气相色谱法测定常见植物油中脂肪酸.doc

气相色谱法测定常见植物油中脂肪酸粮食与油脂2006年第8期气相色谱法测定常见植物油中脂肪酸李丹华,朱圣陶(苏州大学放射医学与公共卫生学院,江苏苏州2l5l23)摘要:随着营养学研究发展,人们对脂肪酸认识不断增加.中国营养学会也推荐膳食中必需脂肪酸摄入理想比值,市场上也出现大量调和油,为了评估食用植物油营养价值,该研究分析常用食用植物油中脂肪酸组成和各种油营养特色.方法:用氢氧化钾一甲醇溶液将植物油皂化后,在三氟化硼作为催化剂作用下,用甲醇将样品甲酯化,正己烷提取甲酯化产物.以毛细管柱DB一23作为分离柱.用气相色谱法测定植物油脂肪酸组成.结果:大豆油,葵花籽油,玉米油中含有50%60%亚油酸和20%30%油酸,营养均衡合理;花生油,芝麻油中油酸,亚油酸含量约35%45%,易于人体吸收;菜籽油中含有45%油酸和l5%芥酸,芥酸对人体健康有不利作用;橄榄油,茶籽油中含有75%80%油酸,红花籽油中含有约80%亚油酸,有降低胆固醇功效.关键词:植物油;脂肪酸;气相色谱DeterminationofFattyAcidsinVegetableOilsbyGasChromatographyLIDan-hua.ZHUSheng-tao(SchoolofRadiologyandPublicHealth.SuzhouUniversity,JiangsuSuzhou215123,China)Abstract:Withthedevelopmentofnutriology.peopleSrecognitionaboutfattyacidincreasesunceasingly,ChineseSocietyofNutritionalsorecommendtheidealratiOSofessentialfattyacid.Massivemixedoilsappearinthemarket.toevaluatenutritivevalueofvegetableoils,thearticleanalysisfattyacidsincommonvegetableoilsandtheirnutritivefeature.Methods:ThevegetableoilsweresaponifiedbyKOH-methanolandthenesterifiedbymethanolundertheeffectofCATBorontrifluorthe,theeefifiedproductWasextractedbyN-hexane.TheircomponentsoffattyacidswereseparatedbycapillarycohlmnDB-23anddeterminedbygaschromatography.Results:Soybeanoil,sunfloweroil,comoilcontain50%-60%linoleicacidand20%30%oleicacid,balancednutrition;peanutoil,sesameoilcontain35%-45%linoleicacidandoleicacid,easytobeabsorbed;rapeseedoilcontain45%oleicacidandl5%erucicacid,erucicacidisharmfultothehealth:oliveoil,teaoilcontain75%80%oleieacid,saffloweroil,containabout80%linoleicacid,havingeffecttolowercholestero1.KeyWords:vegetableoil;fattyacid;gaschromatography中图分类号:TQ646.2文献标识码:A文章编号:1008-9578(2006)08-0046-03随着人们生活水平逐渐提高,作为日常生活必需品食用植物油品种不再仅仅局限于大豆油,菜籽油等最常见植物油,玉米油,茶籽油等及进口橄榄油也逐渐走入厨房.本研究采用GB/T173761998动植物油脂脂肪酸甲酯制备方法对各种植物油进行甲酯化处理后,在DB一23毛细管柱上用气相色谱测定脂肪酸组成.1材料与方法1.1样品来源实验所测植物油样品购自苏州市场.大豆油有金龙鱼,福临门,大满贯:菜籽油有散装,福临门;花生油有鲁花,金龙鱼;葵花油有多力,金龙鱼,葵王;玉米油有金龙鱼,融氏,欧尚;芝麻油有太太乐,川湘,一滴香;橄榄油有亿芭利:茶籽油(家中自用,品牌未知);红花籽油由张家港东港粮油公司提供.1.2仪器和试剂PerkinElmer公司Clams500气相色谱仪:J&WDB一23毛细管柱(60mxO.25mmi.d);水浴锅;37种脂收稿日期:20060620肪酸甲酯混合标准品(Supelco公司).氢氧化钾;甲醇;三氟化硼甲醇;正己烷;氯化钠;无水硫酸钠;均为分析纯.1.3甲酯化反应用移液管吸取油样0.35ml,置于50ml圆底烧瓶中,加入6ml氢氧化钾甲醇溶液(0.5mol/L),然后将冷凝管固定于烧瓶上,水浴锅加热到60C左右时,将烧瓶置于水浴中,继续加热回流约30rain后油滴消失,用移液管从冷凝管顶部加入6ml三氟化硼甲醇溶液于沸腾溶液内,继续煮沸2min,经冷凝管顶部加入4ml正己烷,继续煮沸1rain,停止加热,冷却至室温后取下冷凝管,加入少量饱和氯化钠溶液并轻摇烧瓶数次,继续加入氯化钠溶液至烧瓶颈部,静置分层后吸取上层溶液于小试管中,经无水硫酸钠去除痕量水,置于4C冰箱冷藏待分析.1.4色谱操作条件柱温:采用程序升温方式,80一140(5/min,2006年第8期粮食与油脂47停留5min)-*230(2.5/min):FID检测温度:260;进样口温度:240C.载气为纯度99.999%氮气,载气流速1.2ml/min;分流比是1:35,进样量1l.1.5数据处理应用峰面积归一化法计算植物油中脂肪酸成分相对百分含量,用MicrosoExcel对各组数据进行计算分析.2结果分析2.1分离与定性将混合标准品在上述色谱条件下分离,其分离效果好,根据各脂肪酸甲酯出峰规律确定每种脂肪酸相对保留时间,并根据保留时间对植物油成分定性.结果见表1和图1.05l0l520253035404550图1脂肪酸甲酯标准品气相色谱图2.2精密度实验以金龙鱼大豆油为例,做8个平行样品处理,检测方法一致,8次重复性检测,以棕榈酸,硬脂酸,油酸,亚油酸的峰面积结果为代表分析各组数据之间变异系数,结果见表2.2.3油品中脂肪酸定量分析油样经甲酯化后,取1l试液按上述色谱条件进行测定,用峰面积归一化法计算出各组分相对百分含量.按照上述甲酯化方法和色谱条件分析9种常见植物油,不同品牌同一种植物油脂肪酸(亚麻酸除外)组成十分接近,表明这些植物油纯度相似.结果见表3.3讨论3.1色谱柱选择本研究所采用毛细管柱是J&W公司DB-23柱,是用于脂肪酸测定专用柱,分离效果好,各种物质保留时间稳定,确保实验结果稳定可靠性,明显优于填充柱和其它极性较弱毛细管柱.3.2分析方法重现性在分析脂肪酸甲酯混合标样时,我们进行8次重复性实验,结果显示每种物质保留时间稳定;同时从精密度实验8个平行样品检测结果来看,实验重现性相当好,数据稳定,各组数据间偏差小.3.3样品处理方法本研究所采用样品甲酯化方法是依据GB/T17376一表1各种脂肪酸甲酯保留时间48粮食与油脂2006年第8期1998方法,以三氟化硼为催化剂条件下对样品植物油进行甲酯化处理,使样品处理时间大大缩短,甲酯化完全,正己烷萃取效果好,衍生产物一脂肪酸甲酯在色谱图上出峰多,制备出样品澄清液放置于4C冰箱冷藏,较短时间内测定.但由于三氟化硼有剧毒,所有试验操作必须在通风柜内进行,试验结束后所用仪器必须立刻清洗.3.4样品分析结果从多次平行样品测定结果来看,各种脂肪酸含量都在很小范围内波动,取平行样品结果的平均值与食品成分表和文献比较,结果基本一致.目前文献中尚未报道过葵花籽油中芥酸含量,本实验发现各品牌葵花籽油均含有微量芥酸.购自苏州市场各大品牌纯品植物油,其分析结果显示各品牌之间差异较小,杂质含量低,均未检出反式脂肪酸,质量合格,对人体无害.大豆油,葵花籽油,玉米油,红花籽油中亚油酸含量高,橄榄油,茶籽油中油酸含量高,有降低胆固醇,防止血管硬化和预防冠心病作用.花生油,芝麻油中油酸与亚油酸含量相当,易于人体消化吸收,含有丰富维生素E及其独有特色香味,广受消费者欢迎.菜籽油含有大量芥酸和芥子甙物质,对人体健康可能有不良影响,高芥酸菜籽油将逐渐在市场上被淘汰出局或被用在调和油中,用其它植物油对其脂肪酸组成进行调整,以达到合理比例.4结论用本文提出方法制备脂肪酸甲酯衍生物,衍生化反应快速完全,酯化效果高,方法简便,适于处理大批量食用植物油样品.实验得到气相色谱图分离效果好,分辨力高,出峰完全,易于定性,面积归一化法定量方法准确可靠,对于各种食用植物油检测有重要意义.常见植物油脂肪酸组成和营养特色各不相同,大豆油,葵花籽油,玉米油营养均衡,花生油,芝麻油易于吸收,菜籽油价格低廉,但含有芥酸等物质,橄榄油,茶籽油,红花籽油有降低胆固醇功效,但价格较贵,为了发挥各种植物油优点,市场上出现大量调和油,以满足消费者需求.参考文献1】杨培慧,郑志雯,等.食用植物油脂肪酸的高分辨气相色谱分析J.中国油脂,2003,28(7):4850.2】李英,王楼明,等.用气相色谱一质谱联用法测定植物油中脂肪酸的组成J.食品分析,2000,l2(4):3739.3】TomasRezanka.HanaRezankova.CharacterizationoffattyacidsandtriacylglycerolsinvegetableoilsbyGCandstatisticalanalysisJ.AnalyticaChemicaActa,1999,398:253-261.4】DongSunLee,BongSooNoh.Characterizationoffattyacidscomposit