2018-2019高中生物 专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定课件 新人教版选修1.ppt

生物选修1 人教版 专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定 要点突破 一 DNA粗提取的原理 1 DNA溶解度 2 DNA与蛋白质对蛋白酶 高温 洗涤剂的耐受性的区别 特别提醒 盐析和高温对DNA活性的影响不同 盐析过程中DNA的空间结构不变 没有变性 只是溶解度降低 高温使DNA和蛋白质变性时破坏的键不同 DNA变性时 氢键被破坏 而蛋白质变性时往往破坏二硫键 因此降温时DNA能复性 而蛋白质不能 例1DNA在NaCl溶液中的溶解度有两重性 随NaCl溶液浓度的变化而变化 则下图所示能反映DNA的溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是 解析 DNA在0 14mol LNaCl溶液中溶解度最低 答案 C 变式训练1 若选择的实验材料为植物细胞 则破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐 加入洗涤剂的目的是 A 利于DNA的溶解B 分离DNA和蛋白质C 溶解细胞膜D 溶解蛋白质解析 洗涤剂是一种离子去污剂 能溶解细胞膜 有利于DNA的释放 食盐的主要成分是NaCl 有利于DNA的溶解 答案 C 二 DNA粗提取和鉴定的实验过程的分析 1 方法步骤 2 DNA粗提取与鉴定实验中的数字总结 1 1次加入酒精 提取含杂质较少的DNA DNA不溶于酒精 但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 在含DNA的溶液中加入冷却的体积分数为95 的酒精 其目的是为了提取含杂质较少的DNA 2 2次加入蒸馏水 目的不同 第一次向鸡血细胞液中加入蒸馏水 是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液 这样水分子会大量渗入血细胞中 使血细胞吸水涨破而释放DNA 第二次向2mol LNaCl溶液中加入蒸馏水 是为了使NaCl溶液的浓度降低到0 14mol L 从而使DNA分子从NaCl溶液中析出 3 3次过滤 DNA存在的部分及所用的纱布层数不同 第一次过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 是为了得到含DNA的滤液 使用的纱布为1 2层 第二次过滤含有黏稠物的NaCl溶液 是为了得到从低浓度的NaCl溶液中析出的附着在纱布上的含DNA的黏稠物 所用的纱布为多层 第三次过滤溶解有DNA的NaCl溶液 目的是为了使DNA再溶解 所以只要用两层纱布即可 4 4次调整NaCl溶液的浓度 目的不同 使用的NaCl溶液的浓度不同 第一次在含DNA的滤液中 加入NaCl 调整NaCl溶液的物质的量浓度为2mol L 必须充分混合均匀 目的是加速染色质中DNA与蛋白质的分离 使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中 第二次调整NaCl溶液的物质的量浓度为0 14mol L 此时DNA的溶解度最小 目的是析出DNA 第三次调整NaCl溶液的物质的量浓度为2mol L 目的是使DNA再次溶解 第四次调整NaCl溶液的物质的量浓度为0 015mol L 或2mol L 目的还是为了溶解DNA 5 6次用玻璃棒搅拌 目的不同 第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液 目的是加速鸡血细胞的破裂 第二次搅拌2mol L含DNA的NaCl溶液 目的是加速DNA的溶解 第三次搅拌加蒸馏水的NaCl溶液 目的是均匀稀释NaCl溶液至0 14mol L 以析出更多的DNA 第四次搅拌含DNA的2mol L的NaCl溶液 目的是加速DNA的溶解 第五次搅拌体积分数为95 的含DNA的酒精 目的是提取含杂质较少的DNA 第六次搅拌0 015mol L 或2mol L 含DNA的NaCl溶液 目的还是加速DNA的溶解 3 该实验成功的关键 1 破碎细胞应彻底充分 2 对提取的含杂质较多的DNA进行提纯时 所用的酒精必须经过充分预冷后才能使用 3 实验过程中 搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部 并且搅拌要轻缓 以便获得较完整的DNA分子 4 由于玻璃表面带电荷 DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面 故实验中应尽量不使用或少使用玻璃器皿 这样可以提取到较多的DNA 5 常温下 二苯胺试剂要现配现用 否则会影响鉴定的效果 特别提醒 哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核 无DNA分子 不能作为提取DNA的实验材料 若选取肝脏细胞或植物细胞 由于肝组织含较多蛋白质纤维 植物组织有胞间连丝和细胞壁 则必须充分研磨 过滤时不能用滤纸代替纱布 否则会因DNA被吸附到滤纸上 而导致DNA大量损失 相关试剂的作用辨析 a 柠檬酸钠 作为抗凝剂 防止血液凝固 b 洗涤剂 能够瓦解细胞膜 释放内含物DNA c 食盐 可以加速核蛋白解体 游离出DNA分子 例2下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料 操作及其作用的表述 正确的是 解析 在DNA粗提取与鉴定实验中 柠檬酸钠可以防止血液凝固 鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 在0 14mol LNaCl溶液中的溶解度最低 有利于DNA析出 DNA不溶于酒精 可以获得较纯的DNA DNA遇二苯胺 水浴加热 产生蓝色反应 答案 C 变式训练2 下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法 正确的是 A DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的增大而增大B 溶有DNA的NaCl溶液中加入4mL二苯胺试剂即变蓝色C DNA粗提取和鉴定时 选材最好用鸡血而不用猪血D 提取洋葱的DNA时 在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐 食盐有利于DNA从细胞中释放出来 解析 从DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线可知 NaCl溶液在低于0 14mol L时 DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐下降 0 14mol L时溶解度最低 当NaCl溶液浓度继续增加时 DNA的溶解度逐渐增加 A项只注重一段范围内的变化 不够全面 二苯胺试剂使用时需要水浴加热才能出现实验现象 猪的成熟红细胞没有细胞核 无DNA 故不能用于本实验 而提取洋葱的DNA时 食盐的作用是溶解释放出的DNA 洗涤剂的作用才是使DNA从细胞中释放出来 答案 C 本节小结 核心归纳1 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 在0 14mol L的NaCl溶液中溶解度最低 2 DNA不溶于酒精溶液 但细胞中的某些蛋白质可溶于酒精 可利用冷却的酒精对提取的DNA进行纯化 3 用二苯胺鉴定DNA 在沸水浴的条件下呈现蓝色