《生物化学实验》教学大纲

生物化学实验课程教学大纲一、课程基本情况课程名称（中文）：生物化学实验课程名称（英文）：Biochemical experiment 课程代码： 学 分：0.5总 学 时：24理论学时：实验学时；24课程性质：学科专业基础课适用专业：园艺适用对象：本科先修课程：生物化学考核方式：实际操作占20、实验报告占50、技能考核占30教学环境：实验室开课学院：生态技术与工程学院（一）课程简介：生物化学实验课程是生命科学教学中重要的基础课，主要围绕生物体的组成成分如：蛋白质，核酸，酶等生物大分子的基本性质等方面入手，帮助学生掌握生物化学的基本实验方法和技能，包括层析、比色、电泳、生化物质的分离、制备、分析和鉴定及实验方法、操作技术和一些基本仪器的原理和使用，培养学生基本实验技能，提高综合分析问题的能力。（二）实验目的和要求：通过本课程的教学使学生了解和掌握现代生物科学研究对本课程的需求，了解生物化学技术的基本原理、方法和技能，包括生物物质的性质鉴定、含量测定、生化分离技术的分离原理（包括盐析、等电点分离技术、电泳技术、色谱技术等）。通过学生的独立实验设计和实践，训练学生分析问题和解决问题的能力及实际动手能力，同时培养学生的创新思维及对生命科学探索的兴趣和爱好。要求学生课前预习，写好预习报告，实验过程中仔细观察，认真记录，课后做实验报告。（三）实验项目列表：实验编号实验项目名称实验类型实验学时要求实验一生物化学实验基本知识蛋白质及氨基酸的呈色反应验证2必开实验二蛋白质等电点测定和沉淀反应设计性3必开实验三纸层析法分离鉴定氨基酸综合性3必开实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白综合性3必开实验五蛋白质的定量测定（紫外分光法）综合性3必开实验六总氮量的测定-微量凯氏定氮法综合性3必开实验七酵母RNA的分离及组分鉴定综合性3必开实验八菜花中核酸的分离和鉴定设计性4必开实验九酶的特性综 合性2必开实验十小麦萌发前后淀粉酶活力的比较三性4必开实验十一维生素C的提取及定量测定综合性4必开实验一 生物化学实验基本知识 蛋白质及氨基酸的呈色反应学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：1 了解实验室规则和常用生化仪器名称，掌握实验记录与实验报告的写法以及实验室一些基本知识，掌握缓冲溶液的配制方法，初步掌握一些仪器的正确操作。2 掌握鉴定蛋白质的原理和方法。（三）实验内容： 蛋白质和氨基酸与一些显色剂反应呈现一定的颜色反应。（四）要 求： 通过实验了解蛋白质的一些颜色反应，掌握鉴定蛋白质的方法。（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验二 蛋白质等电点测定和沉淀反应学时：3 （一）实验类型：设计性（二）实验目的：1 熟悉蛋白质的沉淀反应。2 进一步掌握蛋白质的有关性质3 了解蛋白质的两性解离性质。4 学习测定蛋白质等电点的一种方法。（三）实验内容：蛋白质的沉淀和变性，蛋白质的等电点的测定（四）要 求：了解各种沉淀试剂使蛋白质沉淀的实质和区分可逆的盐析沉淀及不可逆的沉淀作用。掌握测定蛋白质等电点的方法。（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验三 纸层析法分离鉴定氨基酸学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法（三）实验内容：以滤纸为支持物，样品在不同溶剂系统中分配系数不同，将各种氨基酸分离，并用茚三酮染色，分析计算移动速率，鉴定氨基酸的种类。（四）要 求：掌握氨基酸纸层析的实验原理，并鉴定混合液中的氨基酸组分。（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验四 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法，了解电泳技术的一般原理（三）实验内容：以醋酸纤维薄膜为支持物进行电泳，血清中各种蛋白质在电场中移动速率不同，可利用电泳法将它们分离。（四）要 求：掌握电泳分离血清蛋白质的方法（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验五 蛋白质的定量测定（紫外吸收法）学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：了解紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理 熟悉紫外分光光度计的使用（三）实验内容：本实验根据蛋白质组成中芳香族的氨基酸在紫外光280nm波长处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，用紫外分光光度计通过比色法绘制标准曲线，测定溶液中蛋白质的浓度。（四）要 求：掌握蛋白质的定量测定的方法，掌握紫外分光光度计的使用方法（五）每组人数：4人（六）主要仪器设备及配套数：T6紫外可见分光光度计 2套（七）所属实验室：生物化学实验室实验六 总氮量的测定-微量凯氏定氮法 学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法学会使用凯氏定氮仪（三）实验内容：用凯氏定氮法测定样品中蛋白氮的含量，并进一步求得样品中蛋白质的含量。（四）要 求：掌握凯氏定氮仪的使用方法，学会测定蛋白质含量的一种方法。（五）每组人数：4人（六）主要仪器设备及配套数：凯氏定氮仪 6套（七）所属实验室：生物化学实验室实验七 酵母RNA的分离及组分鉴定学时： 3 （一）实验类型：综合性（二）实验目的：了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸和测定RNA含量的方法（三）实验内容：酵母核酸中RNA含量较多，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使核糖核酸沉淀，得到RNA粗制品，继而用苔黑酚法测定RNA 的含量（四）要 求：掌握稀碱法提取酵母RNA 的方法，掌握用苔黑酚法测定RNA含量的方法。（五）每组人数：4人（六）主要仪器设备及配套数：TDZ5-WS台式离心机 2套 T6紫外分光光度计 2套（七）所属实验室：生物化学实验室实验八 菜花中核酸的分离和鉴定 学时： 3 （一）实验类型：设计性（二）实验目的：学习和掌握从菜花中分离核酸的原理和操作技术（三）实验内容：用冰冷的稀三氯醋酸和稀高氯酸溶液在低温下抽提菜花匀浆，以除去酸溶性小分子，再用有机溶剂抽提去掉脂溶性物质，最后用浓盐溶液和高氯酸分别提取DNA和RNA，再进行定性和定量测定。（四）要 求：自行设计实验并掌握从组织中分离核酸的方法，并能进行定性定量测定。（五）每组人数：4人（六）主要仪器设备及配套数：TDZ5-WS台式离心机 2台（七）所属实验室：生物化学实验室实验九 唾液淀粉酶的性质 学时：3（一）实验类型：综合性（二）实验目的：了解温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活力的影响 学习测定酶的最适温度、最适pH的方法（三）实验内容：本实验以唾液淀粉酶对淀粉及蔗糖的催化作用,观察酶的专一性.以淀粉及蔗糖的酶水解产物与Benedict试剂的颜色反应观察淀粉酶,蔗糖酶的专一性.由于有些物质可作为激活剂，能提高酶活性，有些物质可作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。因此，通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度，了解激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。（四）要 求：掌握酶的专一性，及温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活力的影响（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验十 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较学时：3（一）实验类型：设计性（二）实验目的：学习测定淀粉酶活力的方法了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化（三）实验内容：小麦发芽酶液提取酶活力测定酶活力计算（四）要 求：自行设计实验测定小麦萌发前后淀粉酶的活力（五）每组人数：1人（六）主要仪器设备及配套数：常规仪器 25套（七）所属实验室：生物化学实验室实验十一 维生素C的提取及定量测定 学时：3（