生化期考复习提要.doc

期考复习提要名词解释：蛋白质四级结构Protein tertiary structure：蛋白质的变性作用 protein denaturation 分子病molecular disease 核酸杂交 The molecule hybridizationDNA双螺旋结构 DNA double helex 同工酶 Isoenzymes 糖酵解Glycolysis：糖异生glyconeogenesis酮体Ketone bodies：氧化磷酸化oxidative phosphorylation生酮氨基酸ketogenesis amino acid转氨基作用 transamination盐析作用 salfate precipitation必需氨基酸 Essential amino acids：遗传密码 genetic code转录Transcription：简答题：1.为什么DNA不易被水解？而RNA容易被碱水解？2.何为解链温度?影响某种核酸分子Tm值大小的因素是什么?为什么? 3.何为必需脂肪酸？哺乳动物体内所需的必需脂肪酸都有哪些？4.激烈运动后人们感到肌肉酸痛，几天后酸痛感会消失，利用生化机制解释该现象5.给哺乳动物喂食15N 标记的丙氨酸，能否在动物体内找到15N标记的苏氨酸、赖氨酸、和天冬氨酸？6.假如给因氨中毒导致肝昏迷的病人注射鸟氨酸、谷氨酸和维生素，请解释注射它们的用意何在？7.以磺胺药为例，说明竞争性抑制的特点是什么?8.设纯化制备了一种酶，如何鉴定它是蛋白质?9.从以下几方面比较糖酵解与有氧氧化： (1)代谢部位 (2)反应条件 (3)ATP生成方式 (4)产生ATP的数量 (5)终产物 (6)主要生理意义10.糖代谢与脂代谢是通过哪些反应联系起来的?11.乙酰CoA是由哪些物质代谢产生的?它有哪些代谢去路?12.若有一球状蛋白质，分子中有一段肽链为：Ala-Gln-Pro-Trp-Phe-Glu-Tyr-Met 在生理条件下，哪些氨基酸可能定位在分子内部？13.导致蛋白质变性的主要因素有哪些？如何在蛋白质分离纯化中减少其变性机会？14.什么是三羧酸循环？它有些什么生物学意义15. 在DNA复制中为什么使用的是需要被切除的RNA引物？16.类固醇激素的代谢调节机制是如何进行的？在调节过程中，第一信使和第二信使为何种物质？。17.脂肪酸的氧化有几个步骤？18.tRNA分子与蛋白质生物合成有关的位点有哪些？19.酶竞争性抑制的特点和实际意义？问答与计算（共30分） 1、今从一种罕见的真菌中分离到1个八肽，它具有防止秃发的作用。经分析，它的氨基酸组成是：Lys2,Asp1,Tyr1，Phe1,Gly1,Ser1和Ala1。此八肽与FDNB反应并酸水解后。释放出FDNB-Ala。将它用胰蛋白酶酶切后，则得到氨基酸组成为：Lys1,Ala1,Ser1和Gly，Phe1，Lys1的肽，还有一个二肽。将它与胰凝乳蛋白酶反应后，释放出游离的Asp以及1个四肽和1个三肽，四肽的氨基酸组成是：Lys1,Ser1,Phe1和Ala1，三肽与FDNB反应后，再用酸水解，释放出DNP-Gly。请写出这个八肽的氨基酸序列。2.某同学按照实验方案，首先从水稻幼苗中提取过氧化物酶同工酶，然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定提取结果，最后在已染色的凝胶上观察不到任何的酶带。试分析一下没有结果显示的原因有哪些？3.根据以下实验结果推断一多肽链的氨基酸序列：（1）酸水解得知其氨基酸组成为Ala2，Arg，Lys2，Met，Phe，Ser2。（2）羧肽酶A水解得一氨基酸为Ala。（3）胰蛋白酶水解得到四个肽段，其氨基酸组成为：Ala-Arg；Lys，Phe，Ser；Lys；Ala，Met，Ser。（4）溴化氰水解得到两个肽段，其氨基酸组成为：Ala，Arg，Lys2，Met，Phe，Ser；Ala-Ser。（5）能使芳香族氨基酸N端肽键断裂的嗜热菌蛋白酶水解得到两个肽段，其氨基酸组成为： Ala，Arg，Ser；Ala，Lys2，Met，Phe，Ser。（注：要求写出推断过程）4.某同学打算利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离从某植物提取到的过氧化物酶同工酶，然而在制作凝胶时发现1个小时过去了凝胶根本没有聚合？试分析一下原因可能由哪些？5. 假定有1mmol的五肽，酸水解生成1mmol Val、1mmol Glu、和1mmol Lys，没有能够定量回收其他氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段；用DNBF处理胰蛋白酶水解的一个肽段，再用酸水解，生成DNP-Val。用胰凝乳蛋白处理原来的五肽生成两个肽段及游离的Glu。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸序列。 5.一种DNA的分子量为2.8109，一个互补对的脱氧核糖核苷酸的平均分子量为670，那么这个DNA大概有多长，含有多少个螺圈？实验考试复习纸层析法分离氨基酸原理是什么？实验操作题：请用纸层析法分离鉴定氨基酸，按要求进行实验操作，并写出相应的实验操作步骤。1. 请测定苹果（橙子或橘子）果实中游离氨基酸的种类、含量；正确的操作过程：纸层析法分离鉴定果实中游离氨基酸。选取一张20cmX15cm的层析滤纸，在纸的一端距边缘23cm处用铅笔轻轻画一条横线，再此横线上每间隔2.5cm画一个直径约3mm的小圈，并在圈下写下标准氨基酸名称，其中的一个小圈是留作点果实中的原汁（样品点），然后展层，显色，分析结果。关键点：1）懂得选用纸层析法；2）操作正确：点样，展层，烘干、显色；3）使用标准氨基酸做对照；本实验分离的氨基酸溶液为赖氨酸、脯氨酸和亮氨酸的混合溶液，展层剂为正丁醇和36%的乙酸的等体积混合溶液。（1）请根据这三种氨基酸的性质，说明各氨基酸移动速度的快慢，并说明原因。（2）经茚三酮显色后，三种氨基酸应该为何种颜色的斑点，为什么？2. 请分离存在于血清里的蛋白；正确的操作过程：醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白。关键点：1）懂得选用醋酸纤维薄膜电泳法；2）操作正确：点样、电泳、染色、漂洗；3）电泳仪的操作一、简答题: （总分20分）醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白原理是什么？实验操作题：请用醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白；将你的实验结果附上，并写出实验报告。（本题考查同学们的实验操作技能，以及实验报告的规范书写。1识别醋酸纤维薄膜的无光泽面，在角上用铅笔做记号，标出负极。22放入缓冲液中浸泡510分钟，使用镊子操作。53点样54在电泳槽内加入电极缓冲液，使两个电极槽的液面等高。25架滤纸桥56使滤纸全部润湿，并驱赶气泡。57醋酸纤维薄膜条点样端靠近负极，点样面朝下，点样的位置不能贴到滤纸上。58盖上电泳槽盖子。29用导线连接电泳槽和电泳仪。510通电，调节电压160V。511电泳时间40分钟。电泳完毕，关开关，断电。将膜条取出。412染色513漂洗514分析结果及实验报告，格式正确、字体端正、整洁1515衣着规范(如实验衣、手套、鞋等)、节约用水用电、正确使用通风橱、使用仪器自觉登记、实验结束能做好卫生清洁工作。10总分80已知血清蛋白的组成为：清蛋白（pI=4.64；Mr=69,000）、1-球蛋白（pI=5.06；Mr=200,000）、2-球蛋白（pI=5.06；Mr=300,000）、-球蛋白（pI=5.12；Mr=120,000）和-球蛋白（pI=6.357.30；Mr=156,000）。经过适当时间的电泳后，理论上应该有多少条电泳条带？在pH8.6的条件下，其移动方向和速度如何，为什么？三、离子交换树脂法分离氨基酸的原理是