《人参中异菌脲的测定HPLC 法》编制说明

1吉林省地方标准人参中异菌脲的测定 HPLC 法编制说明(送审稿)农业部参茸产品质量监督检验测试中心2011 年 11 月 09 日DBICS：备案号：2人参中异菌脲的测定 HPLC 法编制说明一、任务来源根据 2010 年吉林省质量技术监督局和吉林省农业委员会下达的“ 关于下达 2010 年度吉林省标 准制修订项目计划的通知（吉质监标函【2010】264 号）”，吉林 农业大学在 2010 年组织实施人参中异菌脲的测定 HPLC 法（计划编号 10078）地方标准的制定。 二、标准编制的目的人参是吉林省最具优势的特产业，已成为吉林省中草药出口创汇的主导产品，但由于生产中或者盲目使用高毒高残留农药，或施药的种类不对或使用次数过多、剂量过高，或施药方法不正确，导致吉林省人参农药残留超标较为严重，严重影响了吉林省人参的国际市场信誉及产业效益，使我省人参虽然产量是韩国的 3 倍多，但产值只是韩国的 1/4 的局面。在栽培人参生产中，为了提高产品的质量安全，各国均寻求开展人参生产中使用高效、低毒、低残留农药的研究。吉林省也开展了相应的研究。但是没有残留量检测的方法标准，不利于产品的质量评价、产品监管和贸易往来。3因此，建立用高效液相色谱-紫外法检测人参中异菌脲杀菌剂残留量的测定方法填补了人参中这种农药检测标准的空白、用于商业、贸易、质量监管等活动中产品质量的评价。为规范我省人参病虫害防治，降低我省人参产品农药残留量，有效保障我省人参的规范化生产和产品的质量安全，提升我省乃至我国人参在国际市场上的信誉及竞争能力，为我国人参出口突破国际贸易技术壁垒提供科学保障，具有重要意义。 三、编制原则和依据本标准在编制过程中主要的编制原则是在保证合格收率前提下，尽量净化样品，除去干扰，确保所制定的标准科学、准确，且切实可行。本标准依据 GB/T1.1-2009标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写规则和 GB/T 20001.4-2001标准编写规则 第 4 部分：化学分析方法的格式起草制定的。 四、标准制定的主要过程在标准编制期间，我们查阅了国内外相关资料，通过大量的试验、验证工作，参照国内外相关标准的基础上形成了本技术标准的送审稿。五、标准方法的建立与验证4本标准的提取方法采用的是超声波取法；在净化上采用了目前残留检测中应用最为广泛的 SPE 法。并且在提取时间、提取液配比及洗脱液的配比方面做了大量的工作，最后筛选出标准中的方法。一一一 提取时间与提取次数的确定304050607080901001 2 3 4提 取 次 数 /次R/%10min/次20min/次30min/次5min/次图 1 不同提取时间与提取次数异菌脲残留量变化实验结果表明，残留量随着提取时间的延长，提取次数的增加而增加，但是提取 30min/次，提取 3 次后，残留量增加变缓甚至不再继续增加，因此提取 30min/次，3 次，能够提取完全。（二）提取液配比的确定540506070809010010 20 30 40提 取 时 间 /minR/%4:13:25:11:1图 2不同提取液配比异菌脲残留量变化图中的数据表明，丙酮+石油醚（v/v ）=1+4 作提取剂是最佳的选择。（三）洗脱液的配比的确定图 3不同洗脱液液配比异菌脲残留量变化5060708090100二 氯 甲 烷 ： 甲 醇R/% 系 列 170:30 80:20 90:10 95:5 98:26结果表明，用二氯甲烷+甲醇（v:v ）=95+5 的混合溶剂做洗脱液，残留收率好，且杂质少。（四）方法的准确度、精密度、最低检出浓度及线性范围1 方法的准确度、精密度方法的准确度用添加回收率来表示，精密度用变异系数来表示结果详见表 1。称样量 1.0 g，3 个添加水平，5 次重复，测定结果均符合农药残留分析的要求。表 1 异菌脲准确度和精密度农药名称 添加浓度/(mg/kg) 平均加标回收率 (%) 变异系数（ %）0.2 105.7 9.50.5 97.3 7.9异菌脲1 92.9 7.22 方法的最低检出浓度方法的最低检出浓度按下式计算： )()(10)(mg/k)( gLmg样 品 质 量样 品 溶 液 进 样 体 积样 品 溶 液 定 容 体 积最 小 检 出 量方 法 最 低 检 出 浓 度 异菌脲最小检出量为 910-10g, 最小检测浓度为0.18mg/kg。3 线性范围配制异菌脲一系列标准溶液进样（5 点）实测结果计算后的直线回归方程，见图 4。本方法异菌脲标准曲线的线性范围为 0.1g/mL5g/mL，相关系数异菌脲 r2 =0.9992。在此范围内具有良好的线性范围（如图 4）。图中 y =57.75x+0.267y = 57.754x + 0.263R2 = 0.99920501001502002503003500 1 2 3 4 5 6进 样 浓 度峰面积图 4 异菌脲标准曲线（五）方法的验证参照 GB/T 6379-2004，标准起草小组组织 3 家实验室对标准进行了验证试验，结果表明该标准方法原理明确，测定方法科学合理，适合作为人参中异菌脲农药残留量的测定。六、与国外同类标准水平的对比分析通过联机检索，未查到与本标准相关的国内外标准。七、与有关的现行法律、法规和强制性（国家、行业、地方）标准的关系本标准符合现行的法律法规和强制性（国家、行业、地方）标准要求。八、重大分歧意见的处理经过和依据专家意见基本全部采纳，对于方法基本未有重大分歧。九、本标准作为推荐性地方标准的建议8由于人参产品的质量安全关系到吉林省人参的国际市场信誉及产业效益，建议将人参中异菌脲的测定 高效液相色谱仪法作为推荐性地方标准批准发布，用于商业、贸易、质量监管等活动中产品质量的评价。十、贯彻标准的要求和措施建议(包括技术措施、管理措施、实施方案等内容)（一）技术措施要求熟练掌理化分析技术，了解仪器性能、原理，且能熟练操作，能对检测结果进行分析。（二）管理措施本标准在实施过程，严格执行检验规范，熟悉检验方法和有关的法规。做到科学、公正、准确、不受其他因素干扰，确保检验结果的准确可靠。（三）实施方案（1）本标准由吉林省质量技术监督局发布，XXXX 年 X 月 X 日发布实施，由 XXXX 行政主管部 门负责监督实施。（2）该标准被批准后，组织力量，进行宣贯实施。通过该标准的贯彻实施，在保证人参产品质量、规范市场、引导消费、促进生产、增加出口创汇和保障人体健康等方面将产生显著的经济效益和社会效益。十一、参考标准和资料91 GB/T 15517.1-1995 模压红参分等质量标准.2 中华人民共和国药典2000 年版一部.3 国家商检局 FDA-PAM 编译， 农药残留量分析手册，长沙；湖南科学技术出版社，1990.4 樊德方主编. 农药残留量分析与检测，上海；上海科学技术出版， 1982.5 岳永德. 农药残留分析 中国农业出版社出版, 2004.6 王绪卿 吴永宁. 色谱在食品安全分析中的应用化学工业出版社，2005.7 徐应明 刘潇威. 农产品与环境中有害物质快速检验技术 化学工业出版,2006.8 王大宁 董益阳 邹明强. 农药残留检测与监测技术 化学工业出版社，2006.9 GB 4839-1998 农药通用名称.10 SN/T 1001-2001 出口人参检验方法.11 GB/T 1.12000 标准化工作导则 第 1 部分：标准的 结构和编写规则. 12 NY/T 1380-2007 蔬菜、水果中 51 种农药多残留测定 气相色谱-质谱法.13 黎其万， 刘宏程，张玉荣等. 雪莲果中甲霜灵、异菌脲和除虫脲残留量的高效液相色谱测定方法. 分析试验室