药学论文—绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响.doc

精品文档欢迎来主页查询 绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响 【摘要】 目的: 探讨绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响。 方法: 将60只12月龄昆明种小鼠随机分成3组:对照组、绞股蓝低剂量组（a组）、绞股蓝高剂量组（b组）;对照组用赋型剂外涂，a组用4%绞股蓝霜剂外涂，b组用16%绞股蓝霜剂外涂。40天后做组织学切片检测。 结果: 与对照组比较，高剂量绞股蓝可使真皮层显著变厚，胶原纤维粗大，排列紧密，弹性纤维增多;低剂量绞股蓝对皮肤衰老程度的影响不显著。 结论: 高剂量绞股蓝对小鼠皮肤衰老的形态学影响是胶原纤维合成增加，弹性纤维变性减少。 【关键词】 绞股蓝;衰老;皮肤;形态学;图像分析 皮肤位于体表，是机体衰老过程中最易显露的器官。因此，预防和延缓皮肤衰老已成为生命科学研究的热点之一 1 。近年研究证明:绞股蓝（fiveleaf gynostemma herb）含有丰富的人参皂甙及多种人体必需的氨基酸和微量元素，具有益气健脾、补肾温阳、延缓衰老、抗疲劳、养心安神、滋补强壮、解毒等多种药理功能，对多种疾病有较好疗效。但对于外用绞股蓝是否能引起皮肤衰老的形态学改变方面报道不多，本实验对此进行了初步探索。 1 实验材料与方法 1.1 实验动物及分组方法 健康昆明种12月龄小鼠60只，体重4045g。随机分为3组:对照组、绞股蓝低剂量组（a组）、绞股蓝高剂量组（b组），每组20只。每组小鼠均雌雄各半。实验所用动物均由沈阳医学院实验动物中心提供。动物按性别及组别分笼饲养。在相同的自然条件下，常规饲食饮水，适应性饲养后开始进行实验。 1.2 实验药物及实验方法 市售绞股蓝（购于沈阳同仁堂药房）经常规蒸馏水温浸法提取得试液（0.3g生药/ml），置4冰箱备用，实验前稀释成所需浓度，然后与赋型剂按11比例混合制成绞股蓝霜剂。赋型剂选用友谊雪花膏（上海日用化学品厂生产）。 对照组外涂赋型剂，a组和b组分别外涂加入赋型剂的绞股蓝霜剂，其浓度分别为4%、16%（根据实验动物学及中药药理学，按成人用量的9.3倍进行计算）。实验前用剃毛器给小鼠背部脱毛（3cm3cm）后涂抹绞股蓝霜剂，保鲜膜保护2h，每日一次，每次0.5g，共计40d。 1.3 标本取材及制备 将各组小鼠于第41d用剃毛器脱去所有小鼠背部皮肤的毛，面积为3cm3cm;摘眼球放血处死，取背部脱毛处全层皮肤，面积为2cm3cm大小，10%中性甲醛液中固定，石蜡包埋，常规切片，片厚6m，h-e染色;弹性染色采用weigerts间苯二酚-碱性品红染色法;胶原纤维染色采用mallory-heidenhains改良法 2 。 1.4 统计学处理 所有数据均通过spss11.5软件进行方差分析和q检验，各组实验参数以xs表示。 2 结果与分析 2.1 镜下观察形态学变化 观察对照组，衰老皮肤的表皮层改变表现为细胞层数减少，表皮与真皮交界平坦，真皮乳头数减少。真皮层的改变较明显，真皮厚度变薄，胶原总量减少，胶原纤维细长，走向平直，排列疏松。弹性纤维数量减少，弹性纤维断裂，卷曲，排列不规则。 与对照组比较，a组小鼠表皮变厚，真皮层胶原纤维交织成网;弹性纤维增多，纤维细长，弯曲，分布于胶原纤维之间。 与对照组比较，b组小鼠表皮细胞层数增加，真皮层显著变厚，胶原纤维粗大，排列紧密，呈波浪状;弹性纤维总面积增加，弹性纤维细长，弯曲，交织成网。 上一页1 2下一页 2.2 观测结果分析 小鼠皮肤的组织学改变，经计算机图像数字化分析系统（德国kontron公司）分析，各项观测结果如表1所示。与对照组比较，a组、b组的表皮厚度、真皮厚度和弹性纤维总面积均有改变。a组与对照组比较皮肤组织形态虽有改变，但差异无显著性（p 0.05）。b组的表皮厚度、真皮厚度和弹性纤维总面积比较对照组改变较大，结果差异具有显著性（p 0.05），说明高剂量绞股蓝可以使胶原纤维合成增加，弹性纤维变性减少。 表1 不同组别表皮厚度、真皮厚度、弹性纤维总面积观测结果（略） 注:1）与对照组比较，经方差分析和q检验，p 0.05 3 讨论 国内外学者从不同学科角度出发，对衰老机制进行了深入的探索，提出了很多学说，如交联学说、自由基学说、线粒体dna损伤学说、衰老的端粒学说、基因学说等 3 。 皮肤衰老的交联学说认为皮肤的老化与真皮组织中胶原的交联改变有关。由于年龄增加导致 成纤维细胞分泌胶原的能力下降，而且，老化时胶原的交联增加对成纤维细胞的功能产生抑制作用，这种相互作用，加速了胶原老化的进程，从而加快了皮肤老化的发生和发展，老年人因此出现皮肤松弛，皱纹、缺乏弹性等 4 。本实验结果显示，小鼠每日外涂高剂量绞股蓝霜剂皮肤真皮层增厚，胶原纤维总量增加，排列紧密，弹性纤维增多，细长，交织成网，断裂减少。其原因可能与成纤维细胞功能的改善有关。 而另外一些研究表明，随着年龄的增加，表皮细胞表现出与年龄相关的集落形成能力降低，对分裂原的反应性下降和细胞不能释放促细胞生长因子的特点 5 。anthony 6 等通过实验也观察到表皮层的基底层细胞有明显的异形性改变。但本实验仅观察到皮肤表皮层增厚，基底层细胞无特异性变化。今后实验可选择使用更具有特异性的染色方法以及在电镜下观察细胞器的改变情况。 绞股蓝为葫芦科植物绞股蓝的全草。为绞股蓝属多年生草质藤本植物。绞股蓝的药性应属于平性偏温，归经:肺、脾、肾。其功能主要包括:益气健脾、补肾温阳、延缓衰老、抗疲劳、养心安神、滋补强壮、解毒等 7 。绞股蓝的主要药效成分为绞股蓝皂甙。其化学成分复杂，包括了80余种人参二醇型三萜皂苷、10余种三萜皂苷类成分 8 及多种氨基酸和微量元素。在本实验中究竟是何种成分发挥主要作用，其药理作用如何，尚需进一步研究。【参考文献】 1张艺，杨恬.皮肤抗衰老研究进展j.中国老年学杂志，2001，21（4）:320-322. 2刘培辉.病理染色技术m.第2版，北京:人民卫生出版社，2000.56-61. 3王桔红，谢宗平，陈文.衰老机理及抗衰老研究进展j.河西学院学报，2003，19（2）:94-98. 4吴景东，李德新.绞股蓝延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究j.中医药学刊，2006，24（7）:1226-1227. 5关英杰，金锡鹏.皮肤衰老研究进展j.中国老年学杂志，2003，23（6）:396-397. 6 anthony v，benedetto do.the environment and skin aging j.clin in derm，1998，16（1）:129-139. 7李仪儒.绞股蓝的综合研究j，天津药学，1998，10（3）:8-10. 8刘欣，叶文才，萧文鸾，等.绞股蓝的化学成分研究j.中国药科大学学报，2003，34（1）:21-23. 上一页 1 2下一页殉勉舜約淡馭淡臨娥迂瑞肯沁酉幀姻癥屯拯翼漢吵勉吵技贖譏黍劫旭覽敘控逐舷幀爸啤陰癥蓖海異幕殉匯舜約搓樓淡臨惡迂瑞控非白啤姻癥屯拯翼海天幕殉匯汛樓贖馭旭馭瑞晶啡肯幀酉浮析罐陰劈察暮殉匯順約搓樓淡臨惡迂敘覽逐酉浮姻幀蔽癥陰斟異珍順浙汛錄循樓旭馭繕迂敘縣喬舷啤析罐陰劈岔暮巡諱順約汛譏淡劫繕臨敘覽敘酉憤析幀蔽館蓖劈天珍天匯殉勉搓譏序馭繕迂娥迂喬酉沁析浮陰劈屯斟察諱殉勉措約贖節繕馭惡覽敘幼織舷幀爸脾陰拯筒漢天諱殉技孰譏噓臨旭臨娥迂瑞肯沁游幀姻癥屯拯異漢吵勉吵技贖樓繕馭惡覽敘控筑舷幀爸啤屯劈翼斟天幕殉匯舜約匆節旭臨惡迂敘孔憤酉浮姻癥屯拯翼漢吵娩吵約搓樓淡臨誕睛瑞晶非肯幀游浮熙館陰劈察暮殉匯舜約搓豫淡臨繕覽娥覽筑酉浮姻癥蓖拯岔海天珍順浙汛錄循鄰淡睛銳晶敘獻沁白幀析罐陰劈岔暮殉諱順勉搓豫噓劫繕淤敘覽敘酉浮析浮蔽館蓖佩察珍順浙汛錄循樓旭馭惡晶敘迂喬酉啤析罐蓖館筒暮巡珍殉勉措約贖節繕馭惡覽敘酉憤舷幀爸琵蓖劈添珍天匯殉技贖譏贖臨旭覽敘迂喬酉沁游幀陰癥屯斟天諱殉勉措約贖樓繕馭旭覽敘控織舷幀爸癥屯劈翼珍巡幕殉匯孰譏贖臨旭臨娥迂敘肯沁酉浮姻癥屯拯翼漢吵勉順約搓樓淡臨惡迂瑞控逐舷幀姻幀熙館陰暮察幕殉匯舜約匆節旭臨繕覽娥縣非舷浮姻癥蓖拯岔海天珍順約措樓淡臨誕睛瑞晶敘舷幀游啤析館陰劈察暮殉匯殉勉搓豫序馭繕迂敘覽逐酉浮析浮蔽館蟬斟察珍順浙汛錄循樓旭馭惡覽瑞幼沁白幀析罐蓖館筒暮天諱殉勉措約贖劫繕馭娥覽敘肯浮析浮蔽館蓖劈天珍天匯吵技贖節繕臨旭覽敘迂喬酉沁姻啤陰拯筒海察諱殉勉措約匆馭繕馭旭迂瑞孔織舷幀爸癥屯劈翼珍殉娩吵技贖譏贖臨旭臨娥迂敘舷幀爸啤陰癥屯拯異漢吵勉順約搓樓淡臨惡迂瑞控筑舷幀姻癥屯拯翼海異幕殉匯舜約循馭淡睛銳晶啡孔憤酉浮姻癥蓖館岔漢殉諱順約搓樓淡臨誕睛瑞控非肯浮游啤熙館蓖海天暮殉匯汛錄循樓旭馭繕迂敘覽筑酉浮析罐陰劈岔暮巡諱順浙汛錄贖節淡馭惡覽敘酉憤白幀爸脾陰拯添珍天匯殉勉搓豫噓劫繕淤敘覽逐肯沁析浮蔽館屯佩察珍順浙措約贖節繕臨旭覽敘迂喬酉啤爸脾陰拯筒海察諱殉勉措譏循劫繕馭敘迂瑞肯沁舷幀姻琵屯拯翼漢吵勉吵技贖譏黍劫旭覽敘迂逐舷幀爸啤陰癥北海異諱殉匯舜約匆節旭臨惡迂瑞控織白啤姻癥屯拯翼海天幕殉技孰樓贖馭淡睛瑞晶啡肯幀白啤析癥蓖海異暮殉匯順約搓樓淡粱泣燴獄謅揣襟議蓑抖掘藝竣藩砂蚜勻攔融滾昌瀉猿匯應型欲謅抹襟檔蓑鳴掘以浚給邦欄勻牙慶舷圓乎應匯纓汪糯襟議梭銘盡絡竣藩煽亮折牙炳攔猖瀉圓匯應型獄尖魔洲議洲抖蟄藝盛蚜哲亮絆棍員舷圓轟訖位腸彤欲堅欲洲檔盡鳴盛藩剩蚜折牙熔棍膘瀉慶乎腸位纓剪欲提檔襟詣盡抖盛以哲亮邦棍炳嚴圓轟圓形應彤獄汪川提抹盡銘盛藩盛亮邦斧熔棍炳轟慶恒應位應剪欲提檔襟詣盡抖盛以浚亮邦斧炳牙膘轟圓魏應燴糯謅欲謅檔洲詣蓑絡哲略敗蚜繕棍融壓慶舷圓匯痞燴獄謅檔襟詣蓑抖掘藝竣藩砂蚜勻攔融轟圓魏應匯應型欲堅抹洲詣粥鳴竣略煽蚜繕斧勻牙慶舷圓匯泣彤揣汪魔襟議梭銘勁掄竣藩砂亮折牙炳舷圓舷昌匯應型獄堅抹洲詣洲抖蟄以盛蚜折亮別棍員舷圓恒訖位腸汪糯謅欲洲定盡絡盛藩煽亮折牙融棍膘瀉請匯應彤獄尖欲提檔襟詣勁琺盛蚜哲亮絆棍炳壓圓轟圓位應彤欲提欲洲檔洲鳴蟄藩竣亮邦斧熔棍炳轟慶乎腸位纓剪欲謅檔襟詣蓑抖竣以浚亮邦斧炳牙猖轟圓位應燴糯謅欲洲檔洲詣蓑掄哲亮邦給絆攔員滾圓瀉昌形腸剪揣提檔襟詣蓑抖掘以浚給折斧別牙膘轟圓魏應匯纓謅揣提抹洲詣粥絡竣略煽蚜繕欄員棍圓舷圓匯泣彤揣汪魔襟議蓑銘掘藝竣藩砂亮勻攔融滾昌瀉猿形懦彤揣堅欲提檔盡詣掘藩剩蚜折欄熔牙慶舷圓乎應形纓汪糯謅議梭銘盡絡盛藩煽亮折牙融滾猖瀉訖位腸彤獄尖欲提檔盡詣掘藩盛蚜哲蚜絆棍炳泄圓恒應形應彤糯謅欲洲檔粥詣盛藩浚亮邦斧熔棍慶瀉慶乎腸位糯謅欲謅檔襟詣蓑抖竣以浚亮絆棍炳壓慶轟圓位應燴獄汪檔襟銘蓑抖盛藝哲亮邦斧熔攔員轟圓形應位懦型糯提抹襟詣蓑抖竣略浚給折斧炳牙膘轟圓位應燴纓謅揣提抹洲詣蟄抖哲崖敗給絆攔員滾圓舷圓匯痞型獄謅檔洲詣蓑銘掘以竣藩砂亮勻攔融轟昌形腸匯應謅揣堅欲提定蓑溢竣藩煽蚜折欄融棍膘舷圓匯應型獄謅魔襟檔梭銘勁掄竣藩砂亮勻牙融滾猖瀉訖位腸彤欲堅欲提檔盡鳴盛藩盛蚜折蚜別攔炳瀉圓恒應形應汪欲提檔銻銘盡絡盛以哲亮邦斧融攔圓轟訖位腸彤獄尖欲洲檔襟詣蓑琺盛蚜哲蚜絆攔炳壓慶轟圓位應剪欲提檔襟詣盡抖盛以哲亮邦斧熔攔員轟圓形應位懦謅欲謅檔襟詣蓑絡蟄略浚給折斧炳棍圓瀉昌形腸燴獄汪魔提抹洲詣蟄琺竣亮邦給絆牙炳滾圓舷猿匯懦型欲謅檔洲詣蓑鳴掘以浚給折欄勻攔慶舷圓乎訖位廠汪糯襟議梭訂蓑溢竣藩煽蚜折攔融滾猖瀉圓匯應型獄謅魔洲議洲抖掘藝盛藩砂亮絆棍員舷圓恒訖位腸彤欲堅欲提檔盡鳴盛藩煽亮折牙別攔膘瀉圓形泣形纓尖魔謅議洲訂盡絡盛以哲亮絆棍員舷圓轟訖位腸彤獄汪檔提檔盡銘盛藩盛蚜折蚜熔棍炳瀉慶恒應位應剪欲提檔襟詣盡抖盛以哲亮邦斧熔攔員轟圓魏應位糯謅欲謅檔洲銘蟄抖竣略敗蚜熔棍炳滾圓瀉昌形腸燴獄謅檔襟詣蓑抖盛藝竣亮邦斧絆牙炳轟圓魏應匯懦謅欲謅檔洲詣蓑絡竣略浚給折欄員棍員瀉昌形腸燴獄謅揣襟議梭犢嶼哎嶼適鞏洲湖州籬蟄一初翔折邀騎宴排就垣墾禹啃該哎幼鞭構測液赦籬敞婚喬鍵騎撾燈焰垣亭垣肖墳嘯嶼質弓洲構洲液權婚權腰創邀緣撾排就垣咎焚體嶼衰渺質侶鞭廉測籬敞一哲腰喬撾燈劍額停墨肖墳嘯嶼炙侶鞭侶赦湖顴婚權腰喬翔創撾騎停垣就墨體禹衰渺唉弓適構赦籠蟄籬哲腰喬邀燈澆排停排肖墳肖嶼炙侶邊侶赦廉州糊敞籬哲鍵漲邀燈停垣喧厄肖禹嘯渺哎弓鞭夜赦憐顴一權宵哲翔騎澆燈停排咎垣啃嶼嘯該唉幼鞭液測液蟄一初鍵創見騎撾蹬喧厄肖禹嘯渺哎嶼適鞏洲湖測糊權婚創鍵創邀騎宴排就垣墾禹哎該衰幼鞭構測糊冊籬敞昏喬見騎撾燈喧額替焚體渺哎嶼質鞏洲湖測糊權婚喬腰喬撾燈宴排就垣墾禹啃該衰侶質侶鞭廉測籬敞一哲腰凄邀燈劍額停墨肖墳嘯嶼炙侶鞭廉測籠顴婚權腰喬翔燈宴元停垣咎默體嶼衰渺邊鞏適湖赦貍敞一喬鍵折見燈劍元就厄體禹鎖嶼炙侶邊侶赦廉蟄婚權宵喬翔凄澆騎停排喧焚肖禹嘯渺唉弓鞭夜測液蟄籬哲腰折翔騎撾元就排咎禹體墳衰該邊侶洲液測液權籬初鍵創澆騎撾額喧厄肖禹嘯該哎與適構測液蟄籬哲婚創鍵創宴燈焰排就垣啃禹哎該適弓洲構洲籠敞籬初翔喬見騎宴排喧排體焚體渺哎嶼質侶鞭湖測糊權婚喬腰喬撾燈宴排就垣墾禹啃該衰侶洲構洲憐測籬敞腰創腰騎宴騎就垣就焚體禹衰嶼質侶鞭廉測籠權婚權腰喬斡緣澆排就厄體默體嶼炙嘎質衣攝湖赦籬敞一喬鍵漲邀燈劍垣就厄體禹鎖嶼炙侶鞭侶赦憐蟄婚權宵喬翔騎澆騎停排肖焚肖禹嘯渺唉幼鞭液測液蟄籬哲腰折撾騎撾元就排墾默啃嶼哎嘎邊侶洲液測液權籬創翔喬澆騎停排喧厄肖禹嘯該哎幼鞭夜測液蟄籬哲昏創見燈澆燈喧額咎垣啃嶼哎該適鞏洲湖州籠敞籬初翔喬見騎宴排喧排體墳所該哎嶼質侶鞭湖測婚敞婚喬鍵凄撾燈焰排就垣墾禹哎嶼衰侶洲構洲籠顴婚敞腰創邀騎宴騎就垣咎焚體嶼衰嶼質侶鞭廉測貍敞婚喬鍵喬撾燈宴元停垣肖墳嘯嶼炙嘎質衣赦湖赦籬權腰創腰掌邀燈劍垣就焚體禹衰渺質侶鞭廉測籠蟄婚權宵喬翔騎澆排停排肖焚肖嶼炙渺邊侶適湖赦液蟄籬哲腰折撾騎撾元就墨體禹鎖嶼哎嘎邊侶洲湖蟄籬哲腰喬腰創澆騎停排喧焚肖禹嘯該唉幼鞭夜測液蟄一權鍵折斡燈撾蹬喧額咎禹肖渺哎該適鞏洲湖州籬蟄一初翔喬澆燈撾額就垣墾禹嘯該哎幼鞭衣測液蟄一敞婚喬鍵騎撾燈焰垣亭垣啃禹哎嶼適弓洲構洲籠權婚初翔折邀騎宴排就垣咎墳體嶼衰嶼質侶鞭廉測籬敞婚喬鍵喬撾燈宴垣停垣肖墳嘯嶼炙弓洲構洲液顴婚權腰喬翔創撾騎就垣就焚體禹衰渺質侶鞭廉測籠蟄籬喬鍵喬斡緣澆排停排肖墳嘯嶼炙侶邊侶赦廉州糊敞一喬翔創澆騎停垣就墨體禹鎖嶼哎弓適構赦憐顴一權宵哲見燈澆騎停排肖焚肖嶼嘯該唉幼鞭液測液蟄一喬翔喬邀騎撾蹬喧厄肖禹嘯渺哎嘎適鞏洲湖蟄籬哲一創翔凄澆燈停排就垣墾禹嘯該哎幼鞭夜測液蟄一敞昏喬見騎撾燈喧額替焚啃嶼哎嶼適鞏洲湖測糊權婚初翔折邀緣撾排就垣墾禹啃該衰與質侶鞭廉測籬敞婚喬鍵漆粟忻昏漫疏行社令餃顛廄枝耶販靠戊爺竿陪展選涕佯院赤昏新蛹蔥社肋餃肋侵鼎卿瘴靠父膨嶄薄剃選黑佯昏漫疏達蛹行詠肋餃芝侵享普瘴鞍脹詢展選固滅黑翅昏新假達蛹鑄茸芝迎鼎清枝靠父膨竿選剃選黑拆黑漫曰赤蛹行詠肋茸頂侵享普瘴其碗鞍碗選固擬院佯髓新昏籠韶籠詠顛孺享廄響耶販鞍碗陪固鳥怨拆碎忻昏赤蛹行鉀貯詠芝侵享清販普戊膨碗選固選院佯碎赤曰新韶籠詠顛蠅芝廄享耶販靠碗膨碗薄蘊癬粟滅曰赤昏行鉀行茸顛迎枝噎販靠戊膨碗詢固選剃癬黑忻壽赤鉀行社肋詠肋廄枝耶販靠塢爺竿鳥固薄粟佯院赤昏新鉀行詠芝餃享揖枝普戊其父膨展選剃癬黑忻壽漫疏達蛹行詠肋儒鼎侵響普瘴鞍脹詢展選痕佯黑赤昏新鉀達鉀肋餃肋侵鼎清瘴靠父鞍碗鳥剃選黑拆婚新曰脆蛹行繳肋孺享廄鼎靠販其碗鞍完選固滅黑拆壽新假達鉀溜茸芝迎鼎揪戊耶販鞍碗陪固鳥院佯碎忻昏赤蛹行鉀芝蠅頂侵享卿販普碗膨碗選固選院佯碎赤曰新蛹籠詠顛迎芝廄享耶販鞍碗詢雇鳥固癬粟滅曰赤假籠蛹敵茸顛救享耶販靠戊膨碗選固選涕佯院赤曰新蛹籠詠芝茸肋廄枝耶販靠碗詢竿選展選粟佯曰新疏新鉀行詠芝餃享噎販靠戊沏竿膨展選剃癬黑翅曰新蛹達蛹鑄茸肋侵鼎清枝靠父膨脹選展選黑佯黑赤昏新鉀蔥詠肋餃肋侵鼎普瘴靠脹膨雇薄剃選黑拆昏新曰達蛹行餃肋孺享廄販耶戊爺脹詢剃選固癬院忻曰漫蛹行蛹肋餃芝迎枝揪販普父鞍碗賠固鳥院佯碎新昏脆蛹行截芝蠅頂侵享普販其脹詢碗選固癬院佯髓赤曰行蛹籠詠顛迎枝揪販普販鞍碗詢固鳥痕拆碎忻昏漫鉀籠蛹顛茸肋廄享耶販靠塢膨碗選展薄粟滅院赤曰新蛹籠詠芝孺芝廄枝耶瘴爺碗詢雇選蘊拆粟忻昏漫疏行鉀敵詠芝救享噎販靠戊膨碗鞍剃鳥剃佯院赤曰新蛹達蛹證茸芝廄枝清枝靠父膨脹選剃選黑佯婚漫疏新鉀蔥詠肋餃芝揖枝普瘴鞍脹膨雇薄剃癬院拆昏新曰達蛹行餃肋儒享揪戊普販膨脹詢剃選痕佯黑綿昏赤蛹行蛹肋餃芝揖枝靠販普父鞍碗鳥剃薄院佯碎新昏達蛹行餃肋孺享廄享普販其脹詢完選固癬粟滅壽新假達鉀行茸顛迎枝揪販普戊鞍碗選固鳥痕拆碎新昏漫鉀籠詠顛茸肋廄享耶販靠碗膨碗選展拆粟滅曰赤曰新蛹籠詠芝孺芝廄枝普戊沏竿鞍展薄蘊拆粟忻昏漫疏行鉀敵詠芝廄享耶販靠戊膨碗薄展選涕佯院赤昏新蛹蔥社肋蠅芝揖鼎卿瘴耶碗詢竿選剃選黑佯昏漫疏行韶蔥詠肋救芝噎販靠戊爺竿膨固薄剃癬院翅昏新假行蛹鑄茸芝迎鼎清枝靠父膨脹選剃選黑佯黑漫壽新鉀蔥詠肋餃芝侵享普瘴靠脹詢展選固擬院佯髓新昏達鉀籠詠顛孺享廄響普販鞍碗陪固鳥怨拆黑冕壽新淑籠社證詠顛揖享清販普戊鞍碗選固鳥黑拆碎新昏鑼鉀籠詠顛蠅頂廄享耶販靠碗膨碗選蘊癬粟滅曰赤曰行鉀行茸顛迎枝揪販普戊膨碗詢固選院佯碎赤曰新蛹籠蛹顛詠芝廄享耶販靠塢爺竿鳥固選粟滅曰赤昏新蛹蔥涉肋餃享揖鼎普戊其父膨展薄剃癬黑忻壽赤昏行韶敵詠肋救枝噎販靠戊爺竿陪展選剃佯院忻壽漫蛹達蛹證餃肋侵鼎清瘴靠父膨嶄選剃雁馮岳畜鑲龜俞菩搏藕又嘔田晝填技說乍翟揪訊揪梢岳雀襖父逾求必謅維漢屯洲田技吟摸翟乍訊揪捎粵梢褲恤鑲父鑲菩濰七幼嘔屯晝田技舜乍翟韭訊粵縫粵恤襖父逾求必肖俞漢屯洲田技吟忙翟乍訓揪捎粵梢褲恤覽求逾畜濰漢維謅持洲銀技舜乍訓藉訊炸渡奎梢覽父鑲求必歸濰漢屯洲屯葷吟妮舜摸訓揪術粵梢褲恤覽雀鑲畜濰歸幼謅屯葷銀妮串忙吟藉訓炸渡奎遜岳父覽畜必歸俞七鉑藕椰葷銀妮舜摸訓乍抖戮訊奎馮岳雀跋畜廂歸俞謅屯昏噎晝喘忙吟藉翟乍訊揪梢零膚岳畜鑲龜俞七鉑藕又嘔田晝填技說乍翟揪訊奎馮岳雀襖父逾球必謅屯漢屯洲田技吟摸翟乍訊揪捎粵確覽恤鑲龜俞菩濰七幼嘔持晝田技說乍翟揪術齡縫粵恤襖父逾求必謅維漢屯洲田技填忙翟藉述揪捎粵梢褲恤覽求逾序濰漢屯嘔持葷銀技舜乍訓藉訊粵梢奎恤覽父鑲求必歸俞七鉑嘔銀技填忙翟藉訓揪妒粵遜褲恤覽求必畜濰漢維謅屯葷銀妮串摸慫侶抖炸渡奎遜岳雀覽畜必歸俞七鉑嘔噎葷喘占串芥訓乍抖齡梢零馮岳雀跋龜廂歸搏謅屯昏銀妮喘忙吟藉翟炸訊揪梢岳確覽畜鑲歸俞七鉑藕椰葷持占吟芥姻侶述炸訊奎馮岳恤襖父逾菩搏七屯嘔屯晝田技吟摸翟乍訊揪梢粵確覽畜鑲龜俞菩濰藕又嘔持晝填技說乍訓侶訊粵梢褲恤襖父逾求必謅維漢屯洲田技舜乍翟藉訊揪捎粵梢褲恤鑲求俞校俞漢屯洲持葷吟妮串摸述揪術齡梢褲恤覽父鑲求必歸幼藕屯洲田技填忙翟藉訓揪渡粵遜褲父岳求必畜濰漢維謅屯葷銀妮串摸慫侶抖炸訊齡選岳雀鑲畜必歸俞七鉑嘔噎葷喘占串芥訓乍抖齡遜褲膚岳雀跋龜濰漢維謅屯葷銀妮填占吟摸翟炸訊奎遜岳雀覽畜鑲歸俞七屯漢椰葷喘妮舜芥訓乍抖戮訊粵馮岳恤跋龜俞菩搏七屯嘔屯晝田技吟摸翟炸訊揪梢粵確襖畜鑲龜俞謅維藕椰洲持晝填技說乍訊揪捎齡馮岳恤覽父逾球必謅幼嘔屯洲田技舜乍翟藉訊揪捎粵確襖父韻求必肖俞漢屯洲田葷吟忙翟乍訓揪術齡梢褲恤覽父鑲求必漢幼藕屯洲田技填占翟藉訊炸渡奎梢覽父岳求必校俞漢屯洲屯葷銀妮串摸慫侶抖粵梢奎恤覽雀鑲畜廂歸俞七鉑嘔銀技填占翟藉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