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文档简介

两个核苷酸之间的 作用部位 携带目的基因进入 拼接DNA片段 形成 切割 和载体 作用 载体 DNA连接酶 限制酶 目的基因 重组DNA 受体细胞 磷酸二酯键 质粒 噬菌体的衍生物 动植物病毒等 E coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 EcoR 限制酶Sma 限制酶 常用类型 能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 有多个 具有特殊的 E coliDNA连接酶只能连接 T4DNA连接酶能连接 和平末端 识别双链DNA分子的某种 在特定位点上切割 作用特点 条件 载体 DNA连接酶 限制酶 特定核苷酸 序列 黏性末端 限制酶切割 位点 黏性末 端 标记基 因 目的基因DNA受热变性后解链为单链 引物与单链相应互补序列结合 然后在 作用下延伸 PCR技术扩增 以RNA为模板 在作用下人工合成 反转录法 已知核苷酸序列的 直接利用DNA合成仪用化学方法合成 不需要模板 化学合成 人工合成 从自然界已有的物种中分离 如从 中获取 直接分离 具体操作 方法 基因文库 较小基因 逆转录酶 DNA聚合 酶 原核细胞 受精卵 体细胞 受体细胞 法 用Ca2 处理 技术 法 基因枪法 法 常用方法 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 花粉 管通道 显微注射 感受态细胞 受精卵 农杆菌转化 过程 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 植物幼嫩部位 取材 动物细胞培养 植物组织培养 项目 蛋白质生物制品的生产 皮肤移植材料的培育 检测有毒物质 生理 病理 药理学的研究 植株快速繁殖 脱毒植株的培养 人工种子 生产药物 杀虫剂等 转基因植物的培育 应用 无菌 无毒 营养 血清等 温度和pH 气体环境 O2 CO2 无菌 营养 适宜条件 条件 新的细胞 不形成个体 不体现全能性 获得植株个体 可以体现全能性 结果 动物细胞培养 植物组织培养 项目 过程 细胞膜的 细胞膜的 细胞的 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 流动性 流动性 全能性 突破了有性杂交方法的局限 使远缘杂交成为可能 克服了远缘杂交的 获得杂种植株 意义 杂交细胞 杂种植株 结果 除物理法和化学法外还可以用 诱导 物理法 离心 电激 振动 化学法 聚乙二醇等试剂诱导 融合方法 或胶原蛋白酶 纤维素酶和 相关酶 动物细胞融合 植物体细胞杂交 果胶酶 胰蛋白酶 灭活的病毒 不亲 和性 THAN
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