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文档简介
艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防,.,范围本章规定了艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防。本规范适用于全国各级各类艾滋病实验室的安全防护和职业暴露预防。,1规范性引用文件医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则(试行)中华人民共和国卫生部,2004年5月31日颁布,2004年6月1日起实施。实验室生物安全通用要求GB19489-2004,2004年10月1日起实施。微生物和生物医学实验室生物安全通用准则(WS233-2002)中华人民共和国卫生行业标准,2002-12-03发布,2003-08-01实施。消毒技术规范(2002年版)中华人民共和国卫生部2002-11-15发布,2003-04-01起实施。,2实验室生物安全级别2.1艾滋病血清学检测艾滋病血清学检测(包括筛查和确认实验室)、免疫学和核酸检测应在符合级生物安全实验室(BSL-2)要求的艾滋病检测实验室中进行。2.2HIV分离、研究HIV分离、细胞培养及研究工作应在级生物安全实验室(BSL-3)中进行。,一级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备使用于健康成年人已知无致病作用的微生物实验室,如用于教学的普通微生物实验室。二级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备使用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物实验室。三级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备使用于主要通过呼吸道途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素的实验室,通常已有预防传染的疫苗。,生物安全柜的构造与原理,CLASSIIA1特点流入气流:0.4m/s.下降气流:流入气流下降气流,经过滤后送至工作区。污染气流的排放。污染部位有正压区域,且没有负压区域的包围。适用范围:不能用于有挥发性有毒化学品和挥发性放射性核素的实验。,3、实验室安全要求,3.1有专用实验室(或至少有专用的检测台),应划分清洁区和污染区(有条件的可设半污染区),并有明显标记,有充足的操作空间。3.2实验室墙面、地面、台面材料应耐酸、耐碱、易清洁消毒、不渗漏液体;室内应有防蚊、防蝇、防鼠等设备。3.3装有脚踏或感应流水装置,备有冲洗眼睛的生理盐水,足够的一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜。3.4备有消毒药品、消毒器材和设备。3.5清洁区(间)备有存放个人衣服、用品的设施;有条件的可设专用沐浴设备。,实验室安全要求(cont.),3.6实验室应装置恒温设备,室温保持在20-25。3.7在实验室验收考核时,对实验室安全性进行评估,发现并排除不安全隐患或提出改进意见。3.8不管是否有意外发生和新的危险出现,均要定期对安全标准操作规程及实施情况进行检查。3.9所有实验室人员必须强化安全防护意识,提倡“普遍性防护原则”。,实验室安全防护4.1个人防护及保健艾滋病实验室所用的个人防护装备均应符合国家有关标准的要求。4.1.1防护服4.1.2艾滋病实验室应配备一次性手套、一次性口罩、安全防护眼镜及冲洗眼睛的装置。4.1.3艾滋病实验室应配备实验室专用的工作鞋,鞋面覆盖足背,鞋底防滑。,4.1.4个人保健4.1.4.1高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险。皮肤的任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。4.1.4.2进实验室前要摘除首饰,修剪长的带刺的指甲,以免刺破手套。4.1.4.3进入实验室应穿隔离衣,戴手套。如果接触物传染危险性大,则应戴双层手套和防护眼镜。4.1.4.4离开实验室前必须脱去隔离衣,并洗手。4.1.4.5严禁在艾滋病实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。,4.2实验室管理要求4.2.1建立安全制度4.2.1.1实验室的安全工作制度或安全标准操作程序(S-SOP)4.2.1.2制定意外事故处理预案。建立意外事故的登记和报告制度。4.2.1.3实验室主任负责组织对突发事件和职业暴露事故进行调查、登记、处理和报告。,4.2.2人员培训和管理4.2.2.1向管理人员和所有检测人员提供并完成与工作相关的充足有效的技术培训。强化全员安全培训和“普遍性防护原则”安全意识。所有工作人员必须经过HIV检测技术和省级以上艾滋病实验室安全培训,包括上岗培训和复训,并接受实验室管理人员的监督。实验室的安全责任人要对工作和环境的安全负责,所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。4.2.2.2必须告知新上岗人员实验室工作的潜在危险,进行安全教育,直至有能力后方可单独工作。,4.2.2.3严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案制度,工作人员血清应长期保留。实验室工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物的检测;注射乙肝疫苗;每半年至1年进行1次HIV抗体检测,并保留血清样品。4.2.3建立严格的保密制度并定期检查4.2.3.1艾滋病检测实验室所有人员应具有高度的保密意识。不可对无关人员透露检测结果。,4.2.4严格质量管理4.2.4.1按要求做好安全操作的管理以及检测试剂的选择、检测工作的室内质控和室间质评。4.2.5对存放试剂和有毒物区域的监控4.2.5.1冷藏柜、冰箱、培养箱和存放生物试剂、化学危险品、放射性物质的容器置于工作人员视线之外的地点时应上锁。4.2.5.2应设有专门储存阳性血清、质控品的低温冰柜和/或血清库毒种库,并应上锁,专人管理。各级实验室血清库/毒种库的设置按有关规定执行。,4.3实验室的安全操作4.3.1在安排工作人员的实验室区域时,要根据其工作的种类和所涉及的生物试剂,对实验室环境做好安全检查。4.3.2进入实验室应穿隔离衣、戴手套,必要时(如对初筛阳性标本进行复测或确认时,或直接对HIV毒种进行操作时)戴防护眼镜,以防污染暴露的皮肤和衣物。不用戴手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。4.3.3如接触物传染性危险大,可戴双层(两付)手套以增加保护。操作时手套破损,应立即丢弃、洗手并戴上新手套。,4.3.4禁止采用口腔吸液管,必须使用移液器来操作实验室的所有液体。4.3.5操作中有标本、检测试剂外溅时应及时消毒。对大量溅出的浓度高的传染物在清洁之前应先用1%次氯酸钠溶液浸泡,然后戴上手套擦净。4.3.6工作完毕,要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%0.2%次氯酸溶液消毒;用消毒液清洗后要干燥20min以上;,4.3.7工作完毕,脱去手套后洗手,再脱去工作衣,用肥皂和流动水洗手。4.3.8血清及其它体液样品均应严格按要求妥善保存,HIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。4.4避免利器的使用4.4.1尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器,以防刺伤。如果必须使用,在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤,并应对用过的物品进行消毒处理。4.4.2尽量使用安全针具采血。4.4.3应将用过的锐器直接放入耐刺、防渗漏的利器盒,针头直接放入坚固的容器内,消毒后废弃。禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。禁止用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。,废弃物处置和消毒5.1废弃物处置5.1.1废弃物处置应符合实验室生物安全通用要求(GB19489-2004)和消毒技术规范(2002年版)。5.1.2从艾滋病实验室出来的所有废弃物,包括不再需要的样品、培养物和其它物品,均应视为感染性废弃物,应置于专用的密封防漏容器中,安全运至消毒室,并在高压消毒后再进行处理或废弃。,生物性废弃物,不要把实验废物放到办公区的废物内把利器放入专用容器内;废弃物离开实验室前要对其外表进行消毒;做上标记;贴封条,并保持到高压灭菌结束;安全的运送到高压灭菌处。,HIV常用的消毒方法1.物理消毒方法(1)高压蒸汽消毒,121,保持1520min;(2)干燥空气烘箱消毒(干烤消毒),140,保持23h。2.HIV常用的化学消毒方法HIV最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000-5000mg/L)、75%乙醇和2%戊二醛,保持1030min。(1)废弃物缸:5000mg/L次氯酸钠。(2)生物安全柜工作台面和仪器表面:75%乙醇。(3)溢出物:5000mg/L次氯酸钠。(4)污染的台面和器具:2000mg/L次氯酸钠,也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。,相关法律、法规、标准,中华人民共和国刑法修正案(六)中华人民共和国主席令(第51号)2006.6.29中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国主席令(第17号)2004.12.1突发公共卫生事件应急条例中华人民共和国国务院令(第376号)2003.5.9,中华人民共和国刑法修正案(六)中华人民共和国主席令(第51号)2006年6月29日第十届全国人民代表大会常务委员会第二十二次会议通过,第一百三十四条修改为:“在生产、作业中违反有关安全管理的规定,因而发生重大伤亡事故或者造成其他严重后果的,处三年以下有期徒刑或者拘役;情节特别恶劣的,处三年以上七年以下有期徒刑。”“强令他人违章冒险作业,因而发生重大伤亡事故或者造成其他严重后果的,处五年以下有期徒刑或者拘役;情节特别恶劣的,处五年以上有期徒刑。”,第一百三十五条修改为:“安全生产设施或者安全生产条件不符合国家规定,因而发生重大伤亡事故或者造成其他严重后果的,对直接负责的主管人员和其他直接责任人员,处三年以下有期徒刑或者拘役;情节特别恶劣的,处三年以上七年以下有期徒刑。”,7艾滋病的职业暴露后预防7.1职业暴露艾滋病的职业暴露是指医务工作者、实验室工作人员及有关监管人员在从事HIV/AIDS诊断、治疗、护理、预防、检验、管理工作过程中,暴露于含有HIV的血液、体液和实验室培养液,即暴露于含有HIV的液体等引起的危害。7.2HIV/AIDS的职业暴露后预防HIV/AIDS的职业暴露后预防(PostexposureProphylaxis,PEP)应包括急救、对暴露级别的评估、暴露源严重程度的评估、预防性用药的推荐处理方案、报告与保密。,暴露源暴露于艾滋病病毒的潜在污染源包括:血液、血性体液、精液、阴道分泌物、脑脊液、胸膜液、腹水、心包液、滑膜液、羊水和组织或病毒培养液。对HIV检测实验室来讲,最重要而常见的HIV来源是血液、含血液的各种体液和含有高滴度HIV的实验室培养物。对临床工作者来讲,最常见的暴露源是血液。,暴露途径皮肤损伤:针刺损伤注入了HIV感染的血液,是医疗卫生机构中发生HIV感染的主要途径,皮肤的切割伤也较为常见。完整的皮肤接触HIV,感染HIV的危险性相当低,至今尚未见报道有经此途径感染者。粘膜暴露:粘膜接触HIV或含有HIV的血液、羊水等溅入眼、鼻等部位。,增加感染的危险因素接触血液量大受损伤口深造成伤口的器械上有明显的血迹器械曾插入静脉或动脉内(采血的针头)暴露于AIDS晚期患者或病人处于窗口期粘膜皮肤HIV培养物,美国23项研究表明:医务人员被HIV污染的针具刺伤后,HIV感染几率为20/6135(0.33%);美国CDC对1981-1992年全美国暴露于HIV的约5万医务人员进行统计,其中32人属于职业暴露感染HIV,其概率约为6.4/万。粘膜表面暴露的感染率为1/1143(0.09%)皮肤暴露的2712例无一例感染。,科室和工种确认因职业暴露可能因职业暴露感染例数感染例数牙科工作人员07尸体防腐人员03急诊室工作人员010健康助理112维修工人17临床实验室技术人员1616非临床实验室技术人员30各科护士2027内科医生611外科医生04呼吸治疗师12透析技师12外科技术员21其它技术员及治疗师05其它卫生工作人员01合计51108,表美国医务人员职业暴露后感染HIV的科室分布,2005年HIV职业暴露系统分布,2003年全国HIV职业暴露方式,暴露后的处理现场紧急处理事故评估预防用药事故报告与登记随访,意外和事故的紧急处理措施发生意外事故时,应立即进行紧急处理,并报告实验室负责人。1.皮肤针刺伤或切割伤:立即用肥皂和大量流水冲洗,尽可能挤出损伤处的血液,用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。2.皮肤污染:用水和肥皂冲洗污染部位,并用适当的消毒剂浸泡,如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。3.粘膜污染:用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。4.衣物污染:尽快脱掉污染的衣物,进行消毒处理。5.污染物泼溅:发生小范围污染物泼溅事故时,应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时,应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况,确定消毒的程序。,紧急报告,向所在单位有关领导向当地疾控中心(防疫部门)报告及早报告,作好处理,咨询与宣传,稳定情绪了解全过程后分析感染可能性提供相关知识防止传播向有关领导宣传,做好保密,妥善处理暴露者,步骤1:确定暴露级别,暴露物是否是体液、含血体液、其他污染物或其沾染器械,是,否,不需PEP,血液或含血体液,脑脊液,HIV培养物,刺、割伤皮肤,粘膜或可能有损伤的皮肤,只沾污完整的皮肤,不需PEP,危险度,低危表皮擦伤、针刺等,高危伤口较深、见血液等,2级暴露,3级暴露,暴露量,量小暴露时间短,量大暴露时间长,2级暴露,1级暴露,不需PEP,其他污染物粪,尿,呕吐物等,(二)评估:1、对暴露者的评估2、对污染源的评估:污染源要检测HIV,以及主要的血源性病原体。暴露于HIV的潜在污染源包括:血、血性体液、精液、阴道分泌物、脑脊液、胸膜液、腹水、心包液、滑膜液、羊水和组织或病毒培养液。,暴露级别的评估要素,损伤程度创伤大小、深浅、有无出血、有无刺破静脉或动脉暴露物质的类型血液,含血体液,精液,阴道分泌物,脑脊液,关节液,胸腹水,心包液,羊水,组织,HIV培养物,污染HIV的器具等皮肤粘膜完整性皮炎,皲裂,刮擦破损,咬伤皮肤粘膜与HIV污染性材料接触的时间和面积局部处理质量源病人状况,步骤2:确定HIV暴露源头严重程度,传染源的HIV情况,HIV阴性,HIV阳性,传染源不明,不需PEP,传染源HIV滴度低无症状,CD4高,传染源HIV滴度高有症状,CD4低,HIV暴露级别1(轻度),HIV暴露级别2(重度),HIV暴露级别不明,(三)预防性药物治疗,HIV感染建立的过程,病毒经黏膜或皮肤破损进入体内感染黏膜或皮肤层树突状细胞病毒于24小时内在树突状细胞繁殖病毒于24-28小时到达局部淋巴结病毒于5天内出现在外周血液中每个感染细胞可产生5000个病毒颗粒,每人每天可产1010病毒如无治疗,外周血病毒载量持续升高,随病程发展,1、用药时间:72小时内(2小时内最好),72小时仍主张用药,2、预防性药物治疗方案(1)基本用药程序:两种逆转录酶抑制剂,使用常规治疗剂量,连续服用28天。如双汰芝(AZT与3TC联合制剂)300mg/次,每日2次,用药时间为连续服用28天。或参考抗病毒治疗指导方案。本程序适用于轻度低危暴露。,PEP治疗程序,连续服药4周基本PEP治疗程序AZT+3TC(或双汰芝)首选组合ddI+d4Td4T+3TC强化PEP治疗程序AZT+3TC+IDV(首选组合)基本药物+EFV(耐PI)基本药物+Kaletra基本药物+ABC,应用PEP的理由,HIV感染的致病机理,尤其早期感染的时限(PHI发生有一定时间)应用抗病毒药物预防或者改善感染的生物学可能性药物疗效的直接或间接证据权衡应用这类药物的危险性和利益,服用药物的时间原则上:越快越好2小时内最好尽可能在24小时内服药暴露后3天,甚至1周仍然主张用药暴露后预防药物由各地CDC负责,(四)事故报告与登记1、重大事故在紧急处理的同时要立即向主管领导和有关专家报告,主管领导和有关专家要立即到现场对处理方法具体指导,以获得正确的处理。详细记录事故发生的时间、地点及经过;暴露方式;损伤的具体部位、程度;接触物种类(培养液、血液或其他体液)和含有HIV的情况;处理方法及处理经过(包括赴现场专家或领导活动).,2小型事故可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法一并报告主管领导和有关专家,以及时发现处理中的疏漏之处,使处理尽量完善妥当。不一定进行暴露后预防用药,但要定期检测HIV抗体,检测时间同前。,(五)随访1、暴露后咨询2、暴露后6周、12周、6个月、12个月检测抗体抗原检测核酸检测3、用药情况、首次用药时间(暴露后几小时或几天)、药物毒副作用情况(包括肝肾功能化验结果)、用药的依从性状况。,保密和报告制度(1)保密:无论职业暴露、重大事故或小型事故,对涉及的职业暴露者,均应注意
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