多药耐药基因1 C3435T 和 C1236T 多态性与癫痫患者苯巴比妥血清药物浓度的关系.pdf

收稿日期 论 著 多药耐药基因 和 多态性与 癫痫患者苯巴比妥血清药物浓度的关系 叶 冰 金瑞峰 田广燕 基金项目 山东省济南市科技局科技攻关项目 作者单位 济南 山东大学齐鲁儿童医院 通信作者 金瑞峰 摘要 目的 以中国汉族癫痫儿童为研究对象 探讨多药耐药基因 基因 和 多态性对抗癫痫药苯巴比妥药物浓度的影响 方法 符合癫痫诊断标准的癫痫患者 例 服用苯巴比妥 抽 脑与神经疾病杂志 年第 卷第 期 取受试者外周静脉血 采用 限制性片段长度多态性方法对服用苯巴比妥癫痫患者进行 基因 和 分型 同时采用荧光偏振免疫法测定苯巴比妥的血清浓度 比较不同基因型间苯巴比妥 血清浓度差异 结果 基因 多态性中 在基因型 和 基因型中血清浓度分 别为 基因型间差异无统计学意义 p 基因 多态性中 苯巴比妥在 和 基因型血清浓度分别 基因型间差异无统计学意义 p 结论 基因 和 多态性不影响抗癫痫药苯巴比妥药物浓度 关键词 多药耐药基因 癫痫 苯巴比妥 单核苷酸多态性 药物浓度 中图分类号 文献标识码 文章编号 association of c t and c t polymorphisms in mdr gene with serum concentrations of phenobarbital with epilepsy ye bing jin rui feng tian guang yan department of neurology qilu children s hospital of shandong university jinan china corresponding author jin rui feng email jrfgold sohu com abstract objective methods results conclusion key words 癫痫是一组由大量神经元反复发作的异常放电而 引起 以中枢神经系统短暂性功能失常为特征的慢性 脑部 疾 病 癫痫患者经系 统 抗 癫 痫 药 治 疗 后 患者的发作可获得控制 其余 患 者的发作不能得到有效控制 成为难治性癫痫 目前 认为难治性癫痫的形成与 糖蛋白 即多药耐药基因 表达产物有关 在肠胃黏膜存在表达 因 此 探讨 与抗癫痫药吸收的关系 对癫痫患者个 体化治疗具有重要意义 基因多态性可能影响 的表达 本文探讨 基因 和 多态性是否对抗癫痫药苯巴比妥 药物浓度有影响 对象与方法 一 研究对象 年 月至 年 月选择在山东大学齐鲁儿 童医院 山东大学齐鲁医院内科和儿科门诊长期随访治 疗或住院治疗的癫痫患儿 例 其中 单独治疗 例 卡马西平联合治疗 例 丙戊酸钠联合治 疗 例 拉莫三嗪联用 例 加巴喷丁联用 例 服药时间为 个月至 年 用药期间血常规 血生 化 即钾 钠 氯 镁 血糖 肝 肾功及心肌酶等辅助检 查结果无异常 受试患者的监护人对本研究知情同意 服药者年龄 岁 岁 例 岁 例 岁 例 平均年龄 岁 平均体质量 平 均用药剂量 全部入组病例经 遗传平衡定律检 验 表明各基因型频率已达遗传平衡 具有群体代 表性 入组标准 所有受试患儿均符合 年国际抗癫痫联盟 关 于发作分类诊断标准 根据其临床表现及脑电图检查 脑与神经疾病杂志 年第 卷第 期 均确诊为癫痫 排除标准 各种神经系统进行性加重的疾病 有各种明 确的诱因者 如代谢紊乱 中毒等 各种严重心血管 疾病 正在服用可能含有抗癫痫药成分的所谓 中 成药 者 二 研究方法 试剂与仪器厂家 血液基因组 提取试剂盒北京天根科技有限公司 一管便捷式 试剂盒北京天根科技有限公司 公司 低温离心机 型德国 公司 仪 型美国 公司 引物上海生物工程科技有限公司 试剂盒美国雅培公司 监测仪美国雅培公司 血液标本的采集 患儿均在晨起后空腹抽取外周静脉血 平均 分成 管 其一放入空白无菌试管 凝固后 离 心 收集血清用于检测抗癫痫药 浓度 其二放入肝素抗凝试管 进行基因 组 提取 血清浓度测定 用治疗药物 监 测仪 型号 检测 血清浓度 试剂盒均 购自美国雅培公司 基因组 提取 应用血液基因组 提取试剂盒 根据说明书步 骤提取血液基因组 稀释后 紫外分光光度计测 基因组 的浓度和纯度 冰箱储存备用 方法检测 基因多态性 采用 试剂盒在 热循环仪中进行 反应 基因型检测 引物 扩增片段大小预期 为 反应体系 模板 上 下游引物各 加 至反应体积为 反应条件为 预变性 个循环 最 后 延伸 将 扩增产物中加入 进 行酶切消化 反应体系为 水浴消化 基因型检测 引物 扩增片段大小预期为 反应体系 模板 上下游引物各 加 水至反应体积为 反应条件 预变性 个循环 最 后 延伸 将 扩增产物中加入 进行 酶切消化 反应体系为 水浴消化 琼脂糖电泳及基因型判定 取出上述酶切后产物 经 琼脂糖溴化乙锭电泳分离 在分子量标记 物的参照下于紫外灯下摄片并判定基因型 三 统计学处理 采用 版统计软件 计量数据用 珋x s 表 示 多组之间的比较采用单因素方差分析检验 所有 结果均进行双边检验 以 p 为差异有统计学 意义 结 果 基因 基因型检测结果 图 基因 多态性呈 二态 等位基 因含 个 酶切位点 而 等位基因仅含 个 酶切位点 故 基因型为 和 条电 泳条带 基因型为 和 共 条电泳条带 基因型有 和 共 条电泳条带 因 和 片段太小 电泳后条带已 泳动至凝胶外 故图中看不出该片段 基因型 基因型 基因型 图 基因型电泳图谱 基因 基因型检测结果 图 基因 多态性呈 二态 等位基 因含 个 酶切位点 而 等位基因仅含 个 酶切位点 故 基因型为 和 条电泳 条带 基因型为为 和 共 条电泳条带 基因型有 和 共 脑与神经疾病杂志 年第 卷第 期 条电泳条带 因 片段太小 电泳后条带已泳动 至凝胶外 故图中看不出该片段 基因型 基因型 基因型 图 基因经 扩增 限制性内切酶 酶切后电泳图 血清浓度与基因型的关系 表 表 在 多态性不同基因型血清浓度比较 基因型 例 口服量 校正前血清浓度 校正后血清浓度 揪 排 排 m 注 校正前基因型间比较 f p 校正后基因型间比较 f p 表 在 多态性不同基因型血清浓度比较 基因型 例 口服量 校正前血清浓度 校正后血清浓度 儋 儋 儋 亖 注 校正前基因型间比较 f p 校正后基因型间比较 f p 由于患者每日 用量和体质量是影响血清浓 度的重要因素 故用所测血清浓度与每公斤体质量的 服药剂量之比进行校正 在 基因 多态 性中 在 和 基因型患者校前和校正后血 清浓度之间差异均无统计学意义 表 在 基 因 多态性中 在 和 基因型患者 校正前和校正后血清浓度之间差异均无统计学意义 讨 论 到达脑内靶目标的药物量与药物转运蛋白 有关 人体内转运蛋白主要包括 多药耐药相关 蛋白等 为 编码蛋白 有研究发现 基因所编码基因产物 与难治性癫痫有关并影响 多种药物的吸收和代谢 等 发现 基因多态性与 基因功能有密切关系 但是 基因多态性是否 影响药物体内浓度 至今尚存在争议 等 采 用丙戊酸钠治疗双向精神障碍患者 结果发现 基因 不影响丙戊酸钠吸收 等 认为 基因 和 多态性与卡马西平 血清药物浓度无关联 作者在 年报道了 和 与多态性与 卡马西平 丙戊酸钠血药 浓度无关联 等 报道 影响脑脊液 中 的浓度 而 则不影响其浓度 等 对狗作为研究对象 报道 多态性可能影响 的表达 且影响狗对 的反应 作为一个 氨基丁酸受体激动剂 直接作用 于 氨基丁酸受体 延长氯通道的开放时间 而且它 还可以减少钠和钾通道和钙流入 抑制谷氨酸兴奋性 可治疗各种癫痫发作 目前仍是较常用的 本研究以服用 癫痫患者为研究对象 探讨 基因 和 多态性对 血清浓度 是否有影响 用校正后的血清浓度表示 的吸收 程度 这样减小了每日药物用量及体质量对血清浓 度的影响 本研究在 多态性中 校正前和 校正后血清浓度在 基因型之间的差异均无 统计学意义 p 在 多态性中 校正 前和校正后血清浓度在 基因型之间的差异 均无统计学意义 p 显示 和 多 态性不影响其血浓度 说明 在肠道中的吸收无影 响 但我们未行脑脊液浓度检测 是否影响脑脊液渡 我们尚不知 有研究认为 基因多态性与药物动力学的 关系很小 肠道内 对其 的吸收作用非常微 小 提示 基因 和 多态性对 等 的吸收影响小 所以对 血清浓度的影 响有限 这是 基因 和 多态性 不影响 血清浓度的主要原因 参 考 文 献 金瑞峰 孙若鹏 徐向平 多药耐药基因在慢性癫痫大鼠中的表达 及托吡酯对其表达的影响 中华儿科杂志 脑与神经疾病杂志 年第 卷第 期 金瑞峰 葛丽娟 王纪文 等 多药耐药基因 和 多态性与抗癫痫药血药浓度关系研究 中国实用儿科杂志 收稿日期 论 著 孤立皮质静脉血栓延误诊断为静脉窦血栓一例 李军杰 宋晓微 摘要 目的 加强对孤立皮质静脉血栓和静脉窦血栓的认识 重视病史和影像学特征分析 减少误 诊 方法 通过分析 例上矢状窦血栓误诊为皮质静脉血栓临床资料 并复习相关文献 结果 男性青年患 者 急性起病 以逐渐进展的双侧肢体无力和间断的癫痫发作为临床特点 无发热 头痛等 初诊为孤立性皮 质静脉血栓 继而确诊静脉窦血栓 前者临床更少见 易误诊 结论 通过对本例初诊为孤立皮质静脉血栓 继而确诊静脉窦血栓患者临床诊治过程的观察 结合文献复习 认为系统性疾病通常容易导致静脉窦血栓 而局限性 尤其是局部病变更倾向于引起皮质静脉血栓 局灶性神经系统损害是皮质静脉血栓最常见的表 现 包括运动和感觉缺失 失语 偏瘫等 而静脉窦血栓常见的颅内压增高导致呕吐 视物模糊以及意识障碍 等 影像学上皮质静脉血栓相对较轻 部分病灶呈可逆性 预后相对较好 关键词 卒中 皮质静脉血栓 静脉窦血栓 鉴别诊断 中图分类号 文献标识码 文章编号 基金项目 国家临床重点专科资助 作者单位 北京 首都医科大学宣武医院神经内科 通信作者 宋晓微 isolated cortical vein thrombosis was delayed diagnosis of venous sinus thrombosis a case report and analysis li jun jie song xiao wei department of neurology xuanwu hospital capital medical university beijing china corresponding author song xiao wei email com abstract objective methods results conclusion 脑与神经疾病杂志 年第 卷第 期 多药耐药基因1 c3435t 和 c1236t 多态性与癫痫患者苯巴比妥多药耐药基因1 c3435t 和 c1236t 多态性与癫痫患者苯巴比妥 血清药物浓度的关系血清药物浓度的关系 作者 叶冰 金瑞峰 田广燕 ye bing ji