荔枝草抗炎作用的实验研究.doc

荔枝草抗炎作用的实验研究 作者：马瑜红，李玲，欧阳静萍， 马婉姝 【摘要】 目的观察荔枝草的抗炎作用。方法通过二甲苯导致小鼠耳肿胀实验、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀实验、抗棉球肉芽肿实验及对小鼠毛细血管通透性的影响观察荔枝草的抗炎作用。结果荔枝草能减轻二甲苯所致的耳廓肿胀;能减轻角叉菜胶致小鼠足趾肿胀；减轻小鼠包埋棉球所致的慢性肉芽肿；降低小鼠毛细血管通透性。结论荔枝草具有抗炎作用。 【关键词】 荔枝草 抗炎作用Experimental Study on the Anti-inflammatory Effect of Herba Salviae PlebeiaeAbstract：ObjectiveTo investigate the anti-inflammatory effects of Herba Salviae Plebeiae.MethodsTo observe Herba Salviae Plebeiaes anti-inflammatory effect through the models of auricular edema induced by dimethyl benzene, paw edema induced by carrageenin ，cotton ball granuloma and permeability of celiac blood capillary of mice .ResultsHerba Salviae Plebeiae had good preventive action to auricular edema induced by dimethyl benzene, paw edema induced by carrageenin, cotton ball granuloma and exudation of celiac blood capillaries of mice .ConclusionHerba Salviae Plebeiae has anti-inflammatory effects.Key words：Herba Salviae Plebeiae； Anti-inflammatory effects 荔枝草（Herba Salviae Plebeiae），又名癞蛤蟆草、虾蟆草、凤眼草等，全草含高车前苷（homoplantaginin） 、粗毛豚草素(hispidulin)、咖啡酸(caffeic acid)等化合物，味苦、辛，性凉。归肺、胃、肾经。有清热解毒，凉血散瘀，利水消肿等功效1。临床及民间用于治疗急性扁桃体炎、慢性气管炎、阴道炎等，均取得较好疗效，但未见其抗炎作用的实验研究。本实验对荔枝草进行了体内抗炎作用研究并初步探讨其抗炎作用机制，以期为进一步开发利用荔枝草提供实验依据。1 材料与仪器1.1 动物昆明种小鼠，雌雄兼用，体重（202）g，由南阳理工学院医学院动物饲养中心提供。1.2 药物及提取 荔枝草(Herba Salviae Plebeiae) 采自67月间田间、地头、沟畔，将鲜草的地上部分洗净后晾干备用。荔枝草由我校生药学高级讲师杨转云鉴定。实验前加10倍水浸泡30 min ，煎煮提取2次，2 h/次，合并提取液，醇沉时间72 h，醇沉浓度为60%2， 浓缩成含鲜药材1.0 kgL-1的合剂，置冰箱冷藏室备用。1.3 试剂 二甲苯（湖北沙市化工试剂厂生产，批号20000304），冰醋酸(河南开封化工厂生产,批号20040905) ，醋酸地塞米松片（天津天药药业有限公司，批号 060401）。1.4 仪器LDZ5-2离心机(北京医用离心机厂)，754紫外-可见分光光度计(上海精科)，1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器公司），FA1004N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂)。1.5 统计方法数据以 s表示，总体间用单因素资料方差分析，两组间比较采用t检验。2 方法及结果2.1 对二甲苯诱导小鼠耳肿胀的实验3取健康昆明种小鼠40只，雌雄各半，称重，随机分为4组，每组10只，即阴性对照组(生理盐水组)，荔枝草提取液高、低剂量组(50，25 g/kg), 阳性对照组(地塞米松,0.01 g/kg)。以上各组给药方法均为灌胃，1次/d，连续3 d。末次给药后1 h，以30 l二甲苯涂于小鼠右耳两面致炎，左耳不涂，致炎后60 min处死小鼠。分别在左、右耳同一部位用直径9 mm的打孔器打下圆形耳片，精密称重，以左右耳片间重量差作为肿胀度，数据进行组间t检验。 结果表明，二甲苯诱导的小鼠耳明显肿胀，与生理盐水组比较，荔枝草提取液高剂量组对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有抑制作用(P<0.05)。结果见表1。表1 荔枝草提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（略）与生理盐水组比较，P0.05, P0.05 ；n=102.2 对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的作用4取小鼠40只，称重，分组及给药剂量同“2.1”项，阳性对照组用地塞米松0.01 g/kg，阴性对照组给予生理盐水，连续5 d。末次给药后1h，在每鼠右侧足跖皮下注射1%角叉菜胶0.05 ml，5 h后沿踝关节剪下左右两足，称重，以左侧足为正常对照，求肿胀度(左右足重量差值)和抑制率。 抑制率（%）=（空白对照组肿胀度均值用药组肿胀度均值）/空白对照组肿胀度均值100% 结果表明，荔枝草提取液高剂量组能明显抑制角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀（P0.01），较地塞米松组弱；荔枝草低剂量组与生理盐水组比较无显著性差异(P0.05)。结果见表2。 表2 荔枝草提取液对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀度的影响（略）与生理盐水组比较，*P0.01, P0.05 ；n=102.3 抗棉球肉芽肿的实验 小鼠40只，称重，分组及给药剂量同“2.1”项，阳性组给予醋酸地塞米松(0.01 g/kg)，阴性对照组给予生理盐水。动物麻醉后，将已高压灭菌过的5 mg棉球植入腋下，缝合切口后外涂青霉素溶液抗感染。次日各组小白鼠分别灌胃给予相应的药物，1次/d ,连续给药7 d，第8天处死小鼠，剥离肉芽组织的棉球，60烘烤12 h，称重，计算肉芽重量。 肉芽重量=带肉芽组织的棉球重量-棉球原始重量 结果表明，荔枝草高剂量组能明显抑制小鼠棉球肉芽肿的生长,与生理盐水对照组比较,差异显著(P0.01),作用较地塞米松组弱；荔枝草低剂量组与生理盐水组比较无显著性差异(P0.05)。结果见表3。表3 荔枝草提取液对小鼠棉球肉芽肿的影响（略）与生理盐水组比较，*P0.01, P0.05 ；n=102.4 对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响5小鼠40只，称重，雌雄各半，分组及给药剂量同“2.1”项，ig给药，连续7 d。末次给药后1.5 h，尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1 ml/10 g，10 min后ip0.7%冰醋酸0.1 ml/10g，20 min后脱颈椎处死小鼠，每只ip生理盐水5 ml，轻揉腹部3 min，从腹腔中收集腹腔洗出液3 ml(冲洗液如被血液污染，则弃去不用)，1 000 r/min离心5 min，取上清液用754紫外-可见分光光度计，于=590 nm处测吸光度(A)值。结果表明，荔枝草高剂量组能明显抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加（P0.01）, 低剂量组与生理盐水组比较无显著性差异(P0.05) 。结果见表4。表4 荔枝草提取液对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（略）与生理盐水组比较，*P0.01, P0.05 ；n=103 讨论 各种组织发生的以多种原因引起炎症，其基本病理变化都包括变质、渗出和增生三项。一般来说，炎症早期，主要表现是毛细血管扩张、通透性增加、渗出和水肿；炎症中期以血小板黏附及白细胞游走为特点，与免疫反应紧密相关；而慢性炎症或炎症的后期则以纤维组织增生、肉芽屏障形成等为特点6。