科研方法导论实习成绩册.doc

西南医科大学医学科研方法导论实践报告成绩册 公共卫生学院社会医学教研室2015年9月第一部分 课题申请书 总分：50分，得分： 分四川医科大学科研方法导论作业课 题 申 请 书学 科 分 类 自然科学 课 题 名 称 维生素E对万古霉素所致肾小管损伤的可逆性的研究 课 题 申 报 人 填 表 日 期 2015年11月30日 1、 选题题目：维生素E对万古霉素所致肾小管损伤的可逆性的研究研究必要性：维生素E是是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。80年代，医学专家们发现，人类如果缺乏了维生素E则会引发遗传性疾病和代谢性疾病。随着研究的深入，医学专家又认识到维生素E在防治心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病及其他并发症、中枢神经系统疾病、运动系统疾病、皮肤疾病等方面具有广泛的作用。万古霉素静脉滴注给药可用于治疗甲氧西林耐药葡萄球菌或肠球菌引起的各系统重症感染，包括心内膜炎、脑膜炎、败血症等危重感染；青霉素耐药并对其它抗菌药物均耐药的肺炎链球菌引起的危重感染；及由于长期使用抗生素并发难辨梭状芽胞杆菌引起的伪膜性肠炎；万古霉素也可用于其它对万古霉素敏感的致病菌如类白喉杆菌引起的重症感染。万古霉素对革兰阳性球菌和部分革兰阳性杆菌（如白喉杆菌，梭状芽胞杆菌)具有强大杀菌作用。各种革兰阳性球菌包括葡萄球菌属、链球菌属和肠球菌属均对万古霉素敏感。葡萄球菌属包括金黄色葡萄球菌。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA)、表皮葡萄球菌、甲氧西林耐药表皮葡萄球菌（MRSE)、溶血葡萄球菌等。表皮葡萄球菌与溶血葡萄球菌又统称凝固酶阴性葡萄球菌（CNS)。链球菌包括化脓性链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌、草绿色链球菌等。青霉素耐药肺炎链球菌及对多种抗生素耐药的多重耐药肺炎链球菌仍对万古霉素敏感。肠球菌主要包括粪肠球菌与屎肠球菌，梭状芽胞杆菌中的难辨梭状芽胞杆菌对万古霉素敏感。国外已有报道发现耐万古霉素金黄色葡萄球菌感染病例。有的国家与地区报道肠球菌对万古霉素耐药率有增高趋势。国内据1998-1999全国细菌耐药监测结果尚未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌或肠球菌，只发现这两种细菌均有对万古霉素呈中介的菌株。万古霉素对革兰阴性杆菌无抗菌活性。 万古霉素的抗菌活性作用机制主要是抑制细菌胞壁合成，万古霉素也能改变细菌细胞膜的通透性并影响RNA的合成，这种复合的作用机制使本品具有强大的杀菌作用。本品需静脉滴注给药，口服吸收差，肌内注射局部有疼痛刺激反应。肾功能正常者多次静脉滴注500mg，滴注结束时平均血药浓度达49g/ml，静滴结束后2小时平均血药浓度为19g/ml，静滴结束后6小时平均血药浓度为19g/ml。本品静脉滴注消除半衰期为5-11小时，24小时经肾小球滤过经尿排出给药量75%，肾功能障碍者半衰期延长，肾功能衰竭时半衰期长达7.5天。蛋白结合率约为50%。万古霉素自问世以来是治疗重症革兰阳性菌感染的重要用药，特别针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，是最常用的肠肽类抗生素。近年，随着抗生素的普及及滥用，导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率显著上升。万古霉素作为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌首选药被广泛使用。尽管取得了良好的疗效。但其对人体所致的不良反应不可忽略，尤其是肾毒性。已有文献报道有成人及儿童因用万古霉素所制肾毒性而死亡。而肾脏又是人体重要器官之一。万古霉素通过促进线粒体超氧化物形成，引起线粒体膜去极化，导致肾小管细胞凋亡，进而导致肾脏的损害。维生素E的抗自由基功能是由于其自身结构是一种苯骈吡喃的衍生物，在其苯环上有一个活泼的羟基，具有还原性，其次在五碳环上有一饱和的侧链，这两点决定了维生素E具有还原性和亲脂性。当自由基进入脂相，发生链式反应时，维生素E起到捕捉自由基作用。维生素E对抗自由基脂质过氧化作用的效率很高。且维生素E可以经肾脏代谢，故研究维生素E对万古霉素所制肾小管损伤的可逆性十分必要。国内外研究现状和发展趋势：由于万古霉素的肾毒性大大限制了其在临床上的应用，因此研究万古霉素的肾毒性在国内外已成为亟待解决的问题。万古霉素的肾毒性反应最初主要是所含杂质过多，曾有人称其为“密西西比泥浆”，自从1981年，提取技术的发展，万古霉素的纯度由70%提高到95%左右，大大减小了其肾毒性。但今年来文献报道，当万古霉素的谷浓度15mg/ml时，肾毒性达29.6%，甚至更高。而如果需杀灭细菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，则需要加大万古霉素的谷浓度，所以需克服万古霉素的肾毒性或者治疗其肾损伤。已有文献报道万古霉素通过促进线粒体超氧化物形成，引起线粒体膜去极化，导致肾小管细胞凋亡，进而导致肾脏的损害。而维生素E已被证实为最重要的抗氧化剂之一。研究的创新点及意义：万古霉素在人体内经过一系列的生化反应后通过肾脏排除，而其所产生的超氧化物导致肾小管线粒体损伤，故通过对损伤的抑制作用的研究，可以改善万古霉素对肾脏的毒性作用。改善万古霉素在人体的运用范围，使得万古霉素在临床上有更好的使用前景。2、 研究目标：目标：明确维生素E对治疗万古霉素所致的肾小管损伤的可逆性的作用。以期为临床万古霉素肾毒性的患者的治疗提供依据。3、 研究内容：1、 万古霉素导致肾小管损伤后运用维生素E，观察其疗效2、 取小鼠肾脏组织病理活检，观察肾小管恢复状况。4、 研究方案：应用方案：1、购买已经建模（万古霉素致小鼠肾小管损伤）小鼠：40只，随机分为甲、乙两组,其中甲组作为实验组，乙组作为对照组 2、处理： a、所有受试小鼠先喂基础饲料6g/d，连续3d。 b、运用200mg/kg的维生素E喂养实验组小鼠30天，同时每日基础饲料6g，5ml/d水；喂养对照组小鼠30天，每日基础饲料6g，5ml/d水。 c、运用维生素E15天后，每隔5天取实验组小鼠的肾脏病理活检，观察肾小管恢复情况。 d、记录实验数据及结果，进行统计学分析。 购买已经建模的小鼠具体研究方法：随机分组技术路线： 随机分组乙组甲组喂养小鼠30天，每日基础饲料6g，5ml/d水运用200mg/kg的维生素E喂养小鼠30天，同时每日基础饲料6g，5ml/d水运用维生素E15天后，每隔5天取实验组小鼠的肾脏病理活检，观察肾小管恢复情况。记录实验数据及结果，进行统计学分析。 论文写作可行性分析：本课题的实验要求简单，具有很强的操作性，适用于任何医学相关技术人员。研究方案是科学的，必要的，实验设计合理，能够明确维生素E对治疗万古霉素所致的肾小管损伤的可逆性的作用。五、项目应用前景、预期效益分析预期技术：维生素E对万古霉素所造成的肾小管损伤具有可逆性社会效益：维生素E的运用可以用来治疗万古霉素所致的肾小管损伤，使得万古霉素在临床上的应用可以更加广泛，从而可以治疗更多耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的病人。六、已有研究基础和承担优势(包括专业知识及课程、参与相关课题、社会实践、所属院系实验条件等)。前期基础：学过关于药理学、病理生理学、科研方法导论、统计学、流行病学、生物化学、分子生物学、病理、生理、基础解剖学、文献检索、超微病理、内科学、外科学的课程技术力量：郑畅可熟练掌握SPSS，EXCEL，WORD等软件，陈佳可熟练掌握文献检索，王静及陈冬梅擅长饲养小老鼠及实验操作工作条件：四台计算机预期研究成果主要阶段性进度安排序号研究阶段（起止时间）阶 段 成 果 名 称成果形式承 担 人12016年1月14日-1月16日小鼠实验组和对照组饲料基础喂养喂养22016年1月17日-2月15日实验组维生素E灌胃肾小管修复32016年1月31日-2月16日肾脏病理活检切片42016年2月20日-2月25日结果和数据处理分析数据52016年3月1日-3月20日论文写作论文经费预算序号经 费 开 支 科 目经 费 预 算金 额 （ 元 ）1资料费小鼠：40只*130元=5200；万古霉素100mg*40只*34天*288元/kg=39168；维生素E：200mg*40只*34天*43元/kg=11696；饲料：10000660642调研差旅费003小型会议费场地500；水：2007004计算机使用费4台*10小时*30天*0.4元/