五章节巴比妥类药物分析.ppt

第五章巴比妥类药物的分析,主讲：梁洁,巴比妥类药物是一类临床常用的催眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒。因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析，有时也需要对生物样品中微量巴比妥类药物进行分析。,本章重点介绍：一、化学结构与性质（化学性质与分析方法间的关系）二、鉴别试验三、含量测定,一、巴比妥类药物的结构剖析,5,5取代的巴比妥类药物,1,5,5取代的巴比妥类药物,5,5取代的硫代巴比妥类药物,巴比妥类药物的基本结构通式,5,5-取代的巴比妥类药物,Barbital,Phenylbarbital,Secobarbital,戊巴比妥,环己烯巴比妥,1,5,5-取代的巴比妥类药物,己琐巴比妥,5,1,硫代巴比妥类药物,区别各种巴比妥类药物,环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性,1.环状母核部分,2.取代基部分,结构特征,1.白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点。,2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。,（一）物理性质,二、巴比妥类药物的理化特征,（二）化学性质,巴比妥类药物分子结构中都有1,3-二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成水溶性的盐类。,1.弱酸性,与强碱的成盐反应：,2.水解反应（1）巴比妥类药物的水解：其基本结构中具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解产生氨气。,（2）巴比妥类钠盐的水解：在吸湿的情况下，本类药物的钠盐也能水解成无效物质。,R1COONa,R2CONHCONH2,C,CHCONHCONH2,3.与重金属离子反应,（1）与银盐的反应,（2）与铜盐的反应（Zwikker反应）酰亚胺结构溶于吡啶时，易发生烯醇化异构现象。烯醇化结构与铜吡啶试液作用，生成稳定的配位化合物。,（3）与钴盐反应（Parri试验）反应条件:无水条件常用试剂：无水乙醇或甲醇，醋酸钴、硝酸钴或氧化钴；碱性：异丙胺或吡啶。,（4）与汞盐的反应（多发生在1位）与硝酸汞或氯化汞试液反应，生成白色汞盐沉淀，沉淀能溶于氨试液中。,HgNO3,NH3H2O,沉淀溶解,4.与香草醛（Vanillin）的反应分子结构中丙二酰脲基团中的氨比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。,（1）巴比妥类药物酸性溶液：5，5-二取代、1，5，5-三取代均无吸收。,巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离的程度有关。,5.紫外吸收光谱特征,pH10的碱性溶液：5，5-二取代、1，5，5-三取代均在240nm处有最大吸收pH13的强碱性溶液：5，5-二取代在255nm处有最大吸收；1，5，5-三取代在240nm处有最大吸收。,H2SO4溶液(0.05mol/L)pH9.9缓冲溶液NaOH溶液(0.1mol/L)(pH13),巴比妥类药物的紫外吸收光谱,nm,（2）含硫巴比妥类酸性溶液、碱性溶液中均有明显紫外吸收峰。,硫喷妥的紫外吸收光谱HCl溶液(0.1mol/L)NaOH溶液(0.1mol/L),nm,6.薄层色谱行为特征（1）薄层色谱法（2）高效液相色谱法,7.显微结晶（1）药物本身的晶型（2）反应产物的晶型,一、与重金属离子反应（丙二酰脲类鉴别试验）,苯巴比妥ChP（2000）【鉴别】（1）本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录）,取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10m1，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。,1.与银盐的反应,附录一般鉴别试验,取供试品约50mg，加吡啶溶液（110）5m1，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜4g，水90ml溶解后，加吡啶30m1，即得）1m1，即显紫色或生成紫色沉淀。,2.与铜盐的反应,二、测定熔点1司可巴比妥钠的鉴别2苯巴比妥钠的鉴别3巴比妥的鉴别,三、利用特殊取代基或元素的鉴别试验1利用不饱和取代基的鉴别试验（1）与碘试液的反应：与碘（或溴）试液发生加成反应，使其颜色消褪。（2）与高锰酸钾的反应：与高锰酸钾在碱性溶液中反应，使紫色KMnO4还原为棕色的MnO2。,2利用芳环取代基的鉴别试验（1）硝化反应（与硝酸钾、硫酸共热，生成黄色的硝基化产物）（2）与硫酸-亚硝酸钠的反应（苯环上的亚硝基化反应，生成桔黄色产物）（3）与甲醛-硫酸的反应,3、硫元素的鉴别试验,巴比妥类药物分子结构中含有硫的药物，经有机破坏后硫元素转化为无机硫离子，再与铅离子反应生成PbS黑色沉淀。,(一)苯巴比妥的特殊杂质检查1酸度2溶液的澄清度3中性或碱性物质,四、特殊杂质检查,(二)司可巴比妥钠的特殊杂质检查1溶液的澄清度2中性或碱性物质,一、银量法基于巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，可与银离子定量成盐的性质，采用银量法测定本类药物及制剂的含量。,五、含量测定,原理：,终点指示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示,反应摩尔比（11）溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠,凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。如司可巴比妥钠及其胶囊的测定原理为：,二、溴量法,1.原理,1.在水醇混合溶剂中的滴定法弱酸性pKa7.3-8.4,异戊,水醇,溶解,麝香草酚酞,N,a,O,H,淡蓝色,三、酸碱滴定液法,2胶束水溶液中的测定方法本法是在有机表面活性剂的胶束水溶液中进行进行滴定，用指示剂或电位法指示终点。,溶剂：二甲基甲酰胺滴定剂：甲醇钠（钾）指示剂：麝香草酚蓝,3.非水溶液滴定法,四、UV,（一）直接紫外分光光度法,本法是将样品溶解后，根据溶液的pH值选用其相应的max处进行直接测定。（二）经提取分离后的紫外分光光度法,1.吸收系数法,0,C1C2C3C4CXC5C,A5,AX,A4,A3,A2,A1,A,2.标准曲线法,3.对照法,取两份相等的供试溶液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱或缓冲液改变溶液的pH，或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差值（A值）。,（三）差示分光光度法（A法）,1.测定方法,2.必要条件,（1）供试品在不同的化学环境中以不同的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的差异。（2）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。,供试品在两种不同的化学环境中分别以x、y表示，干扰物用z表示,3.定量依据,即，吸收度差值（A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。,可用对照法或标准曲线法定量,保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。,4.特点,五、高效液相色谱法1色谱条件2样品预处理3线性范围和最底检测限4、回收率与精密度试验,