旋光度测定法.ppt

旋光度测定法,组员：陈章亮李晓红张琪霞王小英,概述,有机化合物的结构中含有手性碳原子，具有旋光现象。利用测定药物的旋光度进行定性、杂质检查和定量的分析方法，称为旋光度测定法。手性碳原子，是指和四个不同的原子或基团连接的碳原子，常用“”号予以标注,一、基本概念,旋光度：平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数，称为旋光度（用表示）。比旋度：平面偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度（用表示）。,二、影响旋光度测定的因素,旋光度不仅与化学结构有关，还和测定时溶液的浓度、液层的厚度、温度、光的波长以及溶剂有关。d为钠光谱的d线t为测定时的温度为测得的旋光度l为测定管的长度（dm）c为每100ml溶液中含被测物质的重量（g，按干燥品或无水物计算）,1.物质的化学结构物质的化学结构不同，旋光性也不同，相同条件下有的旋转的角度大，有的旋转角度小；有的呈左旋（“-”表示），有的呈右旋（“+”表示），有些物质无手性碳原子，无旋光性。2.溶液的浓度(1)溶液的浓度越大，其旋光度也越大。(2)在一定的浓度范围内，药物溶液的浓度和旋光度呈线性关系。(3)测比旋度时，要求在一定浓度的溶液中进行。,3.溶剂溶剂对旋光度的影响比较复杂，随溶剂与药物而有所不同：有些溶剂对药物无影响，有的溶剂影响旋光的方向及旋光度的大小。测定药物的旋光度和比旋度时，应注明溶剂的名称。4.光线通过液层的厚度光线通过液层的厚度越厚，旋光度越大除另有规定外，中国药典（2005年版）采用1dm长的测定管,5.光的波长波长越短，旋光度越大。中国药典（2005年版）采用钠光谱的d线（589.3nm）测定旋光度。6.温度一般情况下，温度的影响不是很大，对于大多数的物质，在黄色钠光的情况下，温度每升高1，比旋度约减少千分之一。,三、仪器与测定方法,中国药典（2005年版）规定用读数至0.01并经检定的旋光计。常用的旋光仪：,四、操作方法,（一）比旋度的测定1.配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定。测定前应将室温调至规定温度。先用配制供试品的空白溶液校正零点或测定零点，以便扣除空白读数，难后进行供试品的测定。2.操作方法是用供试品或溶液冲洗测定管数次，缓缓注入供试液体或溶液适量，装入液体时应避免产生气泡，旋紧旋光管两端螺帽时，不应用力过大以免产生应力，造成误差。将旋光管置于旋光计内检测读数，即得供试品的旋光度。3.使偏振光向右旋转者(顺时针方向）为右旋，以“+”表示；使偏振光向左旋转者(逆时针方向）为左旋，以“-”表示；测定旋光度应重复读取3次，取平均值，按规定公式计算结果。,供试品的比旋度【】按下列公式计算,对液体供试品=/l.d对固体供试品=100/ld式中:【】-比旋度d-钠光谱的d线t-测定时的温度l-测定管的长度，dm-测得的旋光度d-液体的相对密度,五、旋光法的应用,旋光法多用于比旋度测定，药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，可根据计算公式得出供试品的比旋度，判断样品是否合格。测定含量时，取2份供试品测定，读数结果其极差应在002以内，否则应重做。,六、注意事项,1、测定前应将仪器及样品置200.5恒温室中，也可用温水浴保持样品室或样品测试管恒温1小时以上。2、通电开机之前应取出仪器样品室内的物品，各示数开关置于规定位置。先用交流供电使钠光灯预热启辉，启辉后光源稳定约20分钟后再进行测定，读数时应转换至直流供电。连续使用时，仪器不宜经常开关。3、测定前仪器调零时，必须重复按动复测开关使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位，通过观察左右复测的停点可以检查仪器的重复性和稳定性。,4、同一旋光性物质，用不同溶剂或ph不同，由于缔合、溶剂化和解离的情况不同，而使比旋度产生变化，甚至可能改变旋光方向。5、测定空白和供试品时，均应读取读数3次，取平均值，测定后再次测定空白，观察零点是否漂移。6、测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，应滤清后再用；加入测定管时，应先用供试液冲洗数次；如有气泡，应使其浮于测定管凸颈处旋紧测试管螺帽时，用力不要过大，以免产生应力，造成误差；两端的玻璃窗用滤纸与镜头纸擦干净。,7、测定管不可置干燥箱中加热干燥，因为玻璃管与两端的金属螺帽的线膨胀系数不同，加热易造成损坏，用后可晾干或用乙醇等有机溶剂处理后晾干。注意，使用酸碱溶剂或有机溶剂后，必须立刻洗涤晾干，以免造成金属腐蚀或使螺帽内的橡胶垫圈老化、变黏。仪器不用时，样品室内放置硅胶保持干燥。8、按规定或根据读数精度配制浓度适