苦参碱缓释片的制备及其释放度研究.doc

苦参碱缓释片的制备及其释放度研究【摘要】 目的 制备苦参碱缓释片并考察其释放度。方法 以羟丙基甲基纤维素和乙基纤维素为骨架材料，制备了1天给药2次的苦参碱缓释片，并进行体外累积释放度测定。结果 苦参碱缓释片体外释药曲线符合Higuchi方程，r=0.999 0。结论 该缓释片处方工艺简单可行，缓释效果明显。 【关键词】 苦参碱缓释片；释放度；制备工艺；Higuchi方程Abstract:Objective To prepare matrine sustainedrelease tablets and evaluate its release characteristics. Methods The matrine sustainedrelease tablets was prepared with HPMC and EC . The release rate of sustainedrelease tablets was tested by HPLC method. Results The release curve of matrine sustainedrelease tablets conformed to Higuchi formula, with r=0.999 0. Conclusion The method was simple and feasible, and the product had obvious sustainedrelease effects. Key words:matrine sustainedrelease tablets; release rate; Higuchi formula 苦参碱是从豆科植物苦参苦豆子、广豆根等分离出来的四环的喹诺里西啶类生物碱。其具有抑制乙型肝炎HbeAg复制，改善病理性肝炎症状与体征，抗癌、抗心律失常、抗肝纤维化、免疫抑制、抗炎、抗高血压血管重构等药理作用1。临床使用的苦参碱制剂以注射剂为主，其消除半衰期只有76 min，如果制成普通片，每日需口服34次，给治疗及患者带来诸多不便。为方便患者用药，减少服药次数，方便患者的使用并降低药物不良反应的发生率，本文研制成含主药200 mg/片的苦参碱缓释片，1天给药2次，使其缓慢释出苦参碱，延长达峰时间，血药浓度变化平缓，以达到更好的治疗效果。 1 试药与仪器 苦参碱(内蒙古启源药业有限责任公司)；苦参碱对照品（批号110805-200306，中国药品生物制品检定所）；羟丙基甲基纤维素（HPMC，K4M，Colorcon公司）；乳糖（新西兰乳糖有限公司）；乙基纤维素（EC，上海峰鹤化工有限公司）；RCZ6C型药物溶出度仪（上海黄海药检仪器有限公司)；TDP1.5型单冲压片机（中南制药机械厂）；HP1100高效液相色谱仪：紫外检测器、自动进样器（安捷伦公司）。 2 方法与结果 2.1 苦参碱缓释片的制备 将苦参碱、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、乳糖均过60目筛，加入适量黏合剂进行湿法制粒，40 烘干，整粒，加入适量润滑剂，混合，压片。 2.2 缓释片含量测定方法 2.2.1 色谱条件2 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.5）甲醇（体积比 9010）为流动相；检测波长为210 nm。 2.2.2 测定方法 取样品10片，用研钵研细，精密称取适量(约相当于苦参碱50 mg)，置100 mL量瓶中，加甲醇80 mL，超声振荡使苦参碱溶解,用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液适量，加流动相制成每1 mL中约含苦参碱100 g的溶液，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1 mL中约含100 g的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法中国药典2005年版二部（附录V D）测定。精密量取供试品溶液与对照溶液各20 L分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。 2.3 缓释片体外释放度测定方法 2.3.1 标准曲线的制备 精密称取适量的苦参碱对照品2份，分别用0.1 mol/L盐酸溶液和pH6.8磷酸缓冲液溶解，制成1.022 mg/mL和0.988 mg/mL的对照品贮备液备用。精密吸取1.022 mg/mL苦参碱对照品储备液，分别配制成20.4、51.1、102.2、163.5、204.4、255.5 g/mL的对照品溶液；精密吸取0.988mg/mL苦参碱对照品储备液，分别配制成19.8、49.4、98.8、158.1、197.6、247.0 g/mL的对照品溶液。按“2.2”项的色谱条件和方法进行测定。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作回归曲线，回归方程为A=36.491C+3.449，r=0.999 9和A=35.774C-7.219，r=0.999 9。 2.3.2 回收率和精密度试验 精密称取苦参碱对照品及处方量辅料，分别用0.1 mol/L盐酸溶液和pH6.8磷酸缓冲液配制成高、中、低3个浓度的溶液各6份，滤过。按“2.2”项的色谱条件和方法进行测定。日内、日间反复进样检测，考察日内与日间差。以测得量与加入量比较，计算回收率及精密度。平均回收率分别为（99.530.42）%和（99.680.38）%；日内RSD分别为0.65%和0.67%（n=6）；日间RSD分别为0.94%和0.55%（n=6），均符合要求。 2.3.3 体外释放度测定 取本品6片，照释放度测定法中国药典2005年版二部（附录D第一法），采用溶出度测定法（附录C）第一法的装置，前2 h以0.1 mol/L盐酸溶液750 mL为溶出介质，2 h后在上述酸液中加入0.2 mol/L磷酸钠溶液250 mL，继续运转；转篮转速为100 r/min；温度（370.5）。依法操作，在1、2、4、8、12 h分别取溶液5 mL，滤过，并即时向溶出杯中补充溶出介质5 mL。按“2.2”项的色谱条件和方法进行测定。 2.4 处方筛选 在多次预试验的基础上，确定HPMC、EC、乳糖为考察的3个因素，每个因素取3个水平（见表1），以释放度为考察指标，采用正交L9(34 )实验，优化配方。评价指标：设Q为期望值,(Q2h-30)2+(Q4 h-50)21/2反映了2 h和6 h时的释放度的偏差，此偏差愈小结果愈佳；12 h时应释放90%以上，Q愈大结果愈佳，故令综合评分=Q12h-(Q2 h-30)2+(Q4 h-50)21/2100，以此综合评分评价苦参碱缓释片的体外释放情况3-4。结果见表2、表3。表1 正交设计因素水平表表2 L9(34 )正交设计表 表3 正交试验方差分析方差来源离差平方和自由度均方FP值A915.02457.567.0<0.05B201.62100.814.8C32.3216.24.6误差13.72 方差分析结果表明：羟丙基甲基纤维素对苦参碱的释放有显著影响，乙基纤维素及乳糖对苦参碱的释放无影响。结合直观分析，3种辅料对苦参碱缓释片的体外释放的影响顺序为：羟丙基甲基纤维素乙基纤维素乳糖。 综合分析认为：处方5为最佳处方，即以20%羟丙基甲基纤维素、6%乙基纤维素、12%乳糖制备的苦参碱缓释片，2 h释药约30%，4 h释药约50%，12 h释药90%以上，释药缓慢且较均匀，符合设计要求。 2.5 体外释药模型拟合 按“2.3.3”项下的方法测得6片苦参碱缓释片的平均累积释药百分度分别为：1 h 为17.90%，2 h为32.21%，4 h为53.08%，8h为81.34%，12 h为98.71%。经拟合其释药模型符合Higuchi方程，y=33.169x-14.379，r=0.999 0。 2.6 转篮转速对缓释片释放度的影响 按“2.3.3”项的方法进行试验，转篮转速分别为50、100、150 r/min，释放度结果见图1。结果表明：转篮转速对释放度有一定影响，释放度随转篮转速的增大而逐渐增大。 2.7 处方工艺的重现性 取不同批号的3批苦参碱缓释片，按“2.3.3”项的方法进行试验，释放度结果见图2。结果表明3批苦参碱缓释片的释放度没有显著差异，表明本处方工艺的重现性较好。 2.8 稳定性试验 将苦参碱缓释片置洁净容器中，分别于60 和40 恒温烘箱内，以及装有日光灯的光照箱中，照度为（4 500500）LX的条件下放置10 d，于第3 d、5 d和10 d取样观察并进行体外释放度试验；将苦参碱缓释片在室温放置6个月，在试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样观察并作体外释放度试验。结果在室温环境中的苦参碱缓释片较稳定，释放度无显著变化；而贮存于40 、60 及强光照环境中的苦参碱缓释片释放度虽无显著变化，但显微黄色。结果表明苦参碱易氧化，不宜存放在温度较高及有强光照射的地方，因此本品适宜存放阴凉干燥处。 3 讨 论 3.1 采用HPMC和EC作为骨架材料，处方工艺简便，制得的缓释片缓释效