人手及物体初始菌检验方法的验证21CA.doc

人手及物体初始菌检验方法的验证1、 验证目的：通过验证后进行确认检验方法，适用于人手、物体的初始污染菌检验。2、验证依据：a) GB15981-1995消毒与灭菌效果的评价方法与标准b) GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准3、小组成员与职责序号姓名部门分工1张兴雨总经理方案及报告审核2张英计质部操作试验3王宇计质部数据统计与记录4王雪儿计质部仪器计量检定4、 基本条件：a) 试验设备：生化培养箱、灭菌锅、冰箱、电炉、玻璃仪器、超净工作台。b) 试剂条件：营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、纯化水、金黄色葡萄球菌。5、 验证方案：A、生产人员手试验：l 手经初始污染菌取样后，立即取样验证，连续5次l 被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦面积约 30cm2)，并随之转动采样棉拭子l 剪去操作者手接触部位，将棉拭子放入10mL灭菌生理盐水中，用力振荡80次l 分3个梯度稀释，各取1mL放于平板内，倾注营养琼脂培养基（每个稀释度倾注2块平板），在37培养24小时，观察结果，取菌落数为30300的平板计数菌数/每只手=平均菌数稀释倍数B、洁净区表面试验：l 经初始污染菌取样后的区域，立即取样，连续5次l 用浸有无菌生理盐水的棉拭子在25cm2的范围内涂抹2次（往返算1次）l 剪去操作者手接触部位，将棉拭子放入10mL灭菌生理盐水中，用力振荡80次l 分3个梯度稀释，各取1mL放于平板内，倾注营养琼脂培养基（每个稀释度倾注2块平板），在37培养24小时，观察结果，取菌落数为30300的平板计数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）6、 结果判定：l 生产人员手150cfu/每只手l 物体表面细菌总数5cfu/cm27、 验证结论：通过以上验证数据，第一次比初始菌的数量少或没有，第二次没有。复核人员: 报告时间: 年 月 日8、 验证记录：A、生产人员手试验：试验方法：被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦面积约 30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子放入10mL灭菌生理盐水中，用力振荡80次，分3个梯度稀释，各取1mL放于平板内，倾注营养琼脂培养基，在37培养24小时，观察结果检测对象：生产人员手1一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/每只手=平均菌数稀释倍数=检测对象：生产人员手2一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/每只手=平均菌数稀释倍数=检测对象：生产人员手1二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/每只手=平均菌数稀释倍数=检测对象：生产人员手2二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/每只手=平均菌数稀释倍数=B、洁净区表面试验：试验方法：用浸有无菌生理盐水的棉拭子在25cm2的范围内涂抹2次（往返算1次），剪去操作者手接触部位，将棉拭子放入10mL灭菌生理盐水中，用力振荡80次，分3个梯度稀释，各取1mL放于平板内，倾注营养琼脂培养基，在37培养24小时，观察结果：检测部位：工作台面 一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=52.52/25=4.2检测部位：墙面 一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=检测部位：工位器具 一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=检测部位：生产设备直接接触零件的面 一次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=检测部位：工作台面 二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=52.52/25=4.2检测部位：墙面 二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=检测部位：工位器具 二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=检测部位：生产设备直接接触零件的面 二次稀释倍数平板1平板2平均菌数菌数/cm2=平均菌数稀释倍数/采样面积（cm2）=单项试验结论：运用擦拭方法对人手与物体进行取样，取样方法得当