人源性生物制品ppt课件.ppt

二 人源性生物制品的种类 血液制品尿液制品胎盘制品人体液细胞中的活性物质 血液制品的定义 由健康人血浆或特异免疫人血浆分离 提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组份或血细胞组份制品 如人血白蛋白 人免疫球蛋白 人凝血因子 红细胞浓缩物等 用于诊断 治疗或被动免疫预防 原料 血浆现有种类 人血白蛋白 人胎盘血白蛋白 静脉注射用的免疫球蛋白等十几种制品 第二节血液制品P102 NP123 血液的组成 50 60 40 50 91 92 8 9 白细胞 数量 4 10 x109个 L 粒细胞 淋巴细胞 单核 巨噬细胞 一 血液制品的种类全血血液成分制品 红细胞制剂 白细胞制剂 血小板制剂 血浆制剂血浆蛋白制品 国际上大规模生产和推广应用的血液制品主要有三类 白蛋白各种免疫球蛋白 包括肌注 静注和各种特异性免疫球蛋白 凝血因子制剂 主要为F 和F 浓制剂 就我国目前的血液制品而言 还是以血浆中提纯的血浆蛋白制剂为主 血浆蛋白制品获得途径从健康人血浆或从特异免疫人血浆分离 提纯用重组DNA技术制备重组血浆蛋白制剂 广义的血液成份制品指由全血分离制备而成的各种血液成分制品和血液衍生物制品 现在血液成分制品主要是指以一单位全血为原料 用简单的物理方法 分离制备而成的制品 可直接用于临床输注而不需要作进一步处理 属于 单供者制品 这类制品主要有 红细胞 血小板 血浆和冷沉淀等 血液成份制品 血液衍生物 主要指血浆蛋白的衍生物 用复杂的物理和化学方法将由许多献血员采集的混合血浆分离制备而成的血浆蛋白制品 主要有 白蛋白 免疫球蛋白和凝血因子制品等 悬浮红细胞 packedRBC 洗涤红细胞 washedRBC 去甘油冷冻红细胞 FrozenDeglycerideRBC 新鲜冰冻血浆 FreshFrozenPlasmceFFP 冰冻血浆 FrozenPlasmceFP 去病毒血浆冷沉淀 cryoprecipitate 单采血小板 plateletpheresis 浓缩白细胞 WBCconcertrate 辐照血 血液成份制品的种类 某院2009年用血一览表 是全血通过离心的方法将大部分血浆移去后 加入适量添加剂的红细胞成分主要成份 红细胞 添加剂 稳定的凝血因子 也含有白血球和血小板但无功能 悬浮红细胞由于移去了大部分血浆 可减少血浆引起的副作用 由于加入保存液 不仅能更好地保存红细胞 还具有稀释作用 使输注更流畅 功能 每单位MAP可提升Hb5g L 可提高血液携氧能力 适应症 1 慢性贫血2 急性失血 添加剂红细胞 悬浮红细胞 红细胞悬液 优点 除去血液中95 的白细胞 可避免因白细胞凝集所致的发热反应及避免受血者产生白细胞抗体 有效防止非溶血性发热性输血反应的发生 适用疾病 临床应用于多次输血或妊娠 体内产生抗白细胞或血小板抗体的患者预计需要长期或反复输血的患者反复出现原因不明的输血发热反应准备做骨髓或器官移植的患者 有免疫缺陷或免疫抑制的贫血患者 去白细胞的红细胞悬液 主要成份 保留了70 以上红细胞 去除98 以上的血浆 90 以上的白细胞 血小板 同时也去除了保存过程中产生的钾 氨 乳酸等代谢产物 功能 每单位可提升Hb4g L 适应证 临床用于因多次输血而产生白细胞抗体的贫血病人 以及器官移植后病人 减少排斥反应 洗涤红细胞 单采血小板 主要成份 单一供血者血小板浓缩液 含高纯度 高浓度的血小板 少量白细胞功能 提升血小板计数适应症 防止和纠正血小板功能异常和血小板计数减少所造成的严重出血或具有出血倾向的疾病1 血小板 10 20 109 L 白血病 癌症 AA2 血小板 50 109 L 具出血倾向的病人3 血小板 70 109 L 接受外科手术的病人4 血小板 100 109 L 需要脑部开刀的病人5 先天性血小板机能无力症 新鲜冰冻血浆FFP 主要成份 血浆 含所有凝血因子 无白细胞和血小板 功能 补充凝血因子适应症 心脏手术后有出血现象或大手术后有出血现象 大量输血造成的凝血因子稀释 溶血性尿毒症 冰冻血浆FP 主要成份 血浆 含稳定的凝血因子 缺乏因子 无白细胞和血小板功能 除因子 其余皆可补充适应症 1 烫伤病人2 Ig缺乏 新鲜冷冻血浆在1 6 复融后留下冰渣状不溶性成分 高速离心后获得的白色沉淀物主要成份 凝血因子 纤维蛋白原适应症 轻型甲型血友病 血管性血友病 先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子 缺乏症病人 冷沉淀 三 血浆蛋白制品P105 NP126 血浆 水分92 蛋白质6 7 白蛋白 Alb 免疫球蛋白 IgG 65 免疫球蛋白 IgM 纤维蛋白原 Fg 补体 C3 转铁蛋白 Tr 巨球蛋白 a2M 触珠蛋白 Hp a1抗胰蛋白酶 a1AT 血色素结合蛋白 Hpx a1 酸性糖蛋白G a1AG 25 其它百余种微量蛋白质和多肽成份 10 组成人体血浆的成份 1 白蛋白类2 免疫球蛋白类3 凝血系统蛋白4 补体系统蛋白5 蛋白酶抑制物类6 血浆运载蛋白类7 其他血浆蛋白制品 血浆蛋白制品种类 一 白蛋白类制剂P105 NP127 1 白蛋白的作用 1 维持和调节血液渗透压白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质 约占血浆总蛋白的一半多 易大量 高纯度地提取 白蛋白产生的渗透压大而粘度低 是最有效的血容扩张剂 2 为组织提供营养白蛋白能结合阳离子 也能结合阴离子 故能输送性质不同的物质 如脂肪酸 激素 金属离子 酶和药物 3 运输和解毒结合有毒物质运送至解毒器官 然后排出体外 白蛋白在肝脏内产生 每个肝细胞每秒钟能合成约7000个白蛋白分子 正常人每天可合成白蛋白15g 而在失血的情况下 合成速率可提高2 3倍 故在肝功能正常 营养充足的情况下 白蛋白损失后补充很快 一般丧失400ml血浆 1 2天即可恢复 2 白蛋白制剂的种类 目前白蛋白类制剂主要有两种 人血白蛋白和血浆蛋白成分 两者的区别主要在于含白蛋白的纯度不同 前者为96 以上 后者为83 以上 1 人血白蛋白 人血白蛋白是目前国际上使用最多的血液制品 是经低温乙醇法或经批准的其他分离方法 从健康人静脉血浆中提纯 并经60 10小时加温灭活病毒后制成 有液体和冻干两种剂型 2 血浆蛋白成分 是经低温乙醇或其它适当的方法提取的血浆蛋白制剂 一般蛋白质浓度为4 或5 其中白蛋白占83 以上 2 免疫球蛋白类制品P106 NP127 免疫球蛋白构成机体防御感染的体液免疫系统 免疫球蛋白种类 IgG IgA IgM IgD IgE 正常人免疫球蛋白 肌注免疫球蛋白 静脉注射免疫球蛋白特异性球蛋白 1 正常人免疫球蛋白 又称丙种球蛋白或多价免疫球蛋白 简称丙球 仅供肌肉注射用 所以又称肌注免疫球蛋白制剂 是采用低温乙醇法从大量混合血浆 药典要求1000人份以上 中分离制得的免疫球蛋白浓缩剂 有液体剂型和冻干剂型两种 1 免疫球蛋白制剂的种类 主要作用 主要用来预防一些病毒性感染 如甲肝 丙肝 麻疹等疾病的预防以及丙种球蛋白缺乏症的治疗 但是国内滥用正常免疫球蛋白的现象比较严重 一些人认为经常使用丙种球蛋白可以 增强抵抗力 或 有益无害 事实上滥用丙球不但无益 而且可能产生免疫依赖等副作用 是由对某些病原微生物具有高效价特异抗体的血浆制备的特异的高效价免疫球蛋白 与正常免疫球蛋白不同 此类制剂必须具有至少一种高效价特异抗体 用于临床上特定疾病的预防和治疗 目前用于临床的特异性免疫球蛋白有十余种 较常用的如乙肝免疫球蛋白 甲肝免疫球蛋白 破伤风免疫球蛋白 狂犬免疫球蛋白 风疹免疫球蛋白 抗Rh免疫球蛋白 水痘免疫球蛋白等 2 静脉注射免疫球蛋白 3 特异性免疫球蛋白 3 补体系统蛋白制品P107 NP128 补体系统是机体的主要防御系统之一 1 补体系统在细胞吞噬 调理 趋化性 细胞凋亡过程中起重要作用 2 补体系统在自身性免疫疾病中 起着损伤机体的作用 4 凝血系统蛋白制品P107 凝血系统蛋白维持机体的正常凝血机制 分为 1 凝血因子 凝血系统共有13种凝血因子 2 抗凝血因子 抗凝血因子有纤溶酶原 Pg 当它被尿激酶激活之后 就具有溶解血栓的作用 13种凝血因子 因子1 纤维蛋白原 Fg 因子2 凝血酶原 FII 因子3 组织因子 FIII 因子4 钙离子因子5 前加速素 易变因子 FV 因子6 因子7 前转化素 稳定因子 FVII 因子8 抗血友病因子 AHF 因子9 血浆凝血激酶成份 PTC 因子10 Stuart因子 FX 因子11 血浆凝血激酶前质因子12 接触因子 FXII 因子13 纤维蛋白稳定因子 FSF 激肽酶原 pK 高分子量激肽酶原 HMW 纤溶酶原 Pg 蛋白C PC 由于先天性遗传缺陷 可发生各种凝血因子缺乏症 质和量的缺陷 最常见的是甲型血友病 缺乏因子 其次是乙型血友病 缺乏因子 发病率约为甲型血友病的1 4 丙型血友病 缺乏因子 一些肝病疾患可引起继发性凝血因子缺乏 导致凝血机能障碍 这些疾患可选用相应的凝血因子制剂来治疗 1 凝血因子 类制剂P108 1 凝血因子 的作用 甲型血友病是 染色体伴性隐性遗传病 一般仅为男性患病 由于血浆内缺乏F C而发生出血症状 临床表现分为重型 中型 轻型和亚临床型 需输用F 制剂进行治疗 2 生产方法目前我国生产的凝血因子 是将健康人新鲜冰冻血浆 经批准的生产工艺制得冷沉淀 然后分离 提纯 并经病毒灭活处理 冻干制成 称为 人凝血因子 重组F 制剂 是利用基因工程重组技术获得的 在美国已通过临床研究 现已投放于市场 用于甲型血友病的治疗 2 凝血因子 及凝血因子 制剂 1 凝血因子 的作用 乙型血友病是先天性的F 质量缺陷所引起 多为男性患病 乙型血友病可用F 制剂进行治疗 2 生产方法我国目前生产的凝血因子 制剂主要是人凝血酶原复合物 是将健康人血浆经低温乙醇蛋白分离法或批准的其它分离方法分离纯化 并经病毒灭活处理 冻干制成 2 凝血酶原复合物浓缩剂P108 为一组维生素K依赖性凝血因子 因子 因子 因子 的混合物 主要为因子 应用 多种原因所致出血 3 纤维蛋白原制剂 一种糖蛋白 是血浆黏滞性的主要决定因素 存在于组分 中 用于低纤维蛋白原血症治疗 可有效纠正因纤维蛋白原缺乏所致的出血 4 组织纤溶酶原激活剂 是一种单链多肽 激活纤溶酶原转变纤溶酶 纤溶酶水解纤维蛋白凝块 纤维蛋白性血栓 成为纤维蛋白降解产物 从而溶解血栓 5 蛋白酶抑制剂类制品 1 抗胰蛋白酶 一种糖蛋白 它是血清中最主要的蛋白酶抑制剂 对凝血酶 尿激酶等其他酶也有抑制作用 也是一种急性时相反应蛋白 在炎症性疾患时 1抗胰蛋白酶可透过毛细血管进入组织液 在炎症局部往往浓度很高 对急性炎性疾病有一定限制作用 抗凝血酶 一种由肝脏产生的糖蛋白 是体内的一种重要抗凝物质 属于丝酶抑制蛋白 能不可逆地抑制凝血因子 a a a a以及由 a与组织因子所形成的复合体 故具有防止血栓的作用 用于治疗先天性抗凝血酶 缺乏症 获得性抗凝血酶 缺乏 如肝病引起的酶水平降低 或一些血栓性疾病 2 巨球蛋白 是血浆中分子量最大的蛋白质 由肝细胞与单核 巨噬细胞系统合成 具有酶抑制剂的作用 抑制炎症组织释放的各种蛋白酶 同时对不同的病原菌释放的毒素也起到抑制作用 6 血浆运载蛋白类 血浆运载蛋白是指能够对机体的营养物质 代谢产物 激素 药物进行转输的血浆蛋白 具体有 1 白蛋白 转输脂肪酸 色素 阳离子 药物 VC 2 前白蛋白 转输甲状腺素结合蛋白 视黄醇结合蛋白 3 类脂蛋白 转输脂质 胆固醇 激素 4 类脂蛋白 转输脂质 胆固醇 激素 5 触珠蛋白 转输游离血红蛋白 6 血红蛋白结合蛋白 转输游离血红蛋白 7 转铁蛋白 将铁转输给网织红细胞和其它组织 8 铜蓝蛋白 转输铜 调节铜吸收形成酶 9 转钴胺蛋白 转输VB12 10 GC球蛋白 转输维生素D 二 血液制品的安全性P111 1 可由血液制品传播的病毒 国家药监局规定 血液制品生产工艺必须包括病毒灭活 去除步骤 血浆蛋白制品的生产 包括一步或两步病毒灭活 去除工艺步骤 病毒灭活 去除方法 须经国家药品管理部门批准后方可使用 2 血液制品的病毒灭活 去除工艺 病毒灭活方法 1 加热法 巴氏消毒法 60 10h 即在60 0 5 连续加热10 11小时 白蛋白采用这个方法进行病毒灭活 通常是在除菌过滤 分装到最终容器以后进行加热处理 通常 为防止蛋白质变性 在除菌过滤前要加入低浓度的辛酸钠或辛酸钠与N 乙酰色氨酸作为保护剂 几十年的临床使用情况证明 采用低温乙醇法和巴氏灭活方法生产的白蛋白对肝炎病毒和HIV是安全的 干热法 80 72h 冻干品加热法蛋白质冻干除去水分以后可以耐受60 80 或更高温度 在80 以上加热可以产生令人满意的对HBV HCV HIV和HAV的病毒灭活效果 冻干品加热法一般多用于凝血因子类产品 由于冻干后病毒也更稳定 因此 必须进行在规定条件下的病毒灭活验证 冻干品加热法的病毒灭活效果受产品的水分残留量 组成成分如蛋白质 糖 盐和氨基酸的含量以及冰冻与冻干时间的影响 由于病毒灭活对水分残留量特别敏感 因此要根据验证结果设置允许的水分残留限度 并保持瓶间残留水分的差异处于限度内 2 有机溶剂 表面活性剂 S D法 P112 S D法磷酸三丁脂 TNBP 0 3 Cholate 0 2 30 6h TNBP 0 3 Tween 80 1 24 6h TNBP 0 3 Triton 100 1 24 4 6h 有机溶剂与去污剂的混合物 S D 能够破坏包膜病毒的脂膜结构 导致受到破坏的病毒无法与感染细胞结合 但该方法不能灭活非脂包膜病毒 3 丙内酯法P113 丙内酯自1984年作为狂犬疫苗的灭活剂以来 已被广泛应用于多种人和动物疫苗的生产 但 丙内酯可能具有致癌性 5 低pH法 pH 00 0 20 24 21天 低pH法在某些酸性条件下 脂包膜病毒可以被灭活 免疫球蛋白经低pH如pH4 处理 可以有效灭活几种脂包膜病毒 如在免疫球蛋白生产中 通常采用20 22 pH4 1培育21天 灭活条件如pH值 孵放时间和温度 胃酶含量 蛋白质浓度 溶质含量等因素 可能影响灭活效果 应确定这些参数允许变化的幅度 6 美蓝 荧光照射法P114 可杀灭大多数脂质包膜病毒对非脂质包膜病毒杀灭效果不佳 病毒去除方法 层析 离子交换或亲和层析 纳米膜过滤 使用20nm或50nm的膜过滤 血液制品常用病毒灭活方法 1 人血白蛋白 巴氏消毒法 60 10小时 2 IVIG IMIG 包括特异性免疫球蛋白 低pH孵放法 pH4 巴氏消毒法 低pH孵放法加纳米膜过滤 巴氏消毒法加低pH孵放法 S D 有机溶剂 去污剂 法3 人凝血因子 S D法 S D法 100 30分钟 干热法 80 72小时 血液制品常用病毒灭活方法 第五节人源性生物制品制备实例P119NP156 白蛋白又称清蛋白 白蛋白是血浆蛋白中含量最高 分子量最小 分子数最多的一类蛋白质 白蛋白对治疗因失血 创伤 烧伤等引起的休克 脑水肿和大脑损伤性所致的脑压增高 防止低蛋白血症 肝硬化或者由肾病引起的水肿与腹水等严重疾病具有良好疗效 一 人血浆白蛋白制剂的制备 白蛋白为单链分子 由584个氨基酸残基组成 N端为天门冬氨酸 C端为亮氨酸 分子量为6 6 104 在离子强度为0 15时 pI为4 7 易溶于水 在60 硫酸铵饱和度以上沉淀 对酸较稳定 受热变性 从人体中分离的白蛋白有两种 一种是从健康人血浆中分离制得的人血白蛋白 另一种是从健康产妇胎盘中分离制得的胎盘血白蛋白 常用的血浆蛋白分离纯化技术1 低温乙醇沉淀法分离血浆蛋白 1 原理在介电常数大的溶液中 蛋白质的溶解度大 在介电常数小的溶液中蛋白质的溶解度就小 乙醇能显著地降低蛋白质水溶液的介电常数 从而使蛋白质从溶液中沉淀析出 蛋白质分子量越大 越先析出 蛋白质分子量越小 越后析出 乙醇为有机溶剂的优点 化学性质稳定 毒性低可与水任意混合 使用方便易得 易回收 污染小冰点低 在生产条件下不产生具有爆炸性危险的气体混合物抑制细菌生长 对病毒有较强的杀灭作用对蛋白活性影响小 1 pH2 乙醇浓度3 温度4 蛋白质浓度5 离子强度在五变系统中 对蛋白分离最重要的变化因素是pH和乙醇浓度 2 低温乙醇法中影响蛋白质沉淀反应的因素 A pH当pH位于等电点时 蛋白质的溶解度最小 所以最易沉淀以根据蛋白质的等电点不同顺序沉淀出不同的血浆蛋白 通常低温乙醇法是在pH4 4 7 4之间进行分离 B 温度温度低 蛋白质的溶解度低 溶液中加入乙醇 因乙醇的水合作用 会产生放热现象 而温度升高可能造成蛋白质的变性 所以在低温乙醇工艺中 整个过程均应控制在0 8 如温度控制不当 轻则会影响蛋白质的得率 重则引起蛋白质变性 C 蛋白质浓度如果溶液的蛋白质浓度较大 容易引起多种蛋白共同沉淀 所以在分离过程中 可将蛋白质溶液作适当的稀释 以减少蛋白质之间的相互作用 避免多种蛋白共同沉淀 但过分稀释 蛋白质易变性 同时增大分离的容量 也不可取 所以应选择适宜的浓度 在低温乙醇工艺中 蛋白质浓度范围为 0 2 6 6 D 离子强度盐类与蛋白质的互相影响随离子强度而变化 在低盐溶液中 盐浓度的很小改变即可引起蛋白质溶解度的极大变化 离子强度用r 2表示 低温乙醇法工艺中离子强度的变化范围在0 01 0 16 正常人血清的离子强度接近于0 15 E 乙醇浓度乙醇能降低蛋白质溶液的介电常数 随着乙醇浓度的增加 蛋白质溶液的介电常数逐渐降低 而其溶解度急剧下降 在低温乙醇工艺中 乙醇的浓度范围在0 40 低温乙醇法优点 相对简单的操作 产量高 适宜工业化规模生产 保持蛋白质的天然特性 抑菌作用 同时分离多种血浆成分 适于血浆综合利用 乙醇作为主要原材料 价格低廉 易于获得 血浆 Cohn6法工艺流程 Cohn6法工艺流程 1 离子交换层析 2 凝胶过滤层析 3 亲和层析法 层析法 常用层析载体纤维素 cellulose 葡聚糖凝胶 Sephadex 琼脂糖凝胶 Sepharose 聚丙烯酰胺凝胶 Bio gel 多孔玻璃珠 Bio Glass 重组人血白蛋白 补 人血清白蛋白 humanserumalbumin HSA 是迄今为止产量最大 用量最多的血浆蛋白药物 在临床和生物产品中的广泛应用使其在国内外均具有很大市场 由于rHSA批次之间的产品均一度好 纯度高 生产规模不受限制 无病毒传播风险 从而赋予其巨大的市场前景 重组人血白蛋白的种类 输注用rHSA辅料级rHSA重组白蛋白融合蛋白药物 天然尿激酶 UK 是由两条肽链通过二硫键连接而成 是丝氨酸蛋白酶 丝氨酸 组氨酸是活性中心必需的氨基酸 血纤维蛋白溶酶原是唯一的天然蛋白质底物 使纤溶酶原转为纤溶酶 尿激酶用于治疗各种新血栓形成或血栓梗塞疾病 二 尿激酶 urokinase 的制备 图3 2尿激酶生产工艺路线 4 工艺要点 收尿 男性尿 8h内处理 调尿液pH6 5以下 硅藻土吸附 加入1 的硅藻土 5 下搅拌吸附1h 洗脱 硅藻土吸附物用5 冷水洗涤后装柱 当洗脱液由清变浑时开始收集 除热原 色素 收集液用饱和NaH2PO4 调pH8 0 加NaCl调电导至22ms 过DEAE SephadexA50层析柱 收集流出活性部分 CMC浓缩 流出液用1mol LHAc调至pH4 2 用蒸馏水调电导至16 17M 通过CM C层析柱 用10倍体积的pH4 2的HAC NaAc缓冲液洗涤柱床 洗后用0 1 氨水0 1mol LNaCl溶液洗脱尿激酶 收集活性组分 杂质被吸附 产品质量 无色澄清液或白色冻干粉末 酶活力 15000IU mg蛋白质 1 HCG的性质HCG是一种糖蛋白 由 两亚基组成 易溶于水 pI为3 2 3 3 HCG由胎盘滋养层合体细胞所分泌 妇女妊娠45 70天 尿中HCG含量可达30 000 50 000IU 24h 治疗女性不育症 神经性皮炎 男性性功能过低症和隐睾症 子宫出血和习惯性流产 三 人绒毛膜促性腺激素 HCG 的制备 图3 3HCG生产工艺路线 2 HCG生产工艺路线 3 工艺要点 吸附粗品 HCl调孕妇尿至pH4 5 加苯甲酸 乙醇饱和液 孕妇尿 苯甲酸乙醇饱和液 乙醇 1 0 075 5 搅拌1h静置2 3h 过滤 弃滤液 得吸附物 在搅拌下加入95 乙醇 至苯甲酸全部溶解有絮状沉淀产生 静置过夜 离心 沉淀用95 乙醇和丙酮洗涤 干燥得粗制品 提取 加10倍量的4 1 15mol L pH4 8醋酸盐缓冲液 搅拌4h 离心 取上清液 沉淀再提取2h 合并两次提取液 弃去沉淀 离子交换层析 CM Sepharose柱用0 01mol L的醋酸盐缓冲液平衡后样品上柱 依次用pH4 8 0 01mol L的醋酸盐缓冲液和pH5 9 0 01mol L的磷酸盐缓冲液洗涤出两个峰 杂质 再用pH8 5 0 2mol L的醋酸盐缓冲液洗脱 得到的第3峰即为HCG 羟基磷灰石柱层析 柱用pH6 8 0 5mmol L磷酸盐缓冲液平衡 样品用pH6 8 0 5mmol L的磷酸盐缓冲液进行层析上柱 洗脱先用pH6 8 0 5mmol L再用pH6 81 0mmol L的磷酸盐缓冲液 得到I II活性峰 然后冷冻干燥 HCG纯品的比活性为10 000 12 000IU mg蛋白质 1 性质 由活化的淋巴细胞所产生的 糖蛋白有一个链内二硫桥 58位 105位 等电点为pH6 5 2 工艺路线 图3 4 诱生白细胞培养液 0 4mol LNaCl PBS pH6 5 UltrogelACA44柱 pH7 6 图3 4为IL 2生产工艺路线 四 白细胞介素 2 IL 2 的制备 3 工艺要点 诱生 刺激人外周血白细胞 37 培养 病毒灭活和固液分离 HCl调节pH再用NaOH