恶性肿瘤的发病机制.ppt课件.ppt

2016年9月9日 第五章恶性肿瘤的发病机制 宁夏医科大学临床学院肿瘤学系李金平副教授 化学因素遗传素质物理因素生物因素免疫状态DNA损伤修复致癌物代谢机体DNA损伤基因突变基因异常改变积累正常细胞恶性转化细胞 第一节肿瘤发生的分子生物学研究 原癌基因的概念和癌基因的概念抑癌基因凋亡调控基因和DNA修复调节基因端粒 端粒酶和肿瘤 1976年对Rous肉瘤病毒的研究导致Src癌基因序列的发现 同年 用Src基因序列为探针 对正常小鸡细胞进行杂交试验 发现正常细胞也有类似的基因此后的研究发现 与Src类似的DNA序列不仅存在于正常小鸡细胞内 而且广泛地存在于脊椎动物中 在正常的细胞中表达 后来 发现在果蝇中 酵母细胞中也存在与脊椎动物癌基因同源的DNA序列 这说明生物进化过程的保守性 因而认为这些基因在八至十亿年前已有共同的祖先 一 原癌基因 proto oncogene 这些序列在正常细胞中以非激活的形式存在的癌基因称为原癌基因 原癌基因编码的蛋白多为促进细胞生长和增殖的蛋白 BishopJM和VarmusHE由于70年代发现原癌基因在正常细胞的存在而获得1989年的诺贝尔奖 细胞癌基因 cellularoncogene 当原癌基因发生异常使细胞发生恶性转化时 这些基因称为细胞癌基因原癌基因转变为细胞癌基因的过程称为原癌基因激活 原癌基因激活方式 点突变 pointmutation 例如T24人类膀胱癌细胞的研究显示Ras基因 调控生长分化 GGCGTC 甘氨酸缬氨酸 12 12 GTPGDP Ras肿瘤蛋白 无活性Ras GDP活化Ras GTP X X MAP激酶通路 转录激活 激活 细胞周期进行 Myc蛋白 生长因子 受体 GTP 基因扩增 geneamplification 基因的拷贝数增加染色体重排 chromosomalrearrangements 包括易位 translocation 和倒转 inversion 易位使原癌基因被置于很强的启动子控制下而过度表达例 Burkitt淋巴瘤c myc的激活 易位致基因融合 产生具致癌能力的融合蛋白例 慢性粒细胞白血病的费城染色体 形成Bcr Abl融合基因编码Bcr Abl融合蛋白启动子插入使原癌基因过度表达 产生过量的结构正常并能促进细胞生长的蛋白 原癌基因激活方式 二 肿瘤抑制基因 tumorsuppressorgene 肿瘤抑制基因的产物限制细胞生长增殖 其功能丧失可导致细胞转化Rb基因定位于13q14 其纯合型丢失见于所有的视网膜母细胞瘤把正常的Rb基因引入视网膜母细胞瘤细胞中可逆转其肿瘤特性 Rb基因的丢失或失活见于视网膜母细胞瘤 膀胱癌 肺癌 乳腺癌等 转录因子E2F p p E2F位点 S期基因 转录阻断 低磷酸化pRb 转录因子E2F p p 高磷酸化pRb p p p p S期基因 转录激活 E2F位点 Rb蛋白在控制G1 S期转换中起重要作用 cyclin CDK 生长因子生长抑制因子 p53基因 当细胞DNA损伤时P53活化 抑制增殖促进修复诱导凋亡 防止肿瘤发生P53突变或丢失 错误传代 积累 导致细胞转化 三 凋亡调节基因与DNA修复基因 凋亡调控基因例 bcl 2基因的过度表达与滤泡型淋巴瘤发生有关 bcl 2蛋白抑制凋亡 bax 促进细胞凋亡DNA修复调节基因 着色性干皮病患者有遗传性DNA修复基因异常 易患皮肤癌 四 端粒 端粒酶和肿瘤 端粒 telomeres 正常细胞分裂一定次数后就进入老化阶段 失去了分裂的能力 而这种控制细胞DNA复制次数的DNA重复序列则位于染色体末端 故称其为端粒 细胞的生命计时器端粒酶 telomerase 端粒酶可使缩短的端粒得以恢复绝大多数的恶性肿瘤细胞都含有较高的端粒酶活性 并与其恶性程度有关 第二节肿瘤发生的内在因素及其作用机制 遗传因素肿瘤免疫细胞信号转导通路与肿瘤 一 遗传因素 肿瘤病因中遗传因素的证实 肿瘤发病存在种族和群体差异肿瘤发病具有家族聚集现象 肿瘤发病率的种族差异 新加坡的中国人马来西亚人印度人 鼻咽癌发病率的比例为13 3 3 0 4 移居到美国的华人鼻咽癌的发病率 美国白人 高34倍黑人很少患母羊骨瘤 睾丸癌 皮肤癌 日本妇女患乳腺癌 白人 松果体瘤 其它民族10多倍 1913年 Warthin报道的癌家族 又称G家族 1 肿瘤发生率高 2 某种肿瘤发病率高 3 肿瘤有多发性 4 发病年龄早 5 符合常染色体显性遗传特点 1 视网膜母细胞瘤 眼癌RB 遗传性肿瘤 2 家族性结肠息肉 FPC 遗传性癌前病变 3 I型神经纤维瘤 NF1 4 Wilms瘤 肾母细胞瘤 二 肿瘤免疫 肿瘤抗原是指细胞恶变过程中出现新抗原以及过度表达的抗原物质的总称 肿瘤抗原能诱导机体产生抗肿瘤免疫应答 是肿瘤免疫诊断和免疫防治的分子基础 一 肿瘤抗原 基因突变 重排 细胞癌变过程中不表达基因的激活 抗原合成过程的某些环节发生异常 胚胎时期抗原的异常 异位表达 基因产物的过度表达 外源性基因的表达 病毒基因 1 1 肿瘤特异性抗原 TumorspecificantigenTSA 只存在于某种肿瘤细胞表面 而不存在于相应正常细胞或其它瘤细胞表面的新抗原 结肠癌结肠粘膜乳腺癌结肠癌的TSA 这个结论的得出是用肿瘤移植试验来证实的前列腺特异性抗原 PSA 正常前列腺上皮细胞前列腺癌细胞 2 肿瘤抗原的分类 证实 肿瘤特异性抗原的存在 肿瘤抗原诱导的免疫应答具有抗肿瘤作用 2 肿瘤相关抗原 Tumorassociatedantigen TAA 非肿瘤细胞所特有 正常细胞或其它瘤细胞表面也有 但在细胞癌变时含量明显增加的抗原 胚胎肝细胞畸胎瘤肝癌甲胎蛋白 AFP 肿瘤胚胎抗原 在正常情况下出现在发育中的胚胎组织而不出现在成熟组织 但可出现在癌变组织中 胚胎期合成的正常成份 出生后可逐渐消失 细胞癌变后可再度出现 它可以存在于癌细胞的表面 也可从细胞表面脱落进入血液中 成为分泌性抗原 肿瘤分化抗原 肿瘤细胞具有与分化程度相关的某些抗原 二 抗肿瘤的免疫效应机制 1 细胞免疫效应1 T细胞 CD4 T细胞 活化后分泌IL 2 IL 4 IL 5 IL 6 IFN 和TNF细胞因子增强CTL的功能 并可激活巨噬细胞或其它APC 从而参与抗肿瘤作用 例如 IL 2为细胞毒性T淋巴细胞 CTL 活化所必需IL 2和IFN 激活和增强CTL NK细胞和单核细胞的杀瘤效应IFN 促进肿瘤细胞表达主要组织相容性复合物1类分子 MHC 1 IL 2 4 5 6可促进B细胞活化 增殖和分化CD4 CTL直接杀伤肿瘤细胞 CD8 T细胞 一是通过抗原受体识别肿瘤细胞上的特异性抗原 并在Th细胞的辅助下活化 直接杀伤肿瘤细胞 二是活化CTL可分泌细胞因子间接杀伤肿瘤细胞 KillingoftumorcellsbyCTL DirectCTLattack TUMOURCELL Fas CD95 FasL TCR ClassI Ag PerforinGranzymeB T细胞多分布在全身各处上皮组织内不受经典MHC分子限制杀伤对NK细胞不敏感的靶细胞免疫监视功能的第一道防线 2 NK细胞能直接非特异性地杀伤瘤细胞 抗瘤谱广 不需要抗原预先致敏 不受MHC制约而先于CTL发挥作用 对白血病这类分散的肿瘤效果最佳 对实体瘤作用效果差 在早期 瘤细胞少时 效果好 反之 效果差 它的作用机制是 NKR 瘤细胞抗原 直接地杀伤瘤细胞 NK细胞释放的自然细胞杀伤因子 溶解瘤细胞 Fc R 接合有IgG的瘤细胞 通过ADCC效应杀伤瘤细胞 3 巨噬细胞 活化的巨噬细胞与瘤细胞结合 通过释放溶酶体酶 直接杀伤肿瘤细胞 处理和呈递肿瘤抗原 激活T细胞产生特异性的抗肿瘤免疫应答杀伤肿瘤细胞 通过特异性的抗体介导ADCC效应 杀伤瘤细胞 活化的巨噬细胞释放TNF能直接 间接地杀伤瘤细胞 二 体液免疫效应 激活补体 溶解瘤细胞 激活NK M 中性粒细胞 通过FcR 而发挥ADCC效应 杀伤瘤细胞Ab 瘤细胞 通过吞噬细胞 发挥调理作用 增加对瘤细胞的吞噬 通过改变瘤细胞的结构 而抑制粘附 不利于瘤细胞的生长和扩散 三 信号转导通路与肿瘤 细胞信号转导的存在及其过程是近年细胞生物学 分子生物学和医学领域的研究热点之一 细胞信号转导异常与肿瘤等多种疾病的发生 发展和预后直接相关 细胞针对外源信息所发生的细胞内生物化学变化及效应的全过程称为信号转导 信号转导是通过多种分子相互作用的一系列有序反应 将来自细胞外的信息传递到细胞内各种效应分子的过程 一 细胞内信号分子 小分子第二信使 cAMPcGMPDAGIP3PIP3Ca2 等酶 蛋白激酶 丝 苏氨酸激酶 酪氨酸激酶 催化第二信使生成和转化的酶 腺苷酸环化酶 鸟苷酸环化酶 磷脂酶C 磷脂酶D等 调节蛋白 G蛋白 衔接蛋白 支架蛋白 二 受体介导的细胞内信号转导方式 细胞内受体通过分子迁移传送信号细胞外受体介导的信号转导离子通道受体将化学信号转化为电信号 G蛋白偶联受体通过G蛋白和小分子信使介导信号转导 酶偶联受体主要通过蛋白质修饰或互相作用传递信号 Hedgehog信号通路 Wnt信号通路 酪氨酸激酶受体通路 转化生长因子 通路 核因子 B信号通路 整合素转导通路 三 与肿瘤发生相关的几条主要信号通路 1 Hedgehog信号通路 Hedgehog信号通路是近年来备受关注的一个调控胚胎发育的信号转导途径 而且与人类肿瘤的发生与发展紧密相关 Hedgehog信号通路的异常激活可以导致多种肿瘤的形成 如基底细胞癌 胰腺癌 前列腺癌 胃肠道恶性肿瘤等 Hedgehog信号通路主要由3部分组成 Hh信号肽 跨膜受体和下游转录因子 在正常状态下 Hh蛋白由其经过自我裂解产生的N末端裂解物与胆固醇或脂酰基结合 附着于细胞模表面 Hh信号通路的激活是通过配体Hh与跨膜蛋白Ptch结合 进而解除Ptch对另一跨膜蛋白Smo的抑制作用 Smo再通过下游转录因子Gli来调控基因转录 Hedgehog信号通路可能在部分消化道肿瘤细胞中被活化 原发性肝癌中Hedgehog信号转导通路是活化的 并且环靶明有阻断Hedgehog信号转导通路的作用 2 Wnt信号通路 Wnt信号通路是一条在进化上保守的信号途径 在胚胎发育和中枢神经系统的形成中起关键作用 可调控细胞的生长 迁移和分化 目前研究表明 在乳腺癌 结直肠癌 胃癌 肝癌 黑色素瘤及子宫内膜癌 卵巢癌中都存在Wnt信号通路异常Wnt信号通路主要分为3种类型 1 经典的Wnt信号途径 通过 2连环蛋白核易位 激活靶基因的转录活性 2 细胞平面极性途径 此途径涉及RhoA蛋白和Jun激酶 主要控制胚胎的发育时间和空间 在细胞水平上 此途径通过重排细胞骨架来调控细胞极性 3 Wnt Ca2 途径 此途径可诱导细胞内Ca2 浓度增加并激活Ca2 敏感的信号转导组分 在Wnt通路中任何一步发生障碍都可致癌 1 组成Wnt信号途径的蛋白 转录因子或基因被破坏或变异导致该途径关闭或局部途径异常活跃 2 过多的Wnt信号使整个途径都异常活化 细胞进行不必要的增殖 3 没有Wnt信号时 细胞内其他的活动也会通过Wnt途径来刺激或诱发细胞乃至机体不正常反应 3 酪氨酸激酶受体通路 酪氨酸激酶受体通路 RTKs在细胞增殖甚至恶性转变过程中起着重要的作用 RTKs包括受体型RTKs和非受体型RTKs两大类 RTKs具有酶活性的细胞膜受体 又称催化性受体 是细胞内段具有酪氨酸激酶活性的跨膜结构的酶蛋白受体 其胞外区与生长因子配体结合 然后激活胞内段的酶活性区启动信号转导 有一些受体本身不具有酶活性 但在其胞内段有PTKs特异结合的位点 配体与受体结合后 须通过该位点结合胞内PTKs再磷酸化胞内靶蛋白的酪氨酸残基 启动信号转导过程 PTKs激活信号控制着细胞内众多靶分子活性 包括Ras MAPK STAT JNK PI3K 还可调整转录因子的活性 在肿瘤的早期阶段 由于其引起生长周期阻断的作用 它可作为肿瘤抑制物 在肿瘤进展的过程中 TGF2 可由肿瘤细胞和 或 其周围的基质细胞产生 且细胞因TGF2 的抑制增殖作用消失而出现优势生长 在肿瘤生长的晚期阶段 TGF2 作为肿瘤的促进因子 通过刺激血管生成 细胞播散 免疫抑制及合成细胞外基质等提供适宜肿瘤生长 浸润及转移的微环境 4 核因子 B信号通路 核因子 B信号转导通路属于受调蛋白水解酶依赖的受体信号转导通路 与肿瘤细胞的发生 增殖 分化 凋亡 侵袭和转移有密切关系NF B是一种基因多显性转录因子 与多种基因的转录有关 其中也包括参与肿瘤发生发展的基因及因子 结构性活化的NF B与肿瘤形成的几个方面有关 包括上调促细胞存活基因表达促进肿瘤细胞增殖分化 抑制促凋亡因子抑制肿瘤细胞凋亡 促进恶性转化 浸润转移和肿瘤血管形成NF B的异常活化导致细胞周期调节失控 表现为细胞无限增殖和自主分裂 肿瘤形成 研究发现NF B可以促进细胞周期因子D1等基因的表达及G1 S期转换功能 从而加速细胞周期进行 并抑制细胞分化 在多种上皮起源的肿瘤中存的NF B表达的上调 提示其高表达或过度激活在肿瘤的发生 发展中起重要作用 报道NF B因子的持续活化可作为乳腺癌 卵巢肿瘤 结肠癌 胰腺癌 甲状腺癌 胆道肿瘤和前列腺肿瘤等实体肿瘤的标志 5 整合素转导通路 整合素分布广泛 属于细胞黏附分子家族 整合素所介导的肿瘤细胞与ECM间的相互作用影响肿瘤的发生 增殖 侵袭和转移到其他组织的能力 整合素以两种构型存在 潜伏型 低亲合力状态 和激活型 高亲合力状态 整合素通过胞外域与ECM 胞内段与细胞骨架 信号转导分子和其他一些蛋白相结合 介导细胞内外之间双向信号传递 1 细胞内信号通过整合素传导 使其活化 从而调节整合素与细胞外配体的亲和力 这是由内向外的信号传导过程 2 整合素与配体结合后把胞外信号传入细胞内 导致细胞骨架重组 基因表达和细胞分化等 这是由外向内的信号传导过程 整合素表达于血管内皮细胞的有腔面和无腔面 介导内皮细胞的迁移和毛细血管管腔的形成 肿瘤的侵袭转移中 肿瘤细胞与肿瘤细胞 血管内皮细胞及ECM之间的黏附与解离在转移扩散中起决定作用而整合素可以使肿瘤细胞同质性黏附下降 可使肿瘤细胞异质性黏附增加 随着对肿瘤细胞信号转导通路研究的不断深入 人们对肿瘤细胞的信号转导机制及其对肿瘤生长 凋亡 转移等的影响也越来越了解 但是对于细胞内外信号转导的具体过程以及众多相关蛋白功能的认识还不够充分 因此 仍然需要深入研究它们的结构功能 表达调控及其在生理和病理环境下调控的分子机制 这样不仅可以为阐明肿瘤细胞的生存 增殖 黏附 分化 凋亡机制奠定基础 也将为更好地从分子水平上研究抗肿瘤药物提供保障 第三节恶性肿瘤的转移机制 肿瘤转移的概念肿瘤转移的有关学说肿瘤转移的基本过程 一 转移的概念 癌细胞由其原发部位侵入血管 淋巴管或体腔 部分细胞被血流 淋巴液带到另一部位或器官 在该处繁殖生长 形成与原发肿瘤相同类型的肿瘤 这一过程即为转移 转移是恶性肿瘤最重要的特征之一 转移是影响患者预后的主要因素 肿瘤转移 二 肿瘤转移的有关学说 关于肿瘤转移的假说 种子与土壤 学说 肿瘤异质性 理论 肿瘤微转移定义 CJCC标准 最大直径在0 2 2mm之间的转移灶 一 种子与土壤 学说认为大部分转移肿瘤细胞由于受到机体免疫系统的攻击或转移局部微环境不合适而不能存活 只有少数细胞能够在转移部位继续发育生长形成转移瘤 二 肿瘤异质性 理论认为由单克隆起源的肿瘤细胞在持续增殖过程中由于遗传性状的不稳定而产生异质性改变 导致肿瘤细胞的转移潜能出现高低之分 原发瘤的增殖肿瘤新生血管的生长瘤细胞侵袭基底膜在循环系统中存活侵入血管或淋巴管 形成瘤栓并转运到远隔靶器官 滞留于靶器官微小血管中 穿出血管并形成微小转移灶 肿瘤血管形成 转移癌灶增殖 三 肿瘤转移的基本过程 一 肿瘤细胞同质型粘附降低 从原发灶脱离 肿瘤内部微血管网的形成血管内皮细胞生长因子 VEGF 血管形成素成纤维细胞生长因子 FGF 白细胞介素 8 IL 8 内皮细胞生长因子 PD ECGF 2 瘤细胞间粘附力降低肿瘤细胞的桥粒 半桥粒和间隙连接数量减少细胞内的钙含量减少瘤细胞表面电荷密度增加 相互排斥力加大细胞表面粘附分子缺失 内皮细胞迁移 官腔