止动脉硬化，防止脑血栓等心脑血管疾病之良效。现代医学研究，葛根黄酮具有防癌抗癌和雌激素样作用，可促进女性丰胸、养颜，尤其对中年妇女和绝经期妇女养颜保健作用明显。葛根的药用价值极高，素有“亚洲人参”之美誉，葛粉称之为“长寿粉”，在日本被誉为“皇室特供食品”。常食葛粉能调节人体机能，增强体质，提高机体抗病能力，抗衰延年，永葆青春活力。,高异黄酮(homoisoflavones),双苯吡酮类(xanthones),高异黄酮,双苯吡酮,异芒果素(isomengriferin),降血糖，止咳祛痰,查耳酮(chalcones)、二氢查耳酮(dihydrochalcones),二氢查耳酮,新橙皮苷二氢查尔酮，其甜度为蔗糖的950倍,甜味剂,以查儿酮苷为主的食用色素有有来自菊科的红花黄色素，菊花黄色素,查耳酮(chalcones)、二氢查耳酮(dihydrochalcones),红花颜色变化,活血通径、散瘀止痛。用于经闭、痛经、恶露不行、症瘕痞块、跌打损伤。果实称白平子，含“红花子”油，油能降胆甾醇和高血脂；软化和扩张血管，防衰老，调节内分泌。,黄波斯菊,其它：双黄酮、木脂素型黄酮、生物碱型黄酮,木脂素型黄酮水飞蓟宾(silybin),水飞蓟素:菊科植物水飞蓟Silybummarianum(L.)的种子中提取的一种由水飞蓟宾，异水飞蓟宾，水飞蓟亭，水飞蓟宁等组成的黄酮化合物。水飞蓟素有明显的保护和稳定肝细胞的作用，用于治疗急慢性肝炎，肝硬化，肝中毒等病，同时对肝炎患者的症状及肝功能均有明显的改善。抗肝炎药“益肝宁”、“利肝隆”及国外产品“silimarit”的主要有效成分,银杏俗称白果树、公孙树或鸭掌子树，经第四纪冰川期后仅存于中国，为我国重要特产果树之一。银杏树的综合利用价值很大。其食用部分为种仁，营养丰富，香糯可口，是高级滋补品和高级菜肴的良好配料，并具一定的药用价值，有化痰、止咳、补肺、通经、止浊、利尿和杀菌等功效。银杏树是重要的风景树木和四旁绿化的优良树种。银杏木材材质细软富弹性，不易变形，为精细工艺品及贵重家具用材。叶片能提制冠心酮新药，治疗心血管系统的疾病，为出口物资（在近落叶前采收）；即使落叶，也可供缝制药枕用。核外肉质种皮可供提炼栲胶，捣烂加水可制止农药，有杀虫作用。银杏是生长缓慢、结种迟、寿命长的落叶果树，雌雄异株，银杏常需1520年才开始给实，3035年后方进入盛果期，盛果年限则可延至百年以上。嫁接树和分株树在第710年可以开花结实。充分成熟的银杏，色泽由绿转黄，上覆白粉。此时可用竹竿敲落，或用乙烯利喷布树冠，催落种实。种实的肉质状外层是银杏种子的外种皮，其浆汁有异臭和腐蚀性，捡取时避免直接接触皮肤，以免中毒起泡。落下的种实置阴凉处堆捂，上盖稻草，避免温度过高，经57天外种皮腐烂，即分离出种核。然后用水多次冲洗，摊开晾干，23个小时待种亮色泽转白发亮时即可收藏银杏叶，以叶片大、完整、无杂质者为佳,910月间采收，晒干。,银杏素(ginkgetin),临床观察证明，银杏叶功效：1降低人体血液中胆固醇水平，防止动脉硬化。对中老年人轻微活动后体力不支、心跳加快、胸口疼痛、头昏眼花等有显著改善作用。2通过增加血管通透性和弹性而降低血压，有较好的降压功效。3消除血管壁上的沉积成分，改善血液流变性，增进红细胞的变形能力，降低血液粘稠度，使血流通畅，可预防和治疗脑出血和脑梗塞。对动脉硬化引起的老年性痴呆症亦有一定疗效。4银杏叶制剂与降糖药合用治疗糖尿病有较好疗效，可用于糖尿病的辅助药。5能明显减轻经期腹痛及腰酸背痛等症状。6用于支气管哮喘的治疗，也有较好疗效。7降低脂质过氧化水平，减少雀斑，润泽肌肤，美丽容颜。,二萜内脂二类化合物，银杏叶内酯和白果内酯为主，能强力对抗血小板活化因子活性，降低血液粘度，抑制血小板聚集和血栓形成银杏黄酮24银杏总内酯6银杏酸5ug/g,理化性质,物理性质,性状颜色旋光性荧光(补充)溶解性,化学性质,酸性*碱性,理化性质,物理性质,性状多为结晶性固体，少数（如苷类）为无定形粉末,颜色与分子中是否存在交叉共轭体系及助色团的种类、数目以及取代位置有关黄酮(醇)类灰黄黄色查耳酮类黄橙黄色二氢黄酮(醇)类无色异黄酮类淡黄色花色素类红色(pH8.5)7位及4位引入-OH及-OCH3等助色团后，使颜色加深,黄酮,旋光性苷元二氢黄酮(醇)、黄烷(醇)有旋光性苷类均有旋光性，且多为左旋。,物理性质,荧光(补充)黄酮(醇)黄色荧光查耳酮、橙酮橙黄荧光二氢黄酮(醇)无荧光异黄酮、黄酮苷暗斑,黄酮,溶解性影响因素黄酮母核类型黄酮(醇)、查耳酮平面型难溶于水二氢黄酮(醇)非平面型微溶于水,可溶于50%醇液花青素离子型易溶于水取代基(C7、C4,位影响大)-OCH3、-CH3、异戊烯基，增大脂溶性-OH增大水溶性糖链越长，水中溶解度越大苷元难溶于水，易溶于CHCl3,、乙醚、苯、乙酸乙酯等有机溶剂，能溶于碱水(酚-OH)苷水溶性增加，易溶于热水、甲、乙醇亲水性溶剂，可溶于乙酸乙酯，可溶于碱液(酚-OH),物理性质,黄酮,化学性质,酸性*,酚羟基酸性强弱顺序,来源酚羟基（共轭效应质子的转移）,7,4-二羟基7或4-羟基一般酚羟基5-羟基,碱性,来源氧原子（未共用电子对生成烊盐）,黄酮类化合物溶于浓硫酸而生成的烊盐，常常表现出特殊的颜色，可用于鉴别。黄酮、黄酮醇类显黄色至橙色，并有荧光；二氢黄酮类显橙色（冷时）至紫红色（加热时）；查耳酮类显橙红色至洋红色；异黄酮、二氢异黄酮类显黄色；橙酮类显红色至洋红色。某些甲氧基黄酮溶于浓硫酸中显深黄色，且可与生物碱沉淀试剂生成沉淀。,化学性质,显色反应*,（多与分子中的酚羟基及吡喃酮环有关）,还原反应,盐酸-镁粉（或）锌粉反应,四氢硼钠反应,金属盐类试剂的络合反应,与铝盐络合反应,与锆盐络合反应(锆盐-枸橼酸反应),与铅盐络合反应,与锶盐络合反应,硼酸显色反应,碱性试剂显色反应,与五氯化锑的反应,还原反应,与铅盐络合反应,其中醋酸铅只能与分子中具邻二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。但碱式醋酸铅沉淀能力要大得多，一般酚类均可与其发生沉淀。,试剂1%醋酸铅或碱式醋酸铅结果黄至红色沉淀,碱性试剂显色反应,二氢黄酮查耳酮,无色黄、橙色,黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色,(1)黄酮类在冷和热的氢氧化钠水溶液中能产生黄橙色。(2）查耳酮类或橙酮类在碱液中能很快产生红或紫红色。(3）黄酮类化合物当分子中有3个羟基相邻时，在稀氢氧化钠溶液中往往能产生暗绿色或蓝绿色纤维状沉淀。,碱性试剂显色反应,各类黄酮类化合物的显色反应,提取分离,分离*,柱色谱法,硅胶柱色谱聚酰胺柱色谱葡聚糖凝胶柱色谱高效液相色谱法,梯度pH萃取法,根据分子中特定官能团分离（补充）,提取分离,提取、粗精制,提取（溶剂法）,苷元(多数)乙酸乙酯、氯仿等脂溶性溶剂多甲氧基苷元苯、石油醚多糖苷类沸水提取花青素类加少量酸（如0.1%盐酸）黄酮苷和多羟基极性稍大的的苷元极性较大的混合溶剂提取，用得最多的是甲醇碱性水（如碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液）或碱性稀醇（如50%的乙醇）浸出，浸出液经酸化后可使黄酮类化合物游离，或沉淀析出，或用有机溶剂萃取。为避免在提取中黄酮苷类发生水解，须事先破坏酶的活性。,粗精制,溶剂萃取法依据化合物的极性，采用溶剂极性梯度萃取碱提取酸沉淀依据化合物的酚羟基酸性应当注意碱液浓度不易过高，以免在强碱性下，尤其加热时破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成烊盐。炭粉吸附法主要适于苷类的精制甲醇提取物+活性炭吸附7%酚/水洗脱乙醚除去酚水层浓缩黄酮苷类,黄酮萃取法粗精制流程图,分离*,柱色谱法,硅胶柱色谱,应用范围最广，主要适于分离异黄酮、二氢黄酮（醇）及高度甲基化（或乙醚化）的黄酮（醇）类。化合物极性大，吸附力强，后洗脱洗脱剂极性大，洗脱能力强，分离极性大的苷类化合物时，硅胶加水去活。,其洗脱规律如下：1）苷元相同，洗脱先后顺序一般是：三糖苷、双糖苷、单糖苷、苷元。（连接糖数目多，易洗脱）2）母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢3）不同类型黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮、二氢黄酮醇、黄酮、黄酮醇。4）分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附，故查耳酮比相应的二氢黄酮难于洗脱。5）酚羟基形成分子内氢键，吸附减弱，易洗脱。,聚酰胺柱色谱,吸附强度取决于化合物类型及分子中羟基的数目与位置及溶剂,溶剂洗脱由易到难：(常用水做起步溶媒)脲、甲酰胺碱水丙酮乙醇(浓度由高低)水,聚酰胺柱色谱,酚羟基数目越多则吸附力越强酚羟基形成分子内氢键，则其与聚酰胺的吸附力减小分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强,葡聚糖凝胶柱色谱,分离游离黄酮主要为吸附作用凝胶对黄酮类化合物（苷元）的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。酚羟基越多，吸附越牢，越在后面流出。分离黄酮苷分子筛的性质起主导作用洗脱时苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体。,常用的洗脱剂有：1）碱性水溶液（如0.1mol/lNH4OH），含盐水溶液（0.5mol/lNaCl等）2）不同浓度的醇3）其它溶剂，如含水丙酮、甲醇氯仿等,高效液相色谱法,反相柱色谱大多黄酮类化合物洗脱剂：甲酸或乙酸的水-甲醇溶剂系统或水-乙腈溶剂系统。如在Portisil-10-ODS反相柱上，用水-乙腈（41）作移动相可使大豆（Glycinemax）中的5,7,4-三羟基异黄酮、金雀异黄酮和6,7,4-三羟基异黄酮分离。正相色谱多甲氧基黄酮或黄酮类化合物的乙酰物洗脱剂：可用以苯-乙腈或苯-丙酮例如在LichrosorbSi60柱上，用庚烷-异丙醇（6040）作移动相，成功地分离了柑橘属果实中多甲氧基黄酮类。,梯度pH萃取法,在黄酮类混合物中，具有邻二酚羟基的成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀，不具有的成分可被碱式醋酸铅沉淀，据此可将两类成分分离。得到的沉淀用硫酸盐或磷酸盐进行复分解脱铅，滤液中可得到黄酮类化合物。具有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物分离。,根据分子中某些特定官能团分离,检识,理化检识物理检识主要根据黄酮类化合物的形态、颜色等。化学检识主要利用各种显色反应，用于检识母核类型的反应有盐酸-镁粉反应、四氢硼钠反应、碱性试剂显色反应和五氯化锑的反应等；用于检识取代基的反应有锆盐-枸橼酸反应、氨性氯化锶反应等。色谱检识纸层析(PC)薄层色谱(TLC),纤维素薄层色谱HPLC(高效液相)（补充）,硅胶薄层层析,聚酰胺薄层层析,检识,显色剂2%AlCl3/醇或氨气熏或UV下观察荧光,正相分配色谱极性小的化合物比极性大的化合物Rf值大。醇性展开剂n-BuOH-HOAc-H2O(4:1:5上层BAW)t-BuOH-HOAc-H2O(3:1:1TBA)水饱和n-BuOHRf苷元单糖苷双糖苷(同一类型苷元)黄酮(醇)二氢黄酮(醇)；查耳酮二氢查耳酮羟基数目越多，极性越大，则Rf值越小(同一类型苷元),色谱检识纸层析(PC),反相分配色谱极性大的化合物比极性小的化合物Rf值大。水性展开剂2-6%HOAc或3%NaCl或1%HClRf双糖苷单糖苷苷元(同一类型苷元)二氢黄酮(醇)黄酮(醇)；二氢查耳酮查耳酮双向色谱法(90。调转)以黄酮苷为例第一向采用醇性展开剂；第二向采用水性展开剂,检识,色谱检识纸层析(PC),硅胶薄层层析吸附原理同一展开剂化合物极性越大,吸附越牢固,Rf越小同一化合物展开剂极性越大,Rf越大展开剂混合或单一有机溶剂(可加少量酸,防止拖尾)游离黄酮，如甲苯-甲酸甲酯-甲酸（5:4:1），苯-甲醇（95:5）、氯仿-甲醇（8.5:1.5，7:0.5）、苯-甲醇-乙酸（35:5:5）、苯-乙酸（45:4）、二氯甲烷-乙酸-水（2:1:1）黄酮苷类，如正丁醇-乙酸-水（3:1:1）、甲酸-乙酸乙酯-水（9:1:1）、氯仿-乙酸乙酯-丙酮（5:1:4）、氯仿-甲醇-水（65:45:12）、氯仿-乙酸（100:4）、苯-乙酸（100:4）、氯仿-乙酸-甲醇（90:5:5）,检识,色谱检识薄层色谱(TLC),聚酰胺薄层层析氢键吸附原理化合物形成氢键能力越强,Rf越小苷类成分极性展开剂如：70%乙醇、1%HCl、甲醇-乙酸-水（90:5:5）、甲醇-水（1:1）、丙酮-水（1:1）、异丙醇-水（3:2）、水-乙醇-丁酮-乙酰丙酮（65:15:15:5）、水-正丁醇-丙酮-乙酸（16:2:2:1）苷元成分非极性展开剂如：甲苯-氯仿-丙酮(8:5:7)、丙酮-乙醇(1:1)、氯仿-甲醇（94:6，96:4）、氯仿-甲醇-丁酮（12:2:1）、苯-甲醇-丁酮（90:6:4，84:8:8，60:20:20）,检识,色谱检识薄层色谱(TLC),层析柱反向硅胶(C18,ODS)洗脱剂水性溶剂甲醇-磷酸-水(15:0.5:85)层析行为化合物极性大的先被洗脱(先出峰),HPLC(高效液相)（补充）,检识,色谱检识薄层色谱(TLC),纤维素薄层色谱展开剂如：苯-乙酸-水（125723）、氯仿-乙酸-水（1091）、5%40%乙酸、正丁醇-乙酸-水（415，上层）,黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi生向阳草坡地及荒地上。分布于北方各省区；朝鲜，苏联，蒙古，日本也有。,黄芩,黄芩药用部位:根,为不规则的薄片。外皮棕黄色或深黄色。切面黄色，中间红棕色，老根中间呈暗紫色或棕黑色，枯朽状或成空洞。质硬而脆。,中药实例,功能:清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。主治:用于湿温、暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。,成分:主要有效成分黄芩苷（含4.0%5.2%），黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、木蝴蝶素A及二氢木蝴蝶素A等黄酮类化合物。功能主治:清热解毒，抗菌消炎等,用于上呼吸道感染，痢疾等.,黄芩苷,清热凉血，消肿止痛，用于牙周炎、牙龈炎、龋齿、口腔溃疡、牙龈肿痛、出血、咽炎、口臭等,黄芩,中药实例,黄芩（Scutellariabaicalensis）,黄芩苷汉黄芩苷,黄芩苷(黄色)(baicalin),黄芩素(黄色)(baicalein),(绿色),黄芩质量变化：,过去南方认为“黄芩有小毒，必须用冷水浸泡至色变绿去毒后，再切成饮片，叫淡黄芩”。而北方则认为“黄芩遇冷水变绿影响质量，必须用热水煮后切成饮片，以色黄为佳”。黄芩应以北方的蒸或用沸水略煮的方法进行炮制。,结构研究,红外光谱（IR）羰基1740-1630cm-1,芳环1600,1580,1450cm-1共轭双键1620-1600cm-1,羟基3500-3000cm-1,黄酮,紫外光谱（UV）,苯甲酰基(benzoyl)峰带220-280nm,桂皮酰基(cinnamoyl)峰带300-400nm,黄酮R=H黄酮醇R=OH,黄酮类化合物环上引入氧取代基，吸收带红移；羟基甲基化或苷化，吸收带紫移,黄酮、黄酮醇（带和带强度相差不大）带黄酮304-350nm黄酮醇（3-OH被取代）328-357nm黄酮醇（3-OH游离）352-385nm,紫外光谱（UV）,带220-280nm,峰带300-400nm,查尔酮、橙酮（带很强，为主峰；带较弱）带查尔酮340-390nm橙酮370-430nm,异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇（带很强，为主峰；带较弱）带异黄酮245-270nm二氢黄酮、二氢黄酮醇270-295nm,紫外光谱（UV）,MeOH,紫外光谱（UV）,MeOH+AlCl3,MeOHMeOH+AlCl3,紫外光谱（UV）,1HNMR谱特征峰:黄酮H-36.30(1H,s)异黄酮H-28.50-8.70(1H,s)二氢黄酮H-25.20(1H,dd,J=5.0,11.0Hz)H-32.80(1H,dd,J=5.0,17.0Hz)H-32.80(1H,dd,J=11.0,17.0Hz)二氢黄酮醇H-24.90(1H,d,J=11.0Hz)H-34.30(1H,d,J=11.0Hz)查尔酮H-6.70-7.40(1H,d,J=17.0Hz)H-7.30-7.70(1H,d,J=17.0Hz)橙酮=CH-6.50-6.70(1H,s),核磁共振谱,黄酮,取代基Ar-OH9.50-13.0012.40(5-OH),10.93(7-OH),9.70(3-OH),-OCH33.50-4.10,-CH31.00Ar-HA环在较高场5.70-6.90(H-6在较高场)B环在较低场6.50-7.90(H-3,和H-5,在较高场)取代类型5,7-二OHH-6,H-85.70-6.90(1H,d,J=2.5Hz)4,-OHH-2,6,7.70-8.10(2H,d,J=8.5Hz)H-3,5,6.50-7.00(2H,d,J=8.5Hz),1HNMR谱,黄酮,13CNMR谱,黄酮类型确定C环C=O160-200,C2,C3100(二氢黄酮醇)-OR直接连C+2530ppm邻位C-1215ppm间位C+1.02.0ppm对位C-68ppm,质谱（MS）,-OCH32,5-OH,7-OH?,2,6,-H,3,5,-H,8-H,6-H,-OCH32,C-8,C-6,C=O,某化合物A，分子式C21H20O12；Mg-HCl反应显红色，SrCl2反应呈绿色沉淀，ZrOCl2-柠檬酸反应呈黄色后消褪，Molish反应具棕色环。,结构解析,UVmaxnm：MeOH259，266sh，299sh，359NaOMe272，327，410AlCl3275，303sh，433AlCl3/HCl271，300，364sh，402NaOAc271，325，393NaOAc/H3BO3262，298，387,1H-NMR（DM