荷叶离褶伞液体发酵菌株筛选研究论文.pdf

食用菌 北方 园 艺 2 0 1 4 ( 0 3 ) ： 1 3 4 1 3 8 荷叶离褶伞液体发酵菌株筛选研究 周 会 明l ，张 焱 珍h ，陈 银 辉。 ，席 亚 丽 ，魏 生 龙 ( 1 临沧师范高等专科学校 农学系， 云南 临沧 6 7 7 0 0 0 ； 2 河西学院 食用菌研究所， 甘肃 张掖 7 3 4 0 0 0 ) 摘要 ： 依据 茵丝体生物学特性 ， 从 1 3 7株荷叶 离褶伞液体发酵菌株 中筛选 出 i i 株典型的 菌 株， 并采用液体培养方式， 测定了各菌株的液体培养特性， 以期为探 索荷叶离褶伞工厂化发酵奠 定基础 。结果表明 ： l 1 株菌株在 2 2 下均 能形成 菌球 ， 以 白色， 不规 则形 为主； 培 养液 为苦 杏仁 味 ， 除菌株 z y0 2 、 z y 0 5 为褐 色外， 其 它菌株均 为淡黄 色， 含 糖量在 1 0 -2 3 之 间 ， 8 2 的 菌株 p h值在 6 5 7 5 ； 其中菌株 z y 0 5 菌球数量最大， 为 1 5 l 1 o c f u i ， 菌株 生物量为 5 4 1 7 3 g i ， 菌株 z y o 9 菌株生物量为 8 0 9 3 7 g l最大， 菌球数量为 1 3 1 l o c f u i ， 培养液 p h最低， 为 4 9 1 ， 菌株 z y1 0 粗多糖含量最高， 为 1 1 0 5 3 g l ； 该菌的培养特性因不同菌株而存 在 差异 ， 菌株 z y o 5 、 z yo 9 、 z y1 0 是分别以茵球数 量、 菌株 生物量、 粗 多糖 含量 为筛选指标的 最佳 菌株 。 关键词 ： 荷 叶离褶伞 ； 液体发酵 ； 菌株筛选 中图分类号 ： q 9 3 9 9 6 文献标识码 ： a 文章编号 ： 1 0 0 1 -0 0 0 9 ( 2 0 1 4 ) o 3 一o 1 3 4 0 5 荷叶离褶伞( i y o p h y l l u m d e c a s l e s ) 属真菌界( f u n g i k i n g d o m) 担子 菌 - 1 ( b a s i d i o my c o t a ) 担 子 菌 纲 ( b a s i d i o my c e t e s ) 伞 菌亚 纲 ( a g a r i c o my c e t i d a e ) 口蘑 目( t r i c h o l o - ma l e s ) 离褶 伞科 ( l y o p h y l l a c e a e ) 离褶 伞属 ( o p h y l l u re) ， 是一种药食兼用的真菌 ， 菌体中富含丰富的粗蛋 白、 粗多糖 、 氨基酸等 2 多种生理 活性 物质 ， 对 防治癌细 胞 、 先天性糖尿病 、 特异性皮肤炎 等具有很好的抑 制效果 ， 此外， 还具有降血脂 、 防辐射、 免疫、 生血等功 效 。荷叶离褶伞人工栽培困难， 但其市场需求极大， 为满足人们对该菌产品日益增长的需求， 筛选出荷叶离 褶伞 液体发 酵优 良品种 的意义 重大 。研究 人员 已对 该 菌进行了菌体成分 2 、 资源调查 l 、 保健及药效 1 一 一 、 多 糖 提取 ：i ： 艺 “ 、 分子 生物学标 记等 初 步的研究 ， 但 其抗杂菌能力较差、 出菇条件要求极高、 子实体长势差、 生物学转化率很低( 4 6 ) 、 产量不稳定、 栽培周期很 长 ( 1 5 0 1 8 0 d ) 等问题严重影响了该菌的全面推广。 该试验从荷叶离褶伞分布较广的甘肃、 云南、 黑龙 汀 3 个省份的 5个集中区域采集并分离其野生种质资 源， 根据菌丝生长及室内栽培特性 ， 筛选出具有典型生 第一作者简介： 周会明( 1 9 8 4 - ) ， 男， 硕士， 助教， 研 究方向为大型真 菌资源驯化与遗传。bm a i l ： 6 3 2 2 4 3 5 3 0 q q c o f f l 责任作 者 ： 魏 生 龙 ( 1 9 6 2 一 ) ， 男， 教 授 ， 研 究 方 向 为食 用 真 菌。 e - ma i l ： g l a d h a p p y 1 6 3 c o i y l 基金项 目： 甘肃省财政厅资助项 目( 1 1 0 4 n k c g 0 9 1 ) 。 收稿 日期： 2 0 1 3 1 o 一2 3 1 3 4 物学特征的不同菌株 ， 再采用液体摇床发酵培养的方 式， 测定相同条件下不同菌株的液体培养特性， 以确定 液体培养的代表性供试菌株 ， 测定各菌株液体培养不同 特性 ， 分析其分解、 代谢及合成内在差异， 最终通过菌株 生物量、 粗多糖及菌球数等不同筛选指标初步确定其相 应的最佳菌株， 以期为探索其不同目标 的工厂化发酵菌 株奠定理论基础。 l 材料与方法 1 1 试验材料 供试荷叶离褶伞菌株保存于河 西学 院食用菌研 究所 。 母种培养基为 p da培养基 ； 原 种培养基 ： 小麦 1 0 0 k g ， 石膏 1 k g ， 木屑 5 k g ； 栽培种培养基 ： 4 o 棉 籽壳， 2 5 木屑 ， 2 5 发酵料， 9 麦麸 ， 1 石膏； 液体 培养基 ： 马铃薯 2 0 0 g ， 葡萄糖 2 0 g ， 蛋白胨 5 g ， 磷酸二 氢钾 2 g ， 加水 1 0 0 0 mi ； 所有培养基 p h值均自然。 1 2 试验方法 1 2 1 供试菌株筛选该 试验从荷叶离褶伞分布较广 的甘肃祁连山、 肃南蘑菇湾及康乐草原， 云南大理， 黑龙 江大兴安蛉 3个省份对其种质资源进行采集、 分离、 纯 化及编号豫 ， 然后驯化栽培并记录各菌株特性 ， 从中 筛选出具有典型固体培养特性 的菌株 并在 4 冰箱 保存 。 1 2 2 菌种活化从冰箱取出各供试菌株放入室温活 化 7 d 后， 在无菌条件下， 接种于 7 5 ml的 p d a平板中 央， 在 2 2 下培养 l 0 1 5 d ， 备用= l 引。 北方 园 艺 2 0 1 4 ( 0 3 ) ： 1 3 4 1 3 8 食用菌 1 2 3 液体摇瓶发酵培养取 5 0 0 m i 的三角瓶各分 装 l o 0 r n i j 液体培养基 ， 1 2 1 灭菌 2 0 n fi n ， 冷却 至室温 ， 在无菌操作下 ， 取事先活化 的各 菌株边缘 菌落并用直径 为 5 m m打孔器将处理过的菌饼 3块接入三角瓶内， 每 种菌株 3 次重复。在 2 2 下转速为 1 2 1 r rai n的恒温振 荡器上培养 2 0 d ， 其中以温度 1 8 与 2 5 为对照口 。 观察并记录培养液颜色、 气味、 菌球形状、 数量等； 取 1 0 0 粒菌球 ， 在培养皿内排成一排， 用直尺测量菌球直径， 先 后经 1 6 0 、 2 0 0目筛过滤 ， 然后放入 i 一 1 8 型冷冻干燥机 干燥至恒重， 用电子天平测定各菌丝体的干重 ， 计算生 物量e 。 1 3 项 目测定 菌丝体培养液 p h值的测定 ： 将电极事先在蒸馏水 中浸泡 2 4 h ， 取过滤液用 p i t s - 2 型酸度计对各菌株的培 养液进行 p h值测定l_ 。 ； 菌丝体培养液含糖量的测定： 取各菌株培养液， 用手持测糖仪测定其含糖量 f “ 阳； 菌 丝体培养液粗多糖含量的测定： 取 1 0 0 ml菌丝体培养 液 ， 以 4 0 0 0 r mi n的速度离心 1 0 ra i n ， 量取 5 o mi 上 清 液， 在旋转蒸发仪上浓缩至 2 5 mi ， 再将浓缩液转移到 1 0 0 m l 的量筒 ， 用 9 5 9 6 的酒精溶液定容到 5 0 ml ， 4 下 三角瓶 中 1 2 h静置过 夜 ， 再 以 4 0 0 0 r mi n的速度离 心 1 0 mi n ， 弃上清液， 沉淀冻于至恒重， 用电子天平称其质 量 1 。 。粗 多糖 含量 ( g l ) 一粗多糖 干燥物重 ( g ) 培养 液取样体积 ( r i d ) l 0 0 0 。 1 4 数据分析 试验 数 据 采 用 d p s 9 5 o数 据 处 理 系 统 进 行 分析 。 2 结果与分析 2 1 供试菌株的筛选 在 2 5 下， 经母种、 原种及栽培种的初步筛选试验， 最终从 1 3 7 株菌种中筛选出 l l 株典型的菌株( 表 1 ) ， 其 中菌株 z y o 7 由卯晓岚鉴定 ， 获发 明专利 。 表 1 1 1 个典型的供试荷叶离褶伞菌株 t a b l e 1 e l e v e n t y p i c a l t e s t s t r a i n s o f ly o p h y l l u m de c a s t e s 2 2 菌株液体培养特性 从表 1 可以看出， 在 2 2 的恒温箱内， l 1 株荷叶离 褶伞菌株均能正常生长， 2 5 对照组除菌株 z y 0 9 、 z y 1 1 外 ， 其 余 菌株 未 见 长 势 ， 而 1 8 对 照 组 除 菌株 z y o 7 外 也 均 未 生 长 。因 此 ， 菌 株 z y 0 7 、 z y 0 9 、 z y i i 有待进一步研究其最佳温度范围。由表 2可知， 在不同荷叶离褶伞供试菌株问菌丝体液体培养下 ， 培养 液颜色大部分为浅黄色或淡黄色， 其 中菌株 z y 0 2 、 z y 0 5 培养液颜色为深褐色和褐色， 与其它 9 种培养液 颜色差距明显。培养液其气味为苦杏仁味， 浓淡不一； 菌球大多为白色， 不规则形， 有毛刺。 表 2 不 同菌株的液体培养特性 b l e 2 li q u id c u l t u r e c h a r a c t e r is t i c s o f d i f f e r e n t s t r a i n s 2 3 不 同菌株 的菌丝生长 、 菌球直径 、 菌球数量 、 菌株 生 物量 比较 从表 3可知 ， 供试菌株菌丝生长 、 菌球直径 、 菌球 数 量及生物量也存在显著的差异， 其中菌株 z y 0 9 菌球直 径和菌株生物量均最大， 分别为 4 3 4 6 7 m i l l 、 8 0 9 3 7 g l ， 菌球数量为 1 3 1 1 0 c f u i ， 居第 3位 ， 与其它菌 株 差异 达极 显 著水平 ， 菌 株 z y0 5 菌球 数量 最 多 ， 为 1 5 1 1 0 c f u i ， 菌球直径为 3 7 5 8 3 f n i n ， 居第 2位， 表 3 不 同菌株的液体培养的筛选指标 t a b l e 3 s c r e e n i n g i n d e x o f l i q u i d c u l t u r e f o r d if f e r e n t s t r a i n s 菌株编号 菌 m 丝 y c 生 e l i a 长 l m y 菌 ce 球 l i a l 直 p 径 e l l e t s n 菌 u 球 mb 数 er 量 of 菌株生物量c o 粗 nt 多 ent 糖 o f 含 c 量 r u d e 菌株编号 一 一 n 0 。 f s tr a in g r 0 wth o f ti a te r my c e li a 1 p e l l e t s b io m。 。 p o l y s a c c h a ri d e s mm d - mm c f u l -1 gi gi - 注： 同列数字后不同小写字母表示在 0 0 5 水平有显著差异 不同大写字母表示 在 0 o 1水平有极显著差异。下同。 no t e ： d i f f e r e n t s ,n a u l e t t e r s b e h in d t h e d a t a i n t h e s a me c o l u mn it le a n s s ig n if ic a n t d i f f e r e n c e a t 0 0 5 le v e l ； d i f f e r e n t c a p i t a l le tt e r s me a n s v e r y s i g n i fi c a n t d i f f e r e n c e a t 0 0 l l e v e 1 tb e s a me b e l o w 1 35 食用菌 北 方 园艺 2 o i 4 ( o 3 ) ： 1 3 4 1 3 8 其菌 株 生 物 量 为 5 4 】 7 3 g l， 居 第 3位 ； 而 z y0 3 、 z y 0 7 、 z y 1 0 分别是菌株生物量 、 菌球直径 、 菌球数量 最小的菌株； 菌株 z y 0 7 综合方面最差。 2 4 不同菌丝体培养液的 p h值、 含糖量、 粗多糖含量 的比较 从图 1 可以看出， 培养终止时荷叶离褶伞不同菌株 液体 p h值不相同， 在原培养液 p h值为 6 8的基础上， 大部分供试菌株在培养终止时 p h值在 6 5 7 5 之间， 这说明每个菌株产生的液体培养产物量不相同， 而菌株 z y 0 3 和 z y 0 9 的 p h值分别为 5 。 5 3和 4 9 1 ， 这说明 这 2 个菌株产酸能力较强。根据不同菌株培养产物酸 性的不同， 对以上菌株进行单独培养时， 应提前对代澍 产物做出相应的处理， 以保证菌丝体后期生长状况 良 好 ， 以提高液体培养的产量， 改善经济效益。由图 2可 知 ， 荷叶离褶伞不同菌株液体培养终止时液体中含糖量 不相 同， 在原 培养 液 2 3 5 含 糖量 的基础 上 ， 供试 菌株 大部分培养终止时的含糖量在 1 o 2 3 之间 ， 说明 各菌 株 转 化 与 利 用 糖 的 能 力 不 同； 而 菌 株 z y 0 2 、 z y 0 8 及 z y 0 9 培养液 中糖含量较低 ， 说 明这 3 个菌株 对糖 的 利 用 能 力 较 强 。菌 株 z y 0 1 、 z y 0 4 以 及 z y 0 7 培养液中糖含量较高， 造成这种情况的原因还有 待进一步研究 。 8 u 7 专 6 主 5 盆4 j 2 互 3 吾 2 l o 墓 吾 磊 咖 搬 如 暑 暑 叶 i n 卜 0 0 0 0 p 0 _ _ h _ 一 - n n n n n 菌株编号 n o o f s t r a i n 图 1 不同菌株培养液的 p h值 fi g 1 ph o f c u l t i v a t i o n l i q u i d o f d i ffe r e n t s t r a i n s 一川 3 苫 兽 g 琴 8 2 = - - 一 _ 一 菌株编号 n o o f s t r a i n 图 2 不 同 西株培 养液 的 含糖 量 f i g 2 s u g a r c o n t e n t o f c u l t i v a t i o n l i q u id o f d if f e r e n t s t r a i n s 在原培养液粗多糖含量为 0 0 0 1 9 g i ， 从表 3可以 看出， 不 同菌株 培养液 粗多 糖 含量差 异 显著， 菌 株 z yi o 产生的粗多含糖量最多， 达 1 1 0 5 3 g i ， 与其它 供试 菌株极 显著差异； 菌株 z y 0 6 产生粗 多糖 量为 1 3 6 0 8 9 7 3 g i ， 极湿著高于除 z y1 0 以外 的其它供试菌 株 ； 菌株 z yi 1 、 z y 0 3 产生粗 多糖 量最 小。这如果 从 功能性 食品来 说 菌株 z y l o 、 z y o 6 较适宜 2 2 下 液 体培养； 而菌株 z y l l 、 z y 0 3 产生粗多糖量低， 不宜适 合 2 2 f液体培养生产。 3 讨论 大型真菌 因地域 、 季 节、 树种群 落等 环境差 异造 成 其品种的特异性与多样性l l ， 荷叶离褶伞也不例外。国 内外对一些食用真菌多样性和特异性做了深入的研究， uh a r t 等 。j 、 mo u h a m a d o u等 发现菌株的地理环境不 同， 最终会在线粒体 k s u - r r na二级结构的基因 】 的编 码序 列 k 出现差异 ， 由核苷 酸序列 之问 的删 除 、 插 入 以 及遗传交换导致， 编码序列相似性越小， 菌株 的特异性 与多样性就越明显。荷叶离褶伞菌株大多数来 自于仨 r 肃祁连山， 其生长环境在 1 5 2 5 ， 该试验所用 株菌 株在 2 2 下均能形成菌球， 与张汉绞等0 对该菌中试 发酵 研 究 的 结 果 一 致 ， 其 中 菌 株 z y 0 5 、 z y 0 9 、 z y i o 从整体培养效果上来看表现出最好的培养特性， 而其 它菌株对此温度适应性欠 佳。这表明 ， 同一条件下 不同菌株在培养特性方面差异较大， 菌球的大小、 数量、 直径、 产量等主要与各菌株特异性以及多样性相关， 每 个菌株都有 自身适宜生存 的特定坏境， 它们的繁殖能 力、 健壮程度、 表现型等基因 与坏境而发生变化 ， 菌球的 形状、 光滑程度及培养液颜色等存在一定程度的差异， 如菌株 z y 0 2 、 z y 0 5 分泌褐色 的色素 ， 这 也许 是 菌株 自身基因重组或突变所致 ； 部分菌株， 如 z y 0 3 、 z y1 o 菌丝体在培养后期， 因环境、 营养及代谢产物等限制其 生长而表现为元毛刺 ， 光滑现象 ； 影 响菌株 菌球 直径 、 菌 球数量及生物量的因素除菌株本身外 ， 也与恒温摇床转 速 、 温度 、 容器大小 、 通气 量 、 酸碱度 及 发酵 时间 等一 系 列网子息息相关； 该菌的培养特性因不同菌株而存在差 异 ， 菌株 z y o 5 、 z y 0 9 是分别 以菌球数量 、 菌株生物量 为筛选指标 的最佳菌 株。总之 ， 荷叶离褶伞 品种选 育应 在菌种筛选的基础上进行 ， 缩短育种年限， 也可利用菌 种的多样性采用细胞融合 、 单孢杂交等技术使各 自有利 基因的汇集， 从而达到育种的最终 目的， 最后实现菌种 推， 以及生产化 。 重组导致偏分离 在大型真 菌 中极其 普遍 船 。一些 研究人员对金针菇等研究证明； ， 高等真菌在人t驯化 栽培过程 中， 其有性 繁殖 阶段 出现 了一些极 性菌株 偏分 离现象 ， 导致极性 比例失调， 一些菌株的特性发生 了相 对的改变。因此， 交配型因子位点内的重组或突变极有 可能是出现偏分离的根源。该试验中， l 1 种典型的荷叶 离褶伞菌株中， 有 2种产生褐色的水溶性色素， 一方面 也许是分离纯化过程中混入其它杂菌， 但是它们的培养 液的味道、 颜色等并没有出现与杂菌相关的异样， 产量 北方 园 艺 2 o 1 4 ( o 3 ) ： 1 3 4 1 3 8 食用菌 也没有减少， 出现这种可能的几率很小； 另一方面也许 是菌株 自身基因重组或突变所致， 在其它培养特性正常 的情况下产色素 ， 极有可能是 这 2种菌株 的某一基 因发 生变化， 导致基因内部 i斗 l 现了新的调控机构， 产生一种 能够调控 包索形成的调控元件 ， 最后在该 元件 的控制 下 出现水溶性 色素 的产生 ， 也许 因为此 调 控元件 的出现 ， 会让其它调控 元件 失效 ， 或 者只是 多 出这 一调 控 元件 ， 有关该菌株是否为荷叶离褶伞变种 ， 有待通过进一步分 子标记 ， 如 1 8 s r r n a序列分析 一 、 i g s c- 等深人研究。 ( 致谢 ： 感谢中国著 名 大型真 菌 分类学 家 卯晓岚 先 生鉴 定了标本 ， 深表谢意 ! ) 参考文献 1 戴玉成。 周丽伟 ， 杨祝 良， 等 中国食用菌名录i= j 菌物学报， 2 0 1 0 ， 2 9 ( 1 ) ： 1 2 】 2 席亚丽 茆爱丽 ， 王晓琴， 等 荷叶离褶伞子实体 、 菌丝体及发酵液蛋 白质营养价值评价t- j 菌物学报 2 0 1 0 ， 2 9 ( 4 ) ： 6 0 3 6 0 7 3 uk a w a y， h o h， h i s a ma t s u m a n t it u m o r e ff e c t s o f ( 1 3 ) 一 d - g l u c a n a n d( 1 6 )(卜 d g l u c a n p u r if i e d f r o m n e wl y c u l t i v a t e d mu s h r o o m ， h a t a k e s h i m ( l y o p h y l l u md e c a s t e s s i n g ) 口 j o u r n a l o f b io s c ie n c e a n d b i o e n g i n e e r i n g， 2 c o 0， 9 0 ( 1 )： 9 8 1 0 4 4 mi u r a t， k u b o m， h o h y， e t a 1 an t k li a h e t i c a c t i v it y o f l y o p h y l l u m d e c a s t e s i n g e n e t ic a l l y t y p e 2 d ia b e t i c m i c e j b i o l o g i c a l a n d p h a r m a c e u t i c a l bu l l e t i n， 2 0 0 2， 2 5 ( 9 ) ： 1 2 3 4 1 2 3 7 5 uk a w a y， i z u mi y， oh b u c h i t， e t a 1 o r a l a d mi n i s t r a t io n o f t h e e x t r a c t f r o m ha t a k e s h i me j i( l y o p h y l l u n d e c a s t e s l 1 g )mu s h r o o m i n h i b i t s t h e d e v e o p me n t o f a t o p i c d e r ma t i t i s 一 l ik e s k i n l e s i o n s i n n c ， n g a mic e j j o u r n a l o f nu t r i l i o n a l,s c ie n c e a n d vit a mi n o l o g y， 2 0 0 7， 5 3 ( 3 ) ： 2 9 3 2 9 6 6 uk a w a y， f u r u i c h i y， k o k e a n y， e t a 1 e f f e c t o f ha t a k e s h i m i( l y e p h y l l u m d e c a s t e s s i n g ) mu s h r o o m o n s e r u m l ip i d l e v e l s in r a t s j j o u r n a l o f nu t r i t i o n a l s c ie n c e a n d vi t a mi n o l o g y， 2 0 0 2， 4 8 ( 1 ) ： 7 3 7 6 7 n a k a mu r a t， i t o k a wa y， t a j i ma m e t a 1 r a d io p r o t e c t i v e e f f e c t o f ly o p h y l l u m d e c a s t e s a n d t h e e f f e c t o n i mmu n o l o g i c a l f mmt i o n s i n i r r a d ia t ed mic e j j o u r n a l o f t r a d it i o n a l c h i n e s e me d i c in e ， 2 0 0 7 ， 2 7 ( 1 ) ： 7 0 7 5 e 8 张汉狱 ， 张芬琴， _-ed 明， 等 衙叶离褶伞子实体营养成分分析与评 价 j 菌物学报， 2 0 0 8 ， 2 7 ( 5 ) ： 6 9 6 7 0 0 9 桂建华 ， 魏生龙， 王生荣 祁连l 【j 自然保护区离褶伞 属真菌资源口 草、i 学报 ， 2 0 1 1 ， 2 0 ( 5 ) ： 2 8 4 2 8 7 f 1 0 张春梅 宋海， 魏生龙 荷 离褶伞菌丝体多糖的提取及还原力的研 究口 中国食用菌 ， 2 0 1 2 ， 3 1 ( 6 ) ： 4 4 4 8 n1 张风琴， 李彩霞 ， 李鹏 ， 等 荷叶离褶伞 可溶性多糖提取工艺研究 -1 食品工业科技 ， 2 0 1 0 ( 5 ) ： 2 2 4 2 2 5 1 2 )王守现 划宇， 许峰 ， 等 荷叶离褶伞菌株的 i t s鉴定及生物学特性 研究 刀 中国农学通报 ， 2 0 1 2 ， 2 8 ( 2 8 ) ： 1 4 8 1 5 2 f l 3 余海尤 ， 曹春蕾 ， 崔宝凯 忍冬木层孔菌液体培养过程 中多酚含量及 抗氧化活性研究i j 菌物学报 ， 2 0 1 2 ， 3 1 ( 6 ) ： 9 3 3 9 3 9 1 4 张汉靛， 王治江 ， 席 亚丽 ， 等 荷叶离褶伞 中试发酵条件与培养基优 化研究=j 中国酿造， 2 0 1 2 ， 3 1 ( ) ： 9 6 9 9 1 s 陈力力 ， 吴新芬 金针菇液态发酵培养基的筛选 j 生物技术， 2 0 0 7 ， 1 7 ( 1 ) ： 7 3 7 5 1 6 1王晓琴 ， 张芬琴 魏生龙 等 荷叶离褶伞菌丝体深层发酵及胞内外 多糖含量的变化 j 中国酿造 ， 2 0 1 1 ( 5 ) ： 5 6 5 8 l 1 7 鲁铁， 图力古尔 ， 刘宇 。 等 槐耳近似种白蜡多年卧孔菌活性 j 菌物 研 究 ， 2 0 1 3 ， 1 1 ( 2 ) ： 9 6 7 1 0 2 1 8 2 l王一见 ， 杜先锋 ， 许阳， 等 小麦淀粉的退火改性及其性质表征_ j 中 国农业科学 2 0 1 3 ， 4 6 ( 1 2 ) ： 2 5 2 6 2 5 3 3 1 9 3柴新义 ， 许雪峰， 汪美英， 等 安徽琅琊山大型真菌区系多样性 j 生 态学报， 2 0 1 3 ， 3 3 ( 7 ) ： 2 3 1 4 2 3 1 9 2 o uh a r t m， s ir a n d - p u g n e t p， l a b a r e r e j e v o l u t i o n o f m i t o c h o n d r ia l s s u r dna v a r i a b l e d o ma i n s e q u e n c e s a n d r rna s e c o n d a r y s t r u c t u r e s ， a n d p h y l o g e n y o f t h e a g r o y b a e g e r i t a n mh i s p e c ie s c o m p l e x j r e s e a r c h i n mi c r o b i o lo g y， 2 0 0 7， 1 5 8 ( 3 ) ： 2 0 3 2 1 2 2 1 mo u h a ma d o u b ， f 6 r a n d o n c， b a r r o m g， e t a 1 t h e mi t o c h o n d r i a l a p o c y t o c h r o me b g e n e s o f t wo agr o c y b e s p e c i e s s u g g e s t la t e r a l t r a n s f e r s o f g r o u p 1 h o min g i n t r o n s a m o n g p h y l o g e n e t i c a ll y d i s t a n t f u n g i j f u n g a l g e n e t ic s a n d b i o lo g y ， 2 0 0 6 ， 4 3 ( 3 )： 1 3 5 1 4 5 2 2 周会明， 赵永昌， 陈卫民， 等 杨柳 田头菇交配型因子 与菌丝生长速 度关系 i j 云南植物研究 ， 2 0 1 0 ， 3 2 ( 4 ) ： 3 1 5 3 2 2 2 3 ka w a b a t a h， ma g a e y， s a s a k i t ma t i n g t y p e a n a l y s i s o f m o n o k a r y o n s r e g e n e r a t e d f r o m p r o t o p l a s t s o f f l a r n mu l i n a w e l u t l p e s j t r a n s a c t i o n s o f t h e my c o lo g i c a l s o c i e t y o f j a p a n， 1 9 9 2 ， 3 3 ( 2 ) , 2 4 3 2 4 7 2 4 刘超洋， 庄文颖 火丝菌科( 盘菌 目) 部分属的系统学研究 _ j 菌物学 报 ， 2 0 0 6 2 5 ( 4 ) ： 5 4 6 5 5 8 2 5 p a n t o u m p， ma v r id o u a， t y p a s m i g s s e q u e n c e v a r i a t io n ， g r o u p i i n t r o n s a n d t h e c o mp l e t e n u c l e a r r ib o mr n a l d na o f t h e e n t o mo p a t h o g e n i e f u n g u s me t a r h i z iu m ： e x c e l l e n t t o o l s f o r i s o l a t e d e t e c t i o n a n d p h y l o g e n e t i c a n a l y s i s j f u n g a l ge n e t i c s a n d b i o l o g y ， 2 0 0 3 ， 3 8 ： 1 5 9 1 7 4 s t u d y o n s c r e e n i n g o f li q u i d fe r me n t a t i o n s t r a i n s o f ly o p h y i l u m d e c a s t e s z i- t ou hu i - mi n g ， zhang ya n z h e n ， chen yi n - h u i ， x i ya - l i ， w e i s h e n g - lo n g e ( 1 l k e p a r t me n t o f ag r o n o my ， i in c a n gi b m ： h e r s c o l l e g e i i n c a n g ， yu n n a n 6 7 7 0 0 0 ； 2 mu s h r o o m re s e a r c h i n s t i t u t e ， he x i un i v e r s i t y ， z h a n g y e ， ga n s u 7 3 1 0 0 0 ) a b s t r a c t ： e x c e l l e n t s t r a i n s we r e s c r e e n e d f o r t h e l i q u i d f e r me n t a t i o n o f ly o p h y l l u m d e c a s t e s wh i c h we r e t h e b a s i s o f e x p l o r i n g i t s ma i n f a c t o r y f e r me n t a t i o n b a s e d o n t h e my c e l i u m b i o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c s , e l e v e n t y p i c a l s t r a i n s o f l y o p h y l l u m d e c a s t e s we r e s e l e c t e d f r o m 1 3 7 s t r a i n s o f l y o p h y l l u m d e c a s t e s a n d t h e l i q u i d c u l t u r e c h a r a c t e r i s t i c s o f e a c h s t r a i n we r e me a s u r e d t h r o u g h t h e n i e t h o d o f l i q u i d c u l t u r e th e r e s u l t s s h o we dt h a t t h e e l e v e n s t r a i n s c o u l d f 0 r m b a c t e r i a b a l l s a t 2 2 c， ma i n l y wh i t e a n d i r r e g u l a r t h e c u l t u r e o f b i t t e r a l m o n d f l a v o r ， t h e c o l o r t e n d e d t o b e l i g h t y e l l o w e x c e p t 1 3 7 食用菌 北 方 园艺 2 0 1 4 ( 0 3 ) ： 1 3 8 1 4 0 不同纤维废弃物对金针菇生长发育的影响 连 凯 ，潘 辉。 ，王 迎 鑫 ，张 引 芳。 ，刘 朝 贵 ，郭 倩 ( 1 西南大学 园艺园林学院， 重庆 4 0 0 7 1 6 ； 上海光明森源生物科技有限公司， 上海 2 0 1 4 0 8 ) 摘 要： 以金针菇为试材， 将工农业生产中产生的纤维废弃物添加到金针菇栽培培养料 中， 研究纤维废弃物对金针菇生长发育的影响， 以期优化现有栽培配方。结果表明： 啤酒糟有利于金 针菇菌丝健壮生长， 甘蔗 渣和甜 菜渣可 以提 高金针菇 菌丝生长速度 ， 桔皮渣促进金针菇子 实体 的 生长发育， 甘蔗渣、 甜菜渣、 桔皮渣与啤酒糟搭配均有助于提高金针菇的产量和品质。最终得到 的最优配方为 3 o 玉米芯、 3 9 米糠、 1 5 7 6 麸皮、 5 棉籽壳、 5 9 6 啤酒糟、 5 桔皮渣、 l 碳酸钙。 关键字 ： 金针菇 ； 栽培配方 ； 纤 维废弃物 中图分类号 ： s 6 4 6 文献标识码 ： a 文章编号 ： 1 0 0 1 0 0 0 9 ( 2 0 1 4 ) o 3 一o 1 3 8 一o 3 近年来， 随着我国经济的不断发展和人们对于饮食 健康养生的新需求 ， 食用菌行业呈现出一派欣欣向荣的 大好景象。由于人们需求量的不断增加， 小农户种植模 式已经远远不能满足市场需求 ， 工厂化大生产的栽培模 式渐渐兴起， 各地食用菌工厂不断涌现。目前， 我国食 用菌工厂化栽培的主要菌种有白色金针菇、 杏鲍菇、 蟹 味菇和白玉菇等 ， 尤以白色金针菇最多。食用菌行业 快速成长的同时也带来了更多的竞争， 要求食用菌工厂 在菌种选育、 栽培工艺和环境控制技术 上不断创新和 改进 。 该试验本着环保低碳 、 循环经济的原则， 根据金针 菇的生长发育规律 2 以及其对营养成分_ 4 的吸收利用 特点， 选用啤酒糟 6 、 甘蔗渣_ 7 、 甜菜渣 8 、 桔皮渣i 等纤 维废弃物进行多组培养料配方的筛选比较 ， 研究不同纤 维废弃物对金针菇生长发 育的影响， 以期筛选出能提高 第一作者简介： 连凯( 1 9 8 8 一 ) ， 男， 硕士 ， 现主要从事蔬菜生理 生化 和设施园艺等研究工作。e - m a i l ： p r o v i d e d 2 0 2 0 q q c o n l 责任作者 ： 郭倩( 1 9 6 9 一 ) 男， 博士， 研究员， 现主要从事食 用茵工厂 化栽培等研究工作 。e - ma