新版快速定量检测(HCG).ppt

www.poct.com.cn,1,奥普u2/hcg-dot金标法快速定量检测人绒毛促性腺激素（hcg）的临床应用上海解放军85医院主任技师薛汉阳教授,www.poct.com.cn,2,概述,u2/hcg-dot金标定量检测仪，可快速定量检测血清和尿液中的人绒毛膜促性腺（hcg），操作简单方便，3分钟快速报告结果，超宽量检测范围（25-15000miu/ml）大于常见进口仪器。仪器试剂经复旦大学中山医院评估，结果准确、可靠，是一种新型的poct（即时检验）仪器，可用于急诊快速定量检测hcg含量。对正常和非正常妊娠，宫外孕，自发性流产，绒毛膜上皮癌，葡萄胎等诊断和鉴别诊断，及滋养层肿瘤术后的疗效观察有重要作用。现介绍如下,www.poct.com.cn,3,一、u2/hcg-dot测试系统的组成,u2金标定量检测仪由三部分组成。（一）光电传感器部分（二）微处理器（三）面板及控制按钮,(一）仪器的组成,www.poct.com.cn,4,沪食药管械（准）字2006第2400111号,www.poct.com.cn,5,面板及控制按钮,1显示屏及打印机，可显示检测数据及打印报告。2四个控制按钮可完成仪器检测的各项操作选择键select开机；切换菜单；数字选择。执行键enter功能；执行选定的功能并确认。退出键quit功能；返回初选；光标左移。移动键move功能：光标右移。,www.poct.com.cn,6,u2/hcg-dot测试系统的组成,反应板和相关配套试剂封闭液1%bsa溶液洗涤液ph7.4pbs金标液冻干品复溶液0.1%叠氮钠溶液滤纸和漏斗,（二）试剂部分,www.poct.com.cn,7,（三）测试方法,1、接通电源，开机、仪器自动检测；2、白板标定（空白校正）；3、选定检测项目；4、标本测试，尿液需过滤预处理，血清可直接检测，反应孔内加二滴封闭液，待渗入；加标本（尿液300ul，血清100ul）待渗入；加洗涤液4滴，至背景变白；5、用仪器测试探头对试剂板定量检测。6、打印结果，待机进入下一个试验。,www.poct.com.cn,8,（四）u2/hcg-dot快速定量检测的特点,1、金标仪定量检测，操作简单，3分钟可得检测结果；2、即可快速定量检测血清，又可检测尿液中的hcg；3、超宽量程检测范围：hcg含量在10015000miu/ml时，标本无需稀释，高浓度检测范围大于常见进口仪器。100miu/ml时，反应板无肉眼可见红色斑点结果应为25miu/ml，如有红色斑点，当需要时，经再加样本和金标液处理后，可在低浓度曲线模式下再测，可报=25miu/ml或2599miu/ml之间具体数据。,www.poct.com.cn,9,4、样品无需复杂处理，尿液用试剂配套小漏斗和滤纸过滤即可，新鲜血清可直接应用。5、配有国家hcg标准质控品，可随时监控试剂和仪器的测试状况。质控品和金标试剂均为冻干品，可保证试剂质量稳定。6、poct（即时检验），特别适用于门急诊快速检验，可在同位素、化学或电发光大型仪器关机时段，亦可在开机时同时检测。,u2/hcg-dot快速定量检测的特点,www.poct.com.cn,10,（五）u2/hcg-dot和进口检测仪器的比较,www.poct.com.cn,11,（六）u2/hcg-dot临床应用评估,内存标准曲线，正确可靠；经复旦大学中山医院评估，u2与强生、罗氏eci等仪器试剂对比，相关系数r=0.940.97三种国外进口仪器试剂之间检测数据的相关系数也在0.950.98之间，二者水平非常接近。u2国家标准品10次重复检测结果如下表,www.poct.com.cn,12,上海普陀人民医院用dpcimmulite化学发光仪和配套hcg定量试剂，与u2仪器和试剂对31例妇产科病人血清hcg定量同时检测，结果显示二者之间相关r=0.99（immulite仪器检测最高范围是5000）。,u2/hcg-dot临床应用评估,www.poct.com.cn,13,关于尿与血清hcg金标定量的同步比较,上海市黄浦区妇幼保健院对48例孕妇以平均间隔11分钟时间先留取尿液，然后抽血，用u2和同一试剂定量检测hcg，结果尿液hcg均值15136miu/ml，血清为25734miu/ml，相关系数r=82.7%。总体说明血清的hcg值明显高于尿液。尿和血清应尽量同时采集。,www.poct.com.cn,14,（二hcg定量检测的临床意义,(一)改变观念充分认识hcg定量检测的重要性一般人的传统观念，即怀孕与否，应做妊娠试验。但是随着hcg检测技术的进步，优生优育需了解胎儿发育的情况；环境污染等多种因素的影响，先兆流产、宫外孕、滋养层细胞肿瘤发病的增高，临床上迫切需要hcg的定量检测，仅仅是妊娠试验阳性，对上述疾病无诊断意义。,www.poct.com.cn,15,因为定性的妊娠试验hcg含量25miu/ml，即可显示阳性，而15000miu/ml也报为阳性，同样是阳性，其hcg含量差300多倍，这么大量的差异比较，临床上可用于对胎儿发育状况的观察，宫外孕的诊断；先兆流产保胎的成功与否，滋养细胞源性肿瘤的诊断和疗效观察，妊娠残留物的检测以及作为肿瘤标志物的应用，而妊娠试验的阳性不能反应hcg绝对值不正常的过多或多低，,改变观念充分认识hcg定量检测的重要性,www.poct.com.cn,16,因此，改变检测观念从单纯的定性妊娠试验，变为hcg的定量检测是何等的重要！而hcg的定量检测可有助于对上述疾病的动态观察和分析，便于正确诊断和治疗。,改变观念充分认识hcg定量检测的重要性,www.poct.com.cn,17,（二）hcg的基础及特性,（1）hcg的组成和特性hcg是由亚基和亚基组成。亚基在hcg与受体结合中起主要作用，但和亚基形成完整的hcg分子是其与受体专一性结合的重要前提。亚基决定了hcg的生物学和免疫学特性。-肽链与lh、fsh和tsh的链相似，-肽链則是特异的。,www.poct.com.cn,18,hcg的分泌部位和作用,分泌:胎盘合体滋养层细胞分泌作用:hcg的生物学作用与lh相似。(1)刺激月经黄体转变为妊娠黄体,分泌雌、孕激素(2)抑制淋巴细胞活动,防止母体对胎儿的排斥,www.poct.com.cn,19,总hcg和-hcg检测临床意义区别,血液中hcg可以完整hcg（）形式存在，也有游离-亚基和基基片段妊娠时一般分泌完整的hcg，而在肿瘤等情况下，游离-亚基和亚基片段会增加。,www.poct.com.cn,20,hcg分子结构图,血液中hcg主要是完整hcg（+）形式存在，妊娠是一般分泌完整hcg也有很少的游离亚基和片断,整分子hcg,亚基,亚基与lh、fsh、tsh有交叉,亚基与受体结合起主要作用,亚基决定了hcg的生物学和免疫学特性,在滋养层肿瘤等情况分泌的酶降解，使、链解离，成为游离片断，最常见的（hcgcf）游离亚基和片断,亚基,www.poct.com.cn,21,hcg定量检测的临床意义,血清或尿液hcg定量测定的临床重要性不只是妊娠的诊断，它有助于了解胚胎及胎儿发育状况，胚胎发育正常时、hcg增长速率是极快的，特别当流产症状出现后对于了解胎儿的存活极有帮助。妊娠期的妇女hcg绝对值不正常的过高过低均应引起医生的注意和病人的重视。hcg定量为什么能监测胚胎发育的状况呢？,（一）、早孕的诊断及胚胎发育状况的监测,www.poct.com.cn,22,正常hcg增长速率48小时后增长66,hcg定量检测的临床意义,正常妊娠不同时期hcg的浓度见下表：,www.poct.com.cn,23,妊娠早期血清hcg的变化,正常妊娠约排卵后7-10d能测到hcg最初3周内约1.7d增加一倍；第4-10周约3d增加一倍，孕5周时血hcg1000uiu/ml，孕8-10周达高峰动态观察血hcg水平，2d至少应增加66%以上异位妊娠血hcg水平低、倍增时间延长约为3-8d，平均7d，每48小时的增值在66%以下。,www.poct.com.cn,24,在妊娠胚胎发育的不同时期，观察hcg定量数值的变化，是否符合hcg的增长规律了解胎儿发育的状况。先兆流产观察hcg含量有助于先兆流产的处理，hcg定量逐渐上升表示胎儿能保住，不断下降应尽早处理，以免造成过期流产。这些情况定性妊娠试验是不能做到的。hcg定量测定作为胚胎正常发育的监测指标，对孕妇无任何损伤，,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,25,（二）宫外孕的辅助诊断,宫外孕是危及生命的急诊，临床上急需及时诊断并采取措施。以hcg增高速率为诊断指标，可以区分正常或不正常妊娠。二次相隔48小时测定hcg增高正常应大于第一次的66，hcg定量明显低于正常妊娠天数值,阴超未见妊娠囊。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,26,hcg-诊断妊娠和异位妊娠,b超检查,一般停经6周腹部b超可发现宫内妊娠，阴道b超更可在31d时作出诊断。超声检查能明确诊断宫内妊娠时的血hcg水平称为超声分辨阈值阴道超声hcg水平为1500-2000miu/ml，腹部超声为6500miu/ml。,www.poct.com.cn,27,hcg-诊断妊娠和异位妊娠,但hcg水平较低或倍增时间延长还见于先兆流产或难免流产。若hcg正常上升，则宫内孕、异位妊娠和自然流产的敏感性分别为100%、23.3%和0。注意:血hcg的半衰期为37h，血hcg结果反映的并非取血当日的滋养细胞的活性。,www.poct.com.cn,28,hcg-诊断妊娠和异位妊娠,dart等:b超宫内未发现孕囊的患者，血-hcg值增加比降低患异位妊娠的危险性更大。血-hcg增值在66%以下者，异位妊娠可能性最大,机会比是24.8；血-hcg增值在66%以上者，患异位妊娠的机会比是2.6血-hcg降值小于50%者，患异位妊娠的机会比是3.7。,www.poct.com.cn,29,hcg-诊断妊娠和异位妊娠,异位妊娠与流产者血hcg下降不同特点-下降快，半衰期1.4天者,92是宫内流产-下降慢，半衰期7天者,86为异位妊娠-半衰期为1.46.9天者，约1/3是异位妊娠-hcg100ul很少发生输卵管妊娠破裂。（以上资料摘自武汉同济医院钟刚教授ppt讲稿）,www.poct.com.cn,30,受个体差异的影响，至今尚无排除宫外孕的hcg绝对最低值，可以25miu/ml为参考，因为毕竟极少存在有不分泌hcg的不正常滋养层，所以宫外孕的诊断或排除应根据临床症状和实验资料综合慎重分析，并用同一方法测定。不能仅靠一项指标作出诊断。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,31,（三）滋养层疾病的诊断与跟踪,临床上引起hcg增加最明显的情况见于绒毛膜组织肿瘤的患者。此种滋养层细胞源性肿瘤分泌的hcg与妊娠时正常胎盘所合成的hcg相同。正常妊娠头三个月后，hcg水平不再增加，跌落到一个较平坦的水平，然而在滋养层细胞瘤患者中，hcg水平可随瘤的发展而继续升高。血清或尿hcg达80000miu/ml而腹部超声探测无胎心，则强烈提示胎块妊娠。如卵巢、绒毛膜上皮癌、葡萄胎等。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,32,（四）疗效观察及预后判断,外科切除肿块后，前三周每周测血清或尿hcg直至正常水平，以后一年内逐月监测，有助于判断是否复发，术后36周hcg水平明显下跌，如果hcg水平维持在一定水平或有所上升，应考虑是否有转移性疾病的可能。有作者报导，脑脊液与血清的hcg比值，有助于确定有无脑转移。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,33,（五）妊娠残留物的检测,在胎块去除、自发性或诱导性流产、药流、宫外孕手术治疗或保守治疗后，hcg定量监测有助于证实滋养层组织的完全消除。hcg清除速率个体差异很大一般术后第一天可跌落约1/2，以后数天中跌落1/2，数周后可回复到正常水平。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,34,（六）作为肿瘤标志物的应用,hcg定量有助于监测卵巢胚细胞瘤的治疗效果。由于个体差异的关系，应注意测定治疗前的hcg值作为基准，与治疗后的值相比较，是增加还是减低来判断疗效。hcg定量在诊断或跟踪绒毛膜癌上十分有用，hcg大于40000miu/ml与不良预后相联系。精原细胞瘤病人的血清或尿hcg水平如高于正常情况提示预后差，化疗剂量应提高。非精原细胞瘤占睾丸细胞肿瘤的60，如膀胱癌患者，其hcg水平升高意味着疾病的进展和放射治疗的无效。,hcg定量检测的临床意义,www.poct.com.cn,35,hcg检测结果持续100mui/ml时应引起注意,一般情况下，知道测试样品hcg在25100miu/ml之间已能满足临床需要。特殊情况下如临床需要了解25100miu/ml之间的详细数据时，在25100miu/ml的低浓度曲线程序下用原测板处理后重新再测。再加血清，洗涤后再加金标液，洗涤后再测；尿液标本不加，再加金标液100miu洗涤后再测。仪器可显示：25miu/ml；或2599miu/ml之间的具体数字。,www.poct.com.cn,36,hcg定量检测和数据分析比较对临床诊断和鉴别诊断的价值充分说明，仅是妊娠试验阳性对上述疾病并无诊断意义。,hcg检测结果持续100mui/ml时应引起注意,www.poct.com.cn,37,hcg检测时需注意的情況,hcg检查时，須注意交叉反应常用hcg检测方法及乎不能排除lh