TLC技术原理与经验分享.doc

TLC（硅胶板薄层色谱）被广泛的称为“化学家的眼睛”，当“眼睛”看不清楚的时候，才会借助放大镜或者近视镜（HPLC，GC等等）。熟练准确快速的使用TLC技术对提高化学工作的效率至关重要新药研发合成部分，在平时工作中，很多时候是靠TLC进行快速检测，如果仅靠紫外灯这种手段，会忽略掉很多有用的信息，导致重复劳动，或者武断放弃一种合成思路。一下为常用显色原理，均为个人理解整理，进攻参考。TLC展开剂的显色原理介绍与讨论一、显色原理硫酸乙醇溶液喷洒10%硫酸乙醇溶液而显色，是利用硫酸的碳化效果。 一般用来薄层层析分离的都是有机化合物，展开，溶媒挥发干以后，有机物就留在板上。浓硫酸理论上可以对任何有机物碳化。喷洒10%硫酸乙醇溶液，待烘干之 后并继续加热，有机物就因为碳化而现实偏黑色。乙醇挥发很快，留下硫酸使得有机物脱水，看到的颜色可能是褐色、灰色、偏蓝色，所以我前面写了偏黑色，实际 可能要淡一点的，有些扩散的样子。任何有机物都用可以用10%硫酸乙醇溶液。溴甲酚绿（pKa5.0，与pH区别）方法一：溴甲酚绿指示液：取溴甲酚绿0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液2.8ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH3.65.2（黄蓝）方法二：溴甲酚绿指示液(1 gL) ：称取01 g溴甲酚绿，溶于乙醇(95)，用乙醇(95)稀释至100 mL。 The acid dissociation constant (pKa) of this reaction is 4.82,4-二硝基苯肼碘碘为广谱可逆显色试剂，尤其对具有不饱和键，共轭体系（芳烃），含有孤电子对的杂原子官能团（羟基、氨基、巯基等等）有明显效果。原理解释（仅供参考）为碘吸附作用，放置一段时间解吸附消失。可以理解为碘的较高极化性，是的带形式正电荷的碘正离子生成，对具有孤电子对、可极化的电子产生亲电性吸附作用。茚三酮对-氨基酸的显色机理：对氨基（伯胺和仲胺）的显色机理：三氯化铁络合物为紫色化合物高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛。配制方法 ：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月 。钼酸铈：广谱。配制方法：235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1：广谱。配制方法 ：135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 ：萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 。配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80) 磷钼酸(PMA)：广谱。配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇香草醛(香兰素)：广谱。配制方法：15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸二、展开剂选择以及点板经验分享TLC技术的掌握有需要具备的三个因素：基本化学理论，展开剂选择，显色剂选择。点板的基本要求：进程跟踪：斑点为小米粒大小，不同斑点区分度较好，基本无交叉，比移值建议范围：0.20.8纯度观察：斑点可根据实际情况重一些，以观察杂质是否存在1、基本化学理论，是对待检测结构有一个初步的判断，比如化合物极性、是否存在共轭体系、稳定性，这是选择展开剂和显色剂的基础；2、展开剂的选择，在根据结构极性的基础上选择合适的展开剂体系，原理为化合物对硅胶（正相体系）的吸附与解吸附作用。例如，当化合物极性较大时，与硅胶吸附能力强，需要增加展开剂的极性才可以顺利解吸附，才可以在硅胶板上出现合适的比移值；另外，要充分利用相似相容的原理，尤其在含有酸碱基团时，对展开体系的修饰，会对展开效果有明显的改进，可以较少拖尾。展开过程，不要完全寄希望于一次遍可以分开不同的化合物，有时候需要展开数次，或是现用极性较小体系展开，再用极性较大体现展开；3、正确的使用显色剂；4、对点板的要求，当点板的目的是需要观察成品或是比较干净的中间体中所含的杂质时，可以点的重一些，当点板的目的是为观察反应进程，或是当杂质点与目标点相近时，需要点的轻一些，避免拖尾，以便观察到不同的斑点；5、点板取样时，要根据反应体系的特点，要考虑操作溶剂，化合物结构，溶解性等采用小离心管取样点板，同时可把小离心管的操作作为实验后处理的参考，以提高后处理操作的效率；6、交叉点的必要性，有时候，原料和产物极性相当，或是TLC板存