人参皂苷常规水提取法和新提取方法的比较研究.pdf

The Determ ination of Contents of 8 Ginsenosides in Extraction ofPanax ginsengby HPLC CAO Jun2ling 1,2 ,L I Zu2lun2, Fu Qiang 2 , YAN Dan2, L I AO Qing2wen3, XI AO Xiao2he1 (1 1Institute of Chinese Medicine, 302 Hospital of PLA, Beijing 100039, China;21College of Phar macy, Chengdu University of TCM, Chengolu 610075, China; 31College of Pharmacy, Hunan University of TCM, Changsha 410004, China) Abstract Objective: To establish a method to deter mine the contents of 8 ginsenosides in extraction ofPanax ginsengby HPLC. Methods: The sample was analyzed on an ODS chromatogram column (Kromasil 250mm416mm, 5m) , with mobile phase of aceto2 nitrile2water (gradient elution) at flow rate 110ml/min and detection atwavelength of 203nm1Results: RSD of stability, precision and recurrencywas 0155%2126% , 0185%1193% and 0197%2172% respectively1Conclusion: Thismethod can be good for the content determination of ginsenoside1 Key words HPLC; Ginsenoside; Content deter mination 人参皂苷常规水提取法和新提取方法的比较研究 张春红,张连学 3 ,李向高,刘双利,刘桓宇,赵向南 (吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118) 摘要 为寻找新的人参皂苷提取方法,提高人参皂苷的提取率和纯度,简化操作,本文以人参总皂苷、 人参皂 苷 2Rb1、 2Rb2、 2Rc、 2Rd、 2Re、 2Rg1等9种主要单体皂苷收率为指标,利用大孔吸附树脂法除去杂质,高效液相色谱法 进行含量测定,比较了超声碱水提取法和超声常规水提取法的优劣。结果表明碱水提取法在总皂苷和各单体皂苷 收率上均比常规水提法有明显提高,经t检验证明二者之间有极显著的差异(P 0105 ) ;从精 制 总 皂苷 收 率 看 ,碱 水提 法 (7 199% )大高于常规水提取法 (6 108% ) ,有极显著 差异(P 01001)。 (2)从单体皂苷收率角度看,与常规水提法相 比,碱水提取法有大幅度的提高,经t检验证明有极 显著差异,其中人参皂苷 2Rb1、 2Rb2、 2Rc、 2Rd、 2Re、 2Rg1增幅较大,均约为2%以上。综上可以看出碱 水提取法均优于常规水提取法。 表1 不同提取方法精制总皂苷中各 单体皂苷含量的比较(?xs, n =3) 皂苷种类 提取方法 常规水提法(% )碱水提法(% ) ginsenoside2Rb1717801256 11188014113 3 3 ginsenoside2Rb2518801189 8101013763 3 3 ginsenoside2Rb3018501026 1116010243 3 3 ginsenoside2Rc5162011477194012463 3 3 ginsenoside2Rd4185011296165012203 3 3 ginsenoside2Rf1148010561175010033 3 3 ginsenoside2Re6112010908178010043 3 3 ginsenoside2Rg1215701043 4110010173 3 3 ginsenoside2Rg2110001046 1110010393 注:与常规水提法比较, 3 P 0105, 3 3 P 0101, 3 3 3 P 01001 表2 不同提取法人参总皂苷收率的比较(?xs, n =3) 提取方法 取样量 (g) 粗总皂苷收率 (% ) 精制总皂苷收率 (% ) 常规水提法50912301523610801164 碱水提法509151010837199011163 3 3 注:与常规水提法比较, 3 P 0105, 3 3 P 0101, 3 3 3 P 01001 1401 中药材第29卷第10期2006年10月 4 讨论 碱水提取法优于常规水提法是由于人参须根中 含有大量丙二酰基系列的人参皂苷(丙二酰基人参 皂苷 2Rb1、 2Rb2、 2Rb3、 2Re等 ) , 其在弱碱性环境中能 脱去酰基,使其变成相应的人参皂苷,极性变小,易 被大孔树脂吸附(丙二酰基类人参皂苷极性过大不 易被大孔树脂吸附,常常被当作水溶性杂质而除 去 ) , 使人参皂苷提取率大大增加。 常规水提法提取人参皂苷时过滤十分困难是由 于人参中粘多糖与滤纸纤维形成一种膜状物质阻碍 了提取液的抽滤。碱水提取法提取人参皂苷时,人 参中粘性多糖的葡萄糖醛酸基与水溶液中氢氧化钙 生成钙盐沉淀,不能通过滤纸,使过滤速度加快,同 时也减少了滤液中的水溶性杂质。 常规水提取法提取人参皂苷时,提取液非常容 易发霉变质,碱水提取法提取液为碱性,不易发霉变 质。 参考文献 1张晶,陈全成,郑毅男,等 1不同提取方法对人参皂苷提 取率的影响 1吉林农业大学学报, 2003, 25(1) : 712721 2周国明,谢玉琼,吴正中,等 1正交实验法提取人参皂苷 工艺研究 1中国药房, 2002, 13(1) : 182191 3蔡雄,刘中秋,王培训,等 1大孔吸附树脂富集纯化人参 总皂苷工艺 1中成药, 2001, 23(9) : 63126341 4张春红,张崇禧,郑友兰,等 1浸渍法提取人参皂苷最佳 工艺的研究 1吉林农业大学学报, 2001, 25 (1) : 73274, 781 (2006 - 03 - 29收稿) 三种鬼臼毒素类化合物的鉴定 朱培芳,张洪彬,赵静峰 (云南大学化学科学与工程学院,云南昆明650091) 摘要 目的:三种鬼臼毒素类化合物鬼臼毒素、 苦鬼臼毒素和异鬼臼苦酮在液相色谱上很容易混淆,甚至误 认,为此进行了一系列的实验,使这三种化合物在不同的色谱条件下可以彼此分离,用于鬼臼类植物桃儿七化学成 分判定。方法:高效液相色谱法。结论:鬼臼毒素、 苦鬼臼毒素和异鬼臼苦酮在液相色谱上可以互相分离,实验用 鬼臼类植物桃儿七中含有该三种化学成分。 关键词 鬼臼毒素;苦鬼臼毒素;异鬼臼苦酮;桃儿七;高效液相色谱 中图分类号: R28411 文献标识码:A 文章编号: 100124454(2006) 1021042204 鬼臼毒素(podophyllotoxin, C22H22O8)属于木脂 体类( lignans) ,主要存在于小檗科多年生草本类群 鬼臼亚科八角莲属(Dysosm aWoodson)、 桃儿七属 (SinopodophyllumYing )、山 荷 叶 属(D iphylleia Michx)及足叶草属(Podophyllum)植物中。这些植 物由于都具有盾状着生的叶,茎中具有多数散生微 管束,花不具蜜腺,浆果含鬼臼毒素等一些共同特征 而被看作一个自然而相对独立的类群,习惯上称为 鬼臼类植物 1。鬼臼类植物是一类含有显著生物 活性,具有悠久应用历史的药用植物。我国汉代的 神农本草经 中就有鬼臼的记述。历来主要用于 蛇咬伤、 痈疖肿毒、 跌打损伤、 风湿筋骨痛及气管炎 等症 2、3 。国外的美洲桃儿七Podophyllum petatum 在民间亦供药用;早在1880年, Podwyssotzkii就从 美洲桃儿七的树脂中分出结晶性成分鬼臼毒素。 King和Sullivan报道鬼臼毒素具有秋水仙碱样作用 之后,引起人们的普遍关注,并导致了一系列的医 学、 生物学和化学的研究,证明了鬼臼毒素的抗癌活 性 4 。我们对鬼臼毒素类化合物进行了高效液相 色谱检测 5 。实验过程中我们发现,在对鬼臼类植 物桃儿七的化学成分做鉴定时,一定的色谱条件下, 鬼臼毒素(podophyllotoxin)、 苦鬼臼毒素(picropodo2 phyllin)与异鬼臼苦酮( isopicropodophyllone)会在同