嗜菌异小杆线虫沧州品系对暗黑鳃金龟幼虫的致病力

扛 扬镊 2 O L O , 3 ： 9 6 1 0 0 P l a n t P r o t e c t i o n 嗜菌异小杆线 虫沧州品系对 暗 刘树森 ， 李克斌h， 刘春琴 ， 王庆雷 ， 尹 姣 ， 曹雅忠 ( 1 中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京1 0 0 1 9 3 ； 2 河北省沧州市农林科学院 ，沧州0 6 1 0 0 1 ) 摘要 室内测 定 了嗜菌异小杆线 虫沧州品 系在 不 同侵 染剂量 、 不 同环境温度及 不同土壤 湿度条件 下对 暗黑鳃金 龟 幼虫的致病力。结果表明， 幼虫的死亡率随线虫施用剂量和处理时间的增长而升高， 其中侵染期线虫剂量为 4 0 0 、 2 5 0 、 2 0 0 条 mL时， 幼虫死亡率分别在处理后 7 2 、 9 6 h和 1 2 0 h达到 l O 0 ； 3 0和 2 5是该线虫侵染的最佳温 度 ， 幼虫死 亡率 分别在处理后 4 8 h和 9 6 h 达到 1 0 0 ； 土壤湿度为 l 4 和 1 7 时 ， 幼虫死 亡率分别在 9 6 h和 1 2 0 h 达到 i 0 0 。 关键词嗜茵异小杆线虫 ； 暗黑鳃金 龟幼 虫； 侵 染剂量 ； 环境 温度 ； 土壤 湿度 ； 致病力 中图分类号 ： S 4 7 6 1 5 文献标 识码 ： A D OI ： 1 0 3 9 6 9 j i s s n 0 5 2 91 5 4 2 2 0 1 0 0 5 0 2 0 Vi r u l e n c e o f He t e r o r h a b d i t i s b a c t e r i o p h o r a s t r a i n Ca n g z h o u t o l a r v a e o f Ho l o t r i c hi a p a r a l l e l a Li u S h u s e n ， Li Ke b i n ， Li u Ch t mq i n ， W a n g Qi n g l e i ， Yi n J i a o ， Ca o Ya z ho n g ( 1 S t a t e Ke y L a b o r a t o r yf o r B i o l o g y o fP l a n t Di s e a s e s a n d I n s e c t P e s t s ，I n s t i t u t e o f P l a n t P r o t e c t i o n ， C h i n e s e Ac a d e my o f Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e s ，B e q i n g 1 0 0 1 9 3 ， C h i n a； 2 C a n g z h o uAc a d e myofAg r i c u l t u r a l a n dF o r e s t r y S c i e n c e s ，C a n g z h o u 0 6 1 0 0 1 ，C h i n a ) Ab s t r a c t Th e v i r u l e n c e o f He t e r o r h a b di t i s b a c t e r i o p h o r a s t r a i n Ca n g z h o u t o t h e l a r v a e o f Ho l o t r i c h i a p a r a l l e l a wa s d e t e r mi n e d a t d i f f e r e n t d o s a g e s ，e n v i r o n me n t a l t e mp e r a t u r e s a n d s o i l m o i s t u r e i n t h e l a b o r a t o r y I t wa s c o n - f i r me d t h a t t h e mo r t a l i t y o f l a r v a e i n c r e a s e d w i t h i n o c u l a t e d d o s a g e a n d t r e a t me n t t i me ，a n d a t t h e d o s e s 4 0 0 i j s mL，2 5 0 i j s mL a n d 2 0 0 i j s mL， a l l r e a c h e d t o 1 0 0 a t 7 2 h ， 9 6 h a n d 1 2 0 h a f t e r i n o c u l a t i o n T h e t e mp e r a t u r e s t r e a t e d a t 3 0 a n d 2 5 f a v o r e d t h e i n f e c t i o n，i n wh i c h a l l o f t h e l a r v a e d i e d a t 4 8 h a n d 9 6 h a f t e r i n f e c t i o n Th e mo r t a l i t y o f l a r v a e u n d e r s o i l mo i s t ure o f 1 4 a n d 1 7 we r e 1 0 0 a t 9 6 h a n d 1 2 0 h a f t e r t r e a t me n t Ke y wo r d s He t e r o r h a b d i t i s b a c t e r i o ph o r a；l a r v a e o f Ho l o t r i c h i a p a r a l l e l a； i n o c ul a t e d d o s a g e； e n v i r o n me n t a l t e mp e r a t u r e； s o i l mo i s t u r e； v i r u l e n c e 昆虫病原线虫 ( e n t o mo p a t h o g e n i c n e ma t o d e s ) 作为最具潜力 的生物杀虫剂之一 ， 具有携带强致病 力共生菌 、 杀虫速度快、 主动搜索寄主能力强 、 对人 畜安全以及无抗性产生等优点_ 1 ， 已被广泛应用 于 多种害 虫 的生 物 防治_ 2 ， 并 用 于 防治 蛴螬 E 6 - 7 。 C a p p a e r t 等分别在实验室、 温室和田间使用昆虫病 原线虫 S t e i n e r n e ma s c a r a b a e i防治两种金龟子R h i z o t r o g u s ma j a l i s和 P o p i l l i a j a p o n i c a 的幼 虫 ， 结 果表明该线虫相对于其他昆虫病原线虫来说具有较 收稿 日期 ： 2 0 0 91 0 0 9 修订 日期 ： 2 0 0 9 1 2 2 1 基金项 目： 国家科技支撑计 划( 2 0 0 6 B AD0 8 A0 5 ) * 通信作者 E - ma i l ： l i k e b i n 5 4 1 6 3 c o rn 好的防治效果 ， 田间防效最高达 8 8 8 。而李俊秀 等利用昆虫病原线虫 1号、 2号制剂防治花生 田蛴 螬分别取得 了 9 6 6 和 9 6 1 的防治效果_ g ， 可见 昆虫病原线虫对蛴螬危害具有较强 的控制作用 。异 小杆线虫是研究较多的一种 昆虫病原线虫， 其侵人 寄主体 内后便 释放 携 带 的嗜 线虫 致病 杆 菌 ( Xe n o r h a b d u s s p ) ， 两者互 相作用 在短 时间 内杀死 寄 主， 因而被广泛用于害虫的防治。国外使用的异小 杆线虫有 He t e r o r h a b d i t i s b a c t e r i o p h o r a HP 8 8 、 H 3 6 卷第 5期 刘树森等 ： 嗜菌异小杆线虫沧州品系对暗黑鳃金龟幼虫的致病力 9 7 me g i d i s UK、 Hz e a l a n d i c a NZ等L 1 。 。 ； 国内 自 2 0 世纪 5 0年代起也筛选出了一些优 良品系， 如泰 山 1 号 Hb a c t e r i o p h o r a l l 】 _ 。 昆虫病原线虫的生存、 活动及侵染力强弱除受线 虫本身行为、 生理等 内在因素的影 响外， 还受到环境 温度 、 土壤湿度 、 土壤结构 以及紫外线强度等外部条 件的影响_ 1 。昆虫病原线虫能够侵入寄主体 内并成 功地将寄主致死 ， 还应该与其在土壤 中的种群数量有 一 定关系。本研究测定 了筛选 自河北省沧州地区的 优势昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫 ( 以下称嗜菌异小 杆线虫沧州品系) 在不同施用剂量、 不同环境温度、 不 同土壤湿度条件下对 暗黑鳃金龟 ( Ho l o t r i c h i a p a r a l l e l a ) 幼虫的致病力， 以探索该线虫的施用剂量 以及对 环境条件的适应能力 ， 为应用当地昆虫病原线虫优势 种防治蛴螬提供理论依据。 1 材料与方法 1 1试 虫 侵染期幼虫 ( i n f e c t i v e j u v e n i l e s ， i j s ) ： 将 嗜菌异 小杆线虫沧州品系在 2 0 2 5下侵染 大蜡螟末龄 幼虫 ， 培养 5 6 d后将感染线虫死亡 的大蜡螟尸体 收集起来以获得线虫侵染期幼虫口 ， 并将收集到 的 幼虫用水溶液保存至 8 1 2冰箱 中备用 。 田间抓捕处于产卵盛期的暗黑鳃金龟成虫， 集 中饲养在铺有土壤的塑料盒 ( 5 0 c m7 0 c m) 中， 土 壤厚 3 0 c r l l 左右 ， 湿度约为 1 5 。以榆树叶为食物 饲养成虫 ， 成虫交配产卵后将卵捡 出统一孵化 ， 幼虫 以马铃薯为食物饲养 1 0 d左右( 1 龄) 备用 。 1 2 嗜菌异小杆线虫沧 州品系不 同施用剂量对 暗 黑鳃金龟幼虫的致病力 在牙签盒 ( 直径 4 c m， 高 8 c m， 下 同) 内放入 1 头暗黑鳃金龟幼虫 ， 并放适量的马铃薯块 ( O 5 c r n 。 块 ， 下同) 作为饲料 ， 然后加湿度 1 8 左右 的灭菌细 沙( 过 4 0目筛) 3 0 g左右。线虫侵染期幼虫用灭菌 水稀释成 5 0 、 1 0 0 、 1 5 0 、 2 0 0 、 2 5 0 、 3 0 0 、 4 0 0条 mL 7 个浓度梯度并混匀 ， 每个浓度取 1 mL 滴到盒 内细沙 上 。牙签盒盖好盖子后 ， 在顶部留有几个 J , L ， 以便 空气流通 。每个浓度设 3组重复， 每组 2 0头幼虫 ， 同时以滴加灭菌水作为对照 。各处理置于 2 5恒 温 ， 8 O 相对湿度下培养 。每隔 2 4 h观察记录幼虫 死亡情况 ， 检查时直接通过透明的牙签盒壁观察 ， 以 其体色变红并停止活动记作线虫侵染致死 ( 下同) 。 1 3 不 同温度条件下嗜菌异小杆线虫沧州品系对 暗黑鳃金龟幼虫的致病力 在牙签盒 内放入 1头幼虫 ， 并放人适量 马铃薯 块作为饲料供蛴螬正常生长食用 ， 然后在上面覆 3 O g左右的灭菌土 ， 土壤 含水量 约为质量 浓度 1 8 。 将侵染期线虫幼虫用灭菌水稀释成 约 2 0 0条 5 0 L 的悬浮液滴加到土壤中。牙签盒加盖并留有一定通 气孔 ， 以保持空气流通。试 验温度分别设 5 、 1 0 、 1 5 、 2 0 、 2 5 、 3 O 、 3 5和 4 O 8 个恒温梯度 ， 每个处理共 设 3 组重复 ， 每组 1 5头幼虫 ， 以不加线虫 的无菌水 处理作为对照 。各处理分别置于相应温度及相对湿 度 8 0 的培养箱 内培养 ， 并于处理后每隔 2 4 h检查 一 次死亡虫数 ， 计算死亡率。 1 4 不同土壤湿度条件下嗜菌异小杆线虫沧州品 系对暗黑鳃金龟幼虫的致病力 在牙签盒内放人 1头幼虫 ， 并放入适量马铃薯 块作为饲料供蛴螬正常生长食用 ， 然后在上面覆 3 0 g左右的灭 菌土 ， 灭菌土用灭菌水 配成土 壤含水 量 分别为 5 、 8 、 1 1 、 1 4 、 1 7 、 2 0 和 2 3 ( 质 量浓度) 的 7个湿度梯度 。将线虫的侵染 期幼虫用 灭菌水稀释成约 2 0 0条 5 O L的悬浮液后滴人土壤 中。为保证土壤湿度 ， 牙签盒加盖 同时盒盖上留有 1 小通气孔 ， 以便保持空气流通 ， 经检验试验前后 的 土壤湿度变化平均为 1 。每个湿度处理共设 3组 重复 ， 每组 1 5头幼虫 ， 以不 加线虫 的无菌水处理作 为对照。各处理均置于 2 5恒温及相对湿度 8 O 的培养箱内培养 ， 处理后每隔 2 4 h检查一次死亡虫 数 ， 计算死亡率 。 1 5 数据统计分析 所有数据 分析 均在 E x c e l 2 0 0 3与 S P S S 1 4 0 f o r wi n d o ws统计分析软件上完成 ， 并检验处理之间 的差异显 著性 ， 方差 分析 和 差异显 著性 检验 采用 D u n c a n法测验 。昆虫病原线虫对蛴螬 的致病力均 用蛴螬的校正死亡率( ) 表示。 校 正 死 亡 率 一 理 罕 寿 完 x 1 0 0 。 2 结果与分析 2 1 嗜茵异小杆线虫沧州品系不 同施用剂量对蛴 螬的致病力 在 2 5恒 温下 ， 室 内测定 了嗜菌异小杆线虫 沧州品系 的 7个不 同施 用剂量对 暗黑鳃金龟幼虫 的致病力 。结 果 ( 表 I ) 显示 ， 幼虫 感染 线 虫 2 4 h 9 8 枉 扬铱 2 0 1 0 后 ， 只有 4 0 0条 mL使其死亡率达到 1 O 9 5 ， 显著高 于其他几个剂量 ； 处理 4 8 h后 ， 4 0 0条 mL时幼虫 的死 亡 率 显 著 高 于 5 0 、 1 0 0 、 2 0 O条 mL( PO 0 5 ) ， 而 1 5 0 、 2 5 0条 mL和 3 0 0条 mL的幼虫死亡率显 著 高 于 5 O条 mL ( 0 0 5 ) ； 处 理 7 2 h后 ， 4 0 0条 mL幼 虫 死 亡 率 达 1 0 0 ， 显 著 高 于 5 O 、 1 0 0 、 1 5 0条 mL等 3个剂量 ( p 0 0 5 ) ， 但 是 显 著 高 于 5 0条 mL( 0 0 5 ) 。总 之 ， 所有线虫剂量 ， 暗黑 鳃金龟幼虫 的死 亡率均随 着处理时间的延长呈增长趋势 ， 其 中以 4 0 0条 mL 死亡率最 高 ， 7 2 h达到 1 0 0 ； 其次分别为 2 5 0条 mL和 2 0 0条 mL， 幼虫死亡率分别在处理 9 6 h和 1 2 0 h后达到 1 0 0 。 表 1 嗜菌异 小杆 线虫沧州 品系不 同剂量对暗黑鳃金龟 幼虫 的致病力 1 )表 中数据为平均值标 准误 ； 同列数据后的字母不 同表示 同一时间不同处理 差异显著 ( p 0 0 5 ) 。 2 2 不同温度条件下嗜菌异小杆线虫沧州品系对 暗黑鳃金龟幼虫的致病力 室内测定了不同温度下嗜菌异小杆线虫沧州品 系对暗黑鳃金龟幼虫 的致病力 ， 从试验结果 ( 表 2 ) 看出， 当温度为 5和 4 O， 处 理 2 4 1 2 0 h后幼 虫的死亡率为 0 ， 说 明这两个温度显著影 响了线虫 的侵染力 ， 为该线虫 的极端不适温度 ； 3 5处理随 时间 的 延 长 幼 虫 死 亡 率 仍 停 留 在 2 4 h 时 的 2 7 7 7 ， 表明 3 5高温为不适温度 ； 1 0 、 1 5处理 1 2 0 h后幼虫 的死亡率分别为 1 O 1 O 和1 3 3 7 ， 表明 1 O 、 1 5为不适宜侵染的低温条件 。幼虫感染 线虫 2 4 h后 ， 3 0和 3 5的死亡率显著高于其他 温度 的死 亡 率 ( P 0 0 5 ) ； 处 理 4 8 h后， 幼虫 在 3 O时死亡率达到 1 0 0 9 6 ， 2 5时为 7 7 7 7 ， 两者 无显著差异 ( p O 0 5 ) ， 但显著高于其他处理的死亡 率 ( p 0 0 5 ) ， 但均显著高于其他处理 ( P 0 0 5 ) ， 其 中 2 5处 理 9 6 h后 幼虫的死亡率达到 1 0 0 o, 4， 2 0处理 1 2 0 h后幼虫的死亡率也达到 9 7 7 7 。 上述结果显示 ， 2 0 3 0为该线虫侵染 的适宜温度 范围； 而 3 O为该线虫侵染的最佳环境温度 ， 暗黑 鳃金 龟幼 虫 的死亡 率达 到 1 0 0 时较 2 5提 前 4 8 h ， 比 2 0提前 7 2 h以上。 表 2 不同温度条件下嗜菌异小杆线虫沧州品系对蛴螬的致病力 *一一 | 。 掩 硬 f 翠 | 毒 誊 _ 萼 麓。 一 g 一 2 4 h 譬| | | 。4 8 h 。 j | | _ j | 毽 。 | 毽 | 。 | | | t。 矗 黪黪 琵 | 蠢| 露 |一 毫|0 | |f O 1 0 0 0 ： O 0 。| l g 避 O 0 ) e f O ： 0 0 0 ： O 0 ) C | 0 O ： O 0 O i 。 _ 0 t 0 一 - 莲瓯 g 。 g 鼍 瓯Q 釜虢 Q g c Q 蜕 t | | t t 瓴 - - ( o i 0 0 0 1 o o ) C( 2 ： 2 3 2 i 2 3 )( i I ： I 3 8 ： 0 2 ) b e( i 3 i ：3 7 童警 l 薯 I ( 0 ： O o o i o o ) b 蘧 。 。 篷 媳 b j 毽 主 棼 l t Q 5 2 5 薯 t| j b l 镪戳 2 I 芏鬃 a | 蕞 篷鬣 a 。 鬣 燕奄 誊薯0 警 | 。 一 0 旺2 l 2 Q 篆8 8 ) a 。 ?臻 童 话 髭o o 差o 蟹 o ) | n o o 整锈0 a | | 藿 整裁 ) a | | l 士 ) a 一 | I | ”整j a l t 鞠 篷2 7 7 ) 6 t 鼢1 露& | | 0 蔓 | | | - 。 O 0 虢O O 铳 o o ! )表中数 据为平均值 标准误 ； 同列数据后 的字母不同表示同一时间不 同处理差异显著 ( 户 O 0 5 ) 。 3 6 卷第 5 期 刘树森等： 嗜菌异小杆线虫沧州品系对暗黑鳃金龟幼虫的致病力 9 9 2 3 不同土壤湿度条件下嗜菌异小杆线 虫沧 州品 系对暗黑鳃金龟幼虫的致病力 在恒温 2 5的培养箱 内测定 了不同土壤湿度 条件下嗜菌异小杆线虫沧州品系对暗黑鳃金龟幼虫 致病力的影响 ， 试验结果见表 3 。由于处理 2 4 h后 各湿度下幼虫 的死亡率均为 O ， 所 以表 中未将 2 4 h 结果列 出。试验 结果 显示 ， 在 幼虫 感染 线虫 4 8 h 后 ， 土壤湿度为 2 O 与 2 3 的处理之问存在显著性 差异 ， 并 且两 者显 著 高于其 他处 理 的幼虫 死 亡率 ( O 0 5 ) ， 但 土壤湿度为 1 4 和 1 7 处理 的幼 虫死亡 率显 著 高 于 5 、 8 和 1 1 的处 理 ( P 0 0 5 ) ； 处理 9 6 h和 1 2 0 h后 ， n 、 1 4 、 l 7 、 2 O 和 2 3 几个处理 间幼虫死亡率无显著差异 ， 但均显 著高于 5 和 8 处理的幼虫死亡率( 户 0 0 5 ) 。从 总体上看 ， 相同的土壤湿度下， 线虫的致病力随侵染 时问的延长而升高 ， 其中土壤湿度为 1 4 和 1 7 时 幼虫 的死 亡 率分 别在 处理 9 6 h和 1 2 0 h后达 到 l o 0 ， 为该线虫侵染 的最佳湿度 ； 不 同土壤湿度对 该线虫致病力 的影响也 比较 明显 ， 幼虫 的死亡率基 本上随土壤 湿度 的增加而升 高， 但土壤湿度为 5 和 8 时， 幼虫感染 线虫 1 2 0 h后 的死 亡率均低于 3 0 ， 可见此湿度范围并不是该线虫侵染 的适宜湿 度 ； 土壤湿度为 l 1 2 3 时， 幼虫 的死亡率均达 到 9 O 以上 ， 但湿度为 2 3 时幼虫 的死亡率低 于湿 度为 2 O 的处理 ， 呈 降低趋 势； 由结果可知过低或 过高的土壤湿度都会影响该线虫的致病力。 表 3 不 同土壤湿度条件 下嗜菌异 小杆 线虫沧州品系对蛴螬的致病 力 1 )表 中数据为平均值标准误 ； 同列数 据后的字母不 同表示 同一时 间不 同处理差异显著 ( p O 0 5 ) 。 3 讨论 土壤 中昆虫病 原线虫 的基数对 于有效控 制害 虫的为害至关重要 。在生产应用 中控制好线 虫 的 用量不仅能得到较好 的防治效果 ， 而且可以降低 防 治费用 。嗜菌异小杆 线虫沧州 品系不 同剂量 对暗 黑鳃金龟 幼虫 的致病力测定结果表 明， 在相 同侵染 时间下 ， 致病力基本上 随线 虫浓度 的增 高而增高 ； 而在相同线虫浓度下 ， 致病力则基本上与侵染时间 成正 比， 当侵染期线虫浓度为 4 0 0 、 2 5 0 、 2 0 0条 mL 时 ， 幼虫 的死 亡 率分 别 在 7 2 、 9 6 h和 1 2 0 h达 到 1 0 0 。C a p p a e r t 等 的田间试验证 明线虫施用量为 2 5 X 1 0 9条 h m。和 1 0 9条 h m。时 ， 防治 效果 分 别为 8 8 和 7 5 l_ 8 J ， 而许艳丽等L l 也认 为施用浓 度对线虫防治蛴螬的影 响较施用次数大 。因此 ， 想 要在短时间内有效控制蛴螬的为害 ， 适当地增加线 虫的施用量是有必要的。 环境温 、 湿度是影响昆虫病原线虫的重要 因素 ， 决定其存活 、 生长发育 、 繁殖 、 迁移、 性 比以及共生菌 的增殖_ 1 ， 直接影响线虫的致病力。大多数昆虫病 原线虫在 5 1 O基本停止活动 ， 1 5以上开始活 动 ， 2 5时移动最为活跃 ， 3 5以上线虫没有致病 力 ， 甚至很 快死亡l_ 1 ， 但不 同种 或品系对温度 的要 求也有差异。从本试验 的结果看 ， 嗜菌异小杆线虫 沧州品系侵染 暗黑鳃金龟幼虫 的适宜温度在 2 0 3 O， 以 3 0和 2 5的致病力较高 ， 幼虫死亡率 分别在 4 8 h和 9 6 h达到 1 0 0 ， 说 明在适宜温度范 围内该线虫的致病力 随着温度的升高而增强 ， 并且 致死时间较短 ； 当温度为 5和 4 O时该线虫已经 丧失 了侵染能力 ； l O和 3 5时， 线虫虽然有活动 能力 ， 但致病力非常低 ， 说明过低或过 高的温度对该 线虫活动 以及致病力有较大 的影响。 土壤 中含有一 定水分 ， 便于在土壤间隙形成水 膜 ， 有助于昆虫病原线虫在土壤中扩散 ， 土壤湿度过 低或过高不仅影响线虫的活动还有可能致使线虫缺 氧或脱水死亡 ， 较为适宜 的土壤 湿度在提 高线虫扩 1 0 0 勉 扬缘 2 0 1 0 散能力的同时增强 了其侵染能力。有研究证明适宜 线虫的土壤含水量为 2 0 左右 ， 在 1 O 3 O 范围 内均不影 响线虫继续侵染寄主 ， 但长时 问浸水和干 燥会使线虫死亡l_ 】 。不 同种或 品系的昆虫病原 线 虫耐干燥能力不 同， 本试验结果显示在一定土壤湿 度下 ， 嗜菌异小杆线虫沧州品系对 暗黑鳃金龟幼虫 的致病力 随侵染时间延长而提高 ， 土壤湿度为 1 4 和 1 7 时幼虫的死亡率分别 在 9 6 h和 1 2 0 h达到 1 0 0 ， 1 1 和 2 O 在 1 2 0 h达到 9 5 左右； 可见 ， 1 1 2 O 土壤湿度为该线虫 的适宜湿度 ， 1 4 1 7 9 6 的土壤湿 度可 能是该线虫活 动和侵染 的最 佳 范围。 影响昆虫病原线虫致病力的 因素很 多， 在 田问 应用时环境条件显得尤为重要 ， 其中线虫的施用量 、 环境的温湿度等条件都是能否达到 良好 防效的关键 因子。本试验初步了解了当地优势昆虫病原线虫种 群对环境 的适应能力和基本施用技术 ， 可为进一步 在田间应用该线虫防治蛴螬提供依据。 参考文献 1 2 3 4 Eh l e r s R U Cu r r e nt a n d f u t u r e u s e o f n e m a t o d e s i n b ioc o n t r o l ：p r a c t i c e a n d c o mme r c i a l a s p e c t s wi t h r e g a r d s t O r e g u l a t o r y p o l i c y i s s u e E J B i o c o n t r o l S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y ，1 9 9 6 ， 6： 3 0 33 1 6 D u n p h y G B，T h u r s t o n G S I n s e c t i mmu n i t y Mf Ga u g l e r R，Ka a y a H K ( Ed s ) Ent o mo p a t h o g e n i c n e ma t o d e s i n b i o l o g i c a l c o n t r o 1 C RC Pr e s s，Bo c a Ra t o n，FL，1 9 9 0： 3 0 13 2 3 Ge o r g i s G B，Ga u g l e r RPr e d i c t a bi l i t y i n b i o l o g i c a l c o n t r o l u s i n g e n t o mo p a t h o g e n i c n e ma t o d e s J 。J Ec o n E n t o mo l ， 1 9 9 1，8 4 ： 71 37 2 0 P o i n a r G O J r Ne ma t o d e s f o r b i o l o g i c a l c o n t r o l o f i n s e c t s M CRC Pr e s s Bo c a Ta t o n，FL，1 9 7 9 5 S a mi s h M，G l a z e r I E n t o mo p a t h o g e n i e n e ma t o d e s f o r t h e b i o c o n t r o l o f t i c k s J T r e n d sP a r a s i t o l ， 2 0 0 1 ，1 7 ( 8 ) ： 3 6 8 3 7 2 6 Ko p p e n h 6 f e r A M，F u z y e MS t e i n e r n e ma s c a r a b a e i f o r t h e c o n t r o l o f w h i t e g r u b s E J B i o l o g i c a l C o n t r o l ，2 0 0 3 ，2 8 ： 4 7 5 9 E 7 Gr e wa l P S ， P o we r K T， Gr e w a l S K， e t a 1 E n h a n c e d c o n s i s t e n c y i n b i o l o g i c a l c o n t r o l o f wh i t e g r u bs( Co l e o p t e r a ：S c a r a b a e i d a e ) wi t h ne w s t r a i n s o f e n t o mo p a t h o g e nic n e ma t o d e s J B i o l o g i c a l C o n t r o l ，2 0 0 4 ，3 0 ： 7 3 8 2 8 C a p p a e r t D L，Ko p p e n h O f e r A M S t e i n e r n e ma s c a r a b a e i ，a n e n t o mo p a t h o g e n i c n e ma t o d e f o r c o n t r o l o f t h e Eu r o p e a n c h a f e r 口 B i o l o g i c a l C o n t r o l ， 2 0 0 3 ，2 8 ： 3 7 9 3 8 6 9 李俊 秀， 孙春梅 ， 康宇静 ， 等昆虫病原线虫对花生 田蛴螬 的防 治效果 口 农药 ， 2 0 0 7 ， 4 6 ( 1 ) ： 6 2 6 3 E l O 冯世鹏 ， 韩 日畴 昆虫病 原线虫 的贮存和剂 型研究进展 J 植 物保护 ， 2 0 0 5 ， 3 1 ( 5 ) ： 2 0 2 5 1 1 李素春 ， 丁文道 ， 韩方胜 昆虫病原线虫泰 山 1 号 防治 花生 地蛴 螬的方法及其效果 J 植物保护学报， 1 9 9 3 ， 2 0 ( 1 ) ： 5 5 5 9 2 1 2 Ko p p e n h o f e r A M，F u z y E M|S o i l mo i s t u r e e f f e c t s o n i n f e e t i v e i t y a n d p e r s i s t e nc e o f t h e e n t o m o p a t h o g e n