水质总氮操作注意事项 作业指导书.doc

XXXX环境检测有限公司第1版 第0次修改 作业指导书编制人： 批准人： 批准发布日期：标题：水质总氮操作注意事项 作业指导书 水质总氮的测定基本操作流程按照HJ 636-2012 水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法进行，本作业指导书仅对可能影响总氮测定的注意事项进行推荐指导。1.玻璃器皿的洗涤 所使用的玻璃器皿应先用（1+9）盐酸浸泡12h以上，再用超纯水冲洗36次才能使用，否则也会造成空白值偏高或平行性较差的情况。（具体情况视各个实验室环境状况而定）。2. 实验用水及试剂的质量检验 若实验的空白值不够理想，则需要对实验用水及试剂进行检验，以选择出含氮量最低的水和试剂，获得理想的空白值。(本实验室所使用水为超纯水，如没有超纯水机或担心滤柱效果建议用娃哈哈纯净水进行试验验证)；过硫酸钾为最主要影响因素，当过硫酸钾氮含量超标时会严重影响空白值，空白吸光度超过0.3要优先考虑过硫酸钾影响，可选择进口高纯度过硫酸钾或自行重结晶提纯药剂，具体方法详见过硫酸钾提纯作业指导书。3. 实验室环境要求 实验室应保证清洁及通风顺畅，做总氮试验时应与水质 氨氮的测定、大气 氨的测定等实验分开。如实验室有条件可将整个实验在通风橱中进行。紫外分光光度计房间应远离卫生间（厕所大气中氨含量很高），测量时应保持通风。4.试剂的配制 碱性过硫酸钾的配制过程十分重要，掌握不好，会影响消解效果，对测定结果产生一定的影响。过硫酸钾的溶解速度非常慢，若要加快溶解，绝对不能随便加热，最好采用水浴加热法，且水浴温度一定要低于50，否则过硫酸钾会分解失效。配制该溶液时，可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，两者分开配制，再混合定容，或者先配制氢氧化钠溶液，待其温度降到室温后再加入过硫酸钾溶解。若两种药剂在一只烧杯中同时溶于水，氢氧化钠溶遇水放热使溶液温度过高引起局部过硫酸钾失效。5.消解温度、压力的控制 使用蒸气灭菌锅的实验室，消解时国标中要求达到规定温度压力后即开始计时，且温度为120-124，时间为30min。而本实验室经过一系列试验验证，消解温度控制在121，时间为50min，（较国标有所延长）这样测定结果最为理想。（各实验室灭菌锅性能有差异，具体参数自行验证，温度过高具塞比色管管口可能会炸裂）灭菌锅水应用超纯水常更换，本实验室每做一次总氮之前清洗一次灭菌锅并更换超纯水。6. 比色使用时注意事项 该项目的测定涉及两个波长（220nm和275nm），建议在测定完一组样品的同一波长后，再调整到另一波长，统一测定。不要测完一个样品的两个吸光度后再换另一个样品，反复调整波长可能会引起一定的测量误差。比色皿测空白及标样样品时应用超纯水清洗干净，再用样液润洗几次再测量。7. 试验过程 当试验标样及样品加完5ml碱性过硫酸钾时，应摇匀后在进行消解（加碱性过硫酸钾时不能加在管口处，摇匀时不能将比色管倒置，这样都可能造成比色管打不开）。消解冷却至室温，加1ml盐酸（1+9）定容至25ml后，应摇匀后静置30min再测量。 每次总氮测定以加标回收、平行双样、盲样检测等多种方式进行质控。XXXX环境检测有限公司第1版 第0次修改 作业指导书编制人： 批准人： 批准发布日期：标题：过硫酸钾的提纯 作业指导书 由于过硫酸钾是水质 总氮测定的最大的影响因素，特制定此过硫酸钾提纯作业指导书。国产过硫酸钾在生产过程中，同一品牌不同批次含氮量差距较大，会对实验结果产生重大影响，国产药剂如国药品牌过硫酸钾含氮量偏高，空白值过大，建议购买国药分析纯过硫酸钾后，采用重结晶法自行进行提纯；也以直接购买进口试剂，如sigma的高纯度过硫酸钾（本公司未进行验证）。氢氧化钠的影响因素较小使用国药分析纯氢氧化钠即可。1.溶解 于1000mL广口玻璃瓶内加800mL超纯水，50水浴锅加热，然后逐渐加入碱性过硫酸钾，直至不能溶解为止。投加比例约为800mL水投加160g过硫酸钾。加入过硫酸钾需逐勺加入，溶完再加，此溶解过程较长。（建议上午加热溶解，因为过硫酸钾高温会分解，超过50即有部分药剂分解，本实验室溶解温度一般控制在48.5-49.5）2.结晶 把上述完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却，再放进冰箱中结晶（选用广口瓶应有盖，重结晶过程避免引入其他污染）。同时用另一个广口瓶冰一瓶超纯水用于清洗。3.润洗 重结晶一夜后，倒掉上清液然后用冰好的超纯水清洗几遍，结晶效果更好（重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底，但结构很松散，用钢勺掏一掏就散开了，然后再用超纯水清洗）。4. 烘干 洗净后倒掉上清液，然后放入50烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢，可以转移到烧杯并盖上表面皿）。整个烘干过程时间较长，应防止二次污染，也可用滤纸过滤，但也要考虑可能存在二次污染问题。5.总结 经过本实验室一系列试验验证，经一次结晶后的过硫酸钾试剂