生物实验步骤.doc

生物实验步骤有 1 提出问题作出相应的假设 2 根据器材和正确的知识设计实验及实施 3 整理数据或结果得出结论 要注重实验的注重事项和本题的灵魂，多多的总结 送你一些资料 1实验方法 实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的要害所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下： (1)化学物质的检测方法： 淀粉碘液 还原糖斐林试剂、班氏试剂 CO2Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂 乳酸pH试纸 O2余烬复燃 无O2火焰熄灭 蛋白质双缩脲试剂 染色体龙胆紫、醋酸洋红溶液 DNA二苯胺试剂 脂肪苏丹或苏丹染液 (2)实验结果的显示方法： 光合速率O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量 呼吸速率O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量 原子途径放射性同位素示踪法 细胞液浓度大小质壁分离 细胞是否死亡质壁分离 甲状腺激素作用动物耗氧量，发育速度等 生长激素作用生长速度(体重变化，身高变化) 胰岛素作用动物活动状态 菌量菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度 大肠杆菌伊红美蓝琼脂培养基 (3)实验条件的控制方法： 增加水中氧气泵入空气或吹气或放入绿色植物 减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水 除去容器中CO2NaOH溶液 除去叶片中原有淀粉置于黑暗环境 除去叶片中叶绿素酒精隔水加热 除去光合作用对呼吸作用的干扰给植株遮光 如何得到单色光棱镜色散或彩色薄膜滤光 血液抗凝加入柠檬酸钠 线粒体提取细胞匀浆离心 骨的脱钙盐酸溶液 灭菌方法微生物培养的要害在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。 (4)实验中控制温度的方法： 还原糖鉴定：水浴煮沸加热 酶促反应：水浴保温 用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热 DNA的鉴定：水浴煮沸加热 细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养 2斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸 这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在，在医学上用来检验糖尿病，其原理均是利用了Cu2 的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同： 斐林试剂：即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B，A为CuSO4溶液，B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液，使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。 班氏试剂：即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，所以在临床化验中更常使用。 尿糖试纸：又叫硫酸铜试纸，呈白色,带蓝色斑点，用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克，氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便，试纸的正确使用方法为：将试纸条放在尿液中浸湿，一秒钟后取出，在一分钟内观察试纸的颜色，并与标准色板对照，根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。 3斐林试剂和双缩脲试剂的比较 相同点：都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成； 斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为01g/mLNaOH溶液。 不同点：CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为005g/mLCuSO4溶液， 双缩脲试剂B为001g/mLCuSO4溶液。 配制比例不一样。 使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用， 双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。 鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。 反应本质及颜色反应不一样。 4苏丹染液与苏丹染液的比较 都是用来鉴定脂肪。苏丹染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短。 生物学中常用的试剂： 1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入34滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 4、苏丹：用法：取苏丹颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹染成红色）。 5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。 6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。（甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。） 7、50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色35分钟。（也可以用醋酸洋红染色） 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3 的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶） 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14、碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。 15、丙酮：用于提取叶绿体中的色素。 16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。 17、二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。 18、碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用