2016.4.18卫生职称--临床医学检验技术中级(考点串讲1).ppt

临床检验基础 血液样本采集和血涂片制备红细胞检查白细胞检查血液分析仪及其临床应用血型和输血尿液生成和标本采集及处理尿理学检验 尿液化学检查 尿有形成分检查尿液分析仪及其临床应用 粪便检验脑脊液检验浆膜腔积液检验精液检查前列腺液检查阴道分泌物检查羊水检查脱落细胞检查 1 血液样本采集和血涂片制备 血液生理概要 血液标本类型有四种 一 全血1 静脉全血 应用最多的全血 wholeblood 血液标本来自静脉 采血的部位有肘前静脉 腕静脉 小儿和新生儿有时用颈静脉和股静脉 2 动脉全血 主要用于血气分析 采血部位有股动脉 肱动脉和桡动脉 3 毛细血管全血 也称皮肤采血 适用于仅需微量血液的检验或婴幼儿 采取的部位有耳垂 指端 小儿有时为拇趾或足跟 二 血浆全血抗凝离心后除去血细胞成分即为血浆 plasma 用于血浆化学成分测定和凝血试验 三 血清血清是血液离体后自然凝固后分离出来的液体 血清与血浆相比较 主要缺乏纤维蛋白原 其他化学成分多无差异 血清主要用于临床化学和免疫学等检测 四 分离或浓缩的血细胞成分有些特殊的检验项目需要特定的细胞作为标本 如浓集的粒细胞 淋巴细胞 分离的单个核细胞等 口诀 SUN 静脉肘部成首选 放血别忘拔针头 皮肤通常选手指 婴儿拇指或足跟 多项检查小板先 离体后的血液自然凝固 分离出来的淡黄色透明液体称为血清 血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆 血清与血浆差别是 血清缺少某些凝血因子 如凝血因子 纤维蛋白原 凝血酶原 等 全血适用于临床血液学检查 如血细胞计数 分类和形态学检查等 血浆适用于血浆生理性和病理性化学成分的测定 特别是内分泌激素测定 血浆除钙离子外 含有其他全部凝血因子 也适用于血栓与止血的检查 血清适用于临床化学和临床免疫学检查 正常人血量约为 70 10 ml kg体重 成人约4 5L 约占体重的6 8 其中血浆占55 血细胞占45 小儿血量与体重之比略高于成人 男性比女性血量稍多 但女性妊娠期间血量可增加23 25 血液的红色来自红细胞内血红蛋白 动脉血氧合血红蛋白含量较高 呈鲜红色 静脉血还原血红蛋白含量高 呈暗红色 严重贫血者血液红色变浅 严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色 酸碱度 正常人血液pH值7 35 7 45 动脉血pH值7 40 静脉血pH值7 35 血浆渗透量 正常人约为290 310mOsm kg H20 正常人血液中红细胞呈均匀混悬状态 与红细胞膜表面的唾液酸根 正常血浆成分 血浆黏度及血流动力学等因素有关 正常人全血黏度约为生理盐水黏度的4 5倍 血浆黏度约为生理盐水黏度的1 6倍 血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关 其中 血浆黏度受血浆中纤维蛋白原 球蛋白等大分子蛋白质的影响 它们的浓度越高 血浆黏度越高 血液生理功能具有运输功能 协调功能 维护机体内环境稳定和防御功能 采血方法 静脉采血多采用位于体表的浅静脉 通常采用肘部静脉 手背静脉 内踝静脉或股静脉 小儿可采颈外静脉血液 皮肤采血法曾称为毛细血管采血法 是采集微动脉 微静脉和毛细血管的混合血 同时含细胞间质和细胞内液 通常 选择耳垂或手指部位 手指采血操作方便 检查结果比较恒定 世界卫生组织 WHO 推荐采集左手无名指指端内侧血液 婴幼儿可采集大拇指或足跟内外侧缘血液 严重烧伤患者 可选择皮肤完整处采血 耳垂采血痛感较轻 操作方便 但血循环较差 受气温影响较大 检查结果不够恒定 如红细胞 白细胞 血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高 一般情况下不宜使用 因第1滴血混有组织液 应擦去 如血流不畅切勿用力挤压 以免造成组织液混入 影响结果的准确性 进行多项检查时 采血的顺序依次为血小板计数 红细胞计数 血红蛋白测定 白细胞计数 血型鉴定等 1 皮肤采血 缺点是易于溶血 凝血 混入组织液 而且局部皮肤揉擦 针刺深度不一 个体皮肤厚度差异等都影响检查结果 所以 皮肤采血检查结果重复性差 准确性不好 2 静脉采血 开放式采血法的操作环节多 难于规范统一 在移液和丢弃注射器时可能造成血液污染 封闭式采血法的操作规范 有利于样本收集运送和保存 防止院内血源性传染病 质量控制 1 患者 患者活动情况 精神状态 药物 年龄 性别 种族 样本采集时间 吸烟 季节等都会影响检测结果 2 采血 止血带结扎时间应小于1min 如超过2min 大静脉血流受阻而使毛细血管内压增高 使分子质量 5000的物质逸入组织液 或缺氧引起血液成分的变化 使检查结果不可靠 3 溶血 因容器不洁 接触水 强力振荡 操作不慎等可引起溶血 使红细胞计数 血细胞比容 血浆或血清化学成分 如钾 镁 转氨酶 胆红素 等多项指标检验结果发生变化 4 样本处理 血液样本采集后应立即送检 并尽快进行检查 样本保存不当直接影响实验结果 5 实验结果分析 分析结果时 应考虑药物 饮食等因素对结果的影响 同时 应密切结合临床 抗凝剂选择 1 乙二胺四乙酸 EDTA 盐 常用有钠盐 EDTA Na2 H20 或钾盐 EDTA K2 2H2O 能与血液中钙离子结合成螯合物 使Ca2 失去凝血作用 阻止血液凝固 EDTA盐对血细胞形态 血小板计数影响很小 适用于血液学检查 尤其是血小板计数 但钠盐溶解度低于钾盐 有时影响抗凝效果 根据国际血液学标准化委员会 ICSH 建议 CBC抗凝剂用EDTA K2 2H2O 量为1 5 2 2mg ml血液 不适于凝血检查 血小板功能试验 2 草酸盐 常用有草酸钠 草酸钾 草酸铵 溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀 使Ca2 失去凝血作用 阻止血液凝固 草酸盐优点是溶解度好 价廉 草酸盐对凝血因子V的保护作用差 影响凝血酶原时间测定 而且草酸盐与钙结合后形成的沉淀物 影响自动凝血仪检测结果 因此 草酸盐不适于凝血检查 双草酸盐抗凝剂 草酸钾可使红细胞体积缩小 草酸铵则可使红细胞胀大 两者按适当比例混合 恰好不影响红细胞形态和体积 可用于血细胞比容 CBC 网织红细胞计数等项目检查 若单用草酸钾或草酸钠作为抗凝剂 与肝素为抗凝剂测定的血细胞比容比较 测定结果可减低8 13 双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集 影响白细胞形态 不适于血小板计数 白细胞分类计数 3 肝素 加强抗凝血酶 AT 灭活丝氨酸蛋白酶作用 阻止凝血酶的形成 并阻止血小板聚集等作用 从而阻止血液凝固 肝素广泛存在于肺 肝 脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞颗粒中 带有较多负电荷 肝素具有抗凝力强 不影响血细胞体积 不易溶血等优点 绝大多数检查都可用肝素作为抗凝剂 是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂 但肝素可引起白细胞聚集 瑞氏染色后产生蓝色背景 不适于CBC 细胞形态学检查 每毫升血液肝素用量为 15 2 5 U 多为肝素钠盐或钾盐 4 枸橼酸盐 常用有枸橼酸钠 能与血液中钙离子结合形成螯合物 阻止血液凝固 枸橼酸盐的溶解度低 抗凝力不如上述抗凝剂 枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1 9或1 4 适用于红细胞沉降率 凝血检查 是输血保养液的成分 血液涂片制备 手工推片法 取血1滴置载玻片一端 以边缘平滑的推片 从血滴前方接触血液 使血液沿推片散开 通常推片与载玻片保持25 30 夹角 平稳地向前推动 血液即在载玻片上形成薄层血膜 涂片厚薄与血滴大小 推片与载玻片间夹角 推片速度 血细胞比容有关 一张良好的血片 应厚薄适宜 头体尾明显 细胞分布均匀 血膜边缘整齐 并留有一定空隙 手工推片法影响涂片厚薄的因素有 血滴大小 推片与载玻片间夹角 推片速度 血细胞比容 一张良好的血片 厚薄适宜 头体尾明显 细胞分布均匀 血膜边缘整齐 并留有一定空隙 厚血膜涂片法疟原虫 微丝蚴等 新鲜血液1滴 载玻片中央 推片涂抹1 5cm血膜 内向外旋 自然干燥滴加蒸馏水 再干后染色镜检 血液细胞染色 瑞氏染色定义 原理 临床应用 瑞氏染料 由酸性染料伊红 E 和碱性染料亚甲蓝 M 组成 将适量伊红 美蓝溶解在甲醇中 即为瑞氏染料 甲醇的作用 一是溶解美蓝和伊红 二是固定细胞形态 染色原理 既有物理的吸附作用 又有化学的亲和作用 各种细胞成分化学性质不同 对各种染料的亲和力也不一样 如血红蛋白 嗜酸性颗粒为碱性蛋白质 与酸性染料伊红结合 染粉红色 称为嗜酸性物质 细胞核蛋白 淋巴细胞 嗜碱性粒细胞胞质为酸性 与碱性染料美蓝或天青结合 染紫蓝色或蓝色 称为嗜碱性物质 中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合 染淡紫红色 称为嗜中性物质 原始红细胞 早幼红细胞胞质 核仁含较多酸性物质 染成较浓厚的蓝色 中幼红细胞既含酸性物质 又含碱性物质 染成红蓝色或灰红色 完全成熟红细胞 酸性物质彻底消失后 染成粉红色 pH值的影响 细胞各种成分均属蛋白质 由于蛋白质系两性电解质 所带电荷随溶液pH而定 在偏酸性环境中正电荷增多 易与伊红结合 红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红 细胞核呈淡蓝色或不染色 在偏碱性环境中负电荷增多 易与美蓝结合 所有细胞呈灰蓝色 颗粒呈深暗 嗜酸性颗粒呈暗褐 甚至棕黑色 中性颗粒偏粗 呈紫黑色 稀释染液必须用缓冲液 冲洗用水应近中性 否则可导致细胞染色反应呈色异常 形态难以识别 甚至错误 冲洗时应以流水冲洗 不能先倒掉染液 以防染料沉着在血涂片上 冲洗时间不能过久 以防脱色 如血涂片上有染料颗粒沉积 可滴加甲醇 然后立即用流水冲洗 染色过淡可以复染 复染时应先加缓冲液 然后加染液 染色过深可用流水冲洗或浸泡 也可用甲醇脱色 方法学评价 血涂片制备 手工推片法用血量少 操作简单 是应用最广泛的方法 此外 疟原虫 微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法 瑞氏染色法是最经典 最常用的染色法 尤其对于细胞质成分 中性颗粒等可获得很好的染色效果 但对细胞核的着色能力略差 吉姆萨染液对细胞核 寄生虫 如疟原虫等 着色较好 结构更清晰 但对细胞质成分的着色能力略差 采用瑞氏 吉姆萨复合染液可使细胞胞质 颗粒 胞核等均获得满意的染色效果 质量控制 血涂片制备血滴愈大 角度愈大 推片速度愈快 血膜愈厚 反之则愈薄 血细胞比容增高 血液黏度较高时 应采用小血滴 小角度 慢推 血细胞比容减低 血液较稀时 应采用大血滴 大角度 快推 血液细胞染色染色深浅与血涂片中细胞数量 血膜厚度 染色时间 染液浓度 pH值密切相关 纠正办法过深 是缩短染色时间 稀释染液 调解PH值 过浅 是延长染色时间 调解PH值 血涂片制备 制备涂片时 血滴愈大 角度愈大 推片速度愈快 血膜愈厚 反之则愈薄 血细胞比容增高 血液黏度较高时 应采用小血滴 小角度 慢推 可得满意结果 血细胞比容减低 血液较稀时 应采用大血滴 大角度 快推 血液细胞染色深浅与血涂片中细胞数量 血膜厚度 染色时间 染液浓度 pH值密切相关 pH值的影响细胞各种成分均属蛋白质 由于蛋白质系两性电解质 所带电荷随溶液pH而定 在偏酸性环境中正电荷增多 易与伊红结合 红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红 细胞核呈淡蓝色或不染色 在偏碱性环境中负电荷增多 易与美蓝结合 所有细胞呈灰蓝色 颗粒呈深暗 嗜酸性颗粒呈暗褐 甚至棕黑色 中性颗粒偏粗 呈紫黑色 pH pI Pr带正电荷多 易与E 结合 染色偏红pH pI Pr带负电荷多 易与M 结合 染色偏蓝 2 红细胞检查 一 概要 红细胞是血液中数量最多的有形成分 起源于骨髓造血干细胞 在红细胞生成素作用下 经红系祖细胞阶段 分化为原红细胞 经数次有丝分裂发育为早幼 中幼和晚幼红细胞 晚幼红细胞通过脱核成为网织红细胞 这一过程在骨髓中进行 约需72h 网织红细胞经约48h成完全成熟的红细胞 释放入血液 平均寿命约120d 衰老红细胞主要在脾破坏 分解为铁 珠蛋白和胆红素 血红蛋白分子是有核红细胞 网织红细胞内形成的一种含色素蛋白质 色素部分为亚铁血红素 蛋白质部分为珠蛋白 亚铁血红素由原卟啉 铁组成 受 氨基 酮戊酸合成酶 血红素和Fe2 的调节 珠蛋白肽链分为 两类 类链 和 链 类链 链 链由141个氨基酸组成 链由146个氨基酸组成 每个Hb分子由2条 类肽链和2条 类肽链组成 在正常情况下 99 Hb的铁原子呈Fe2 状态 称为还原Hb 1 呈Fe3 状态 称为高铁血红蛋白 只有Fe2 状态的Hb才能与氧结合 称为氧合血红蛋白 血红蛋白的合成受激素的调节 红细胞生成素 可促进 氨基 酮戊酸生成和铁的利用 从而促进血红素 Hb的合成 雄激素 能促进 氨基 酮戊酸合成酶 红细胞生成素的生成 在人体生长各期 Hb种类与比例不同 在胚胎发育早期 约妊娠第5周 与 基因表达 形成个体发育中第一个有功能的胚胎期血红蛋白 2 2 HbGower 妊娠第6周 和 基因开始表达 形成HbGower 2 2 HbGower 2 2 HbPortland 2 2 和HbF 2 2 等胚胎期血红蛋白 妊娠第8周 链合成达到最高峰 链开始合成 形成HbA 2 2 妊娠第36周 链合成迅速增加 链合成速率减低 刚出生时 链与 链合成量大致相等 出生后3个月 使HbA逐步占Hb总量95 以上 而HbF逐步降至1 以下 链开始合成时间不很清楚 出生后HbA2 2 2 占Hb总量的2 3 二 红细胞计数 手工法误差原因为 样本 血液发生凝固 操作 稀释 充池 计数不规范 器材 微量吸管 计数板不标准 固有误差 计数域误差 血液分析仪法是常用方法 比手工法精 如电阻抗计数法的变异系数为2 手工法则大于11 且操作简便 快速 当白细胞数量明显增高时 会干扰红细胞计数和体积测定而产生误差 参考值 成年男性 4 5 5 1012 L 成年女性 3 5 5 0 1012 L 新生儿 6 0 7 0 1012 L 医学决定水平 高于6 8 1012 L 应采取治疗措施 低于参考值低限 为诊断贫血界限 应寻找病因 低于1 5 1012 L应考虑输血 生理性变化 1 年龄与性别的差异 新生儿 由于出生前处于生理性缺氧状态 故红细胞明显增高 较成人约增加35 出生2周后逐渐下降 2个月婴儿约减少30 男性在6 7岁时最低 随年龄增大而逐渐上升 25 30岁达到高峰 30岁后随年龄增大而逐渐下降 直到60岁尚未停止 女性也随年龄增大而逐渐上升 13 15岁达到高峰 随后受月经 内分泌等因素影响而逐渐下降 21 35岁维持最低水平 以后随年龄增大而逐渐上升 与男性水平相当 2 精神因素 感情冲动 兴奋 恐惧 冷水浴等可使肾上腺素增多 导致红细胞暂时增多 3 剧烈体力运动和劳动 由于需氧量增加 使红细胞生成素生成增加 骨髓加速释放红细胞 导致红细胞增多 4 气压减低 高山地区居民和登山运动员因缺氧 红细胞代偿性增生 数量增高 5 妊娠中后期 为适应胎盘循环需要 通过神经 体液调节 孕妇血浆容量明显增加使血液稀释 导致红细胞减少 按病因将贫血分成 1 急 慢性红细胞丢失过多 各种原因出血 如消化性溃疡 痔疮 十二指肠钩虫病等 2 红细胞寿命缩短 各种原因溶血 如输血溶血反应 蚕豆病 遗传性球形细胞增多症等 3 造血原料不足 如慢性失血者 因铁重新利用率减少 铁供应或吸收不足所致 先天性或后天性红细胞酶缺陷者 因铁不能被利用 堆积在细胞内外所致 如铁粒幼细胞贫血 某些药物 如异烟肼 硫唑嘌呤等 继发于某些疾病 如类风湿关节炎 白血病 甲状腺功能亢进 慢性肾功能不全 铅中毒等 4 骨髓造血功能减退 某些药物 如抗肿瘤药物 磺胺类药物 保泰松 有机砷 马利兰等可抑制骨髓造血功能 物理因素 如X线 60钴 镭照射等可抑制骨髓造血功能 继发于其他疾病 如慢性肾功能衰竭 原发性再生障碍性贫血 红细胞增多 1 原发性红细胞增多 如真性红细胞增多症 良性家族性红细胞增多症等 2 继发性红细胞增多 如房室间隔缺损 法洛四联症等各种先天性心血管疾病 肺气肿 肺源性心脏病 肺纤维化 矽肺和各种引起肺气体交换面积减少的疾病 异常血红蛋白病 肾上腺皮质功能亢进 库欣病 某些药物如肾上腺素 糖皮质激素 雄激素等 3 相对性红细胞增多 如呕吐 严重腹泻 多汗 多尿 大面积烧伤 晚期消化道肿瘤而长期不能进食等 红细胞计数操作方法 改良牛鲍计数板 血细胞计数板 计数池内划有长 宽各3 0mm的方格 分为9个大格 每个大格面积为1 0mm2 容积为0 1mm3 l 其中 中央大方格用双线分成25个中方格 位于正中及四角的5个中方格是红细胞和血小板计数区域 每个中方格用单线分为16个小方格 四角的4个大方格是白细胞计数区域 用单线划分为16个中方格 根据1941年国际标准局 NBS 规定 大方格每边长度允许误差为 1 即 1 0 01 mm 盖玻片与计数池间隙深度允许误差为 2 即 0 1 0 002 mm 盖玻片 是专用的玻璃盖片 要求表面平整光滑 两面平整度在0 002mm以内 盖玻片规格是24mm 20mm 0 6mm 静置 室温下平放3 5min 待细胞下沉后于显微镜下计数 计数 先用低倍镜观察血细胞分布是否均匀 如严重分布不匀 应重新充池 然后用高倍镜计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数 红细胞在计数池中若分布不均 每个中方格间相差超过20个应重新充池 两次红细胞计数相差不得超过5 计数时需遵循一定方向逐格进行 以免重复或遗漏 对压线细胞采用数左不数右 数上不数下的原则 红细胞稀释液 Hayem液由NaCl 调节渗透压 Na2S04 提高比密防止细胞粘连 HgCl2 防腐 和蒸馏水组成 缺点是遇高球蛋白血症患者 由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集 枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠 抗凝和维持渗透压 甲醛 防腐和固定红细胞 氯化钠 调节渗透压 和蒸馏水组成 普通生理盐水或加1 甲醛生理盐水 血红蛋白测定 检测原理 血液中血红蛋白以各种形式存在 包括 氧合血红蛋白 碳氧血红蛋白 高铁血红蛋白 Hi 或其他衍生物 采用比色法测定 包括 氰化高铁血红蛋白 HiCN 测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白 SDS 测定法 叠氮高铁血红蛋白 HiN3 法 碱羟血红蛋白法 溴代十六烷基三甲胺 CTAB 血红蛋白测定法等 HiCN测定法原理 血液中除硫化血红蛋白 SHb 外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白 再和CN 结合生成稳定的棕红色复合物 氰化高铁血红蛋白 其在540nm处有一吸收峰 用分光光度计测定该处的吸光度 经换算即可得到每升血液中的血红蛋白浓度 或通过制备的标准曲线查得血红蛋白浓度 方法学评价1 HiCN法 1966年被ICSH推荐为参考方法 2 SDS测定法 该法具有操作简单 呈色稳定 准确性和精确性符合要求 无公害等优点 但由于摩尔消光系数尚未最后确认 不能直接用吸光度计算Hb浓度 而且SDS试剂的质量差异较大会影响检测结果 3 多参数血细胞分析仪 优点是操作简单 快速 同时可获得多项红细胞参数 血红蛋白测定原理与手工法相似 仪器法测定精度 CV 约为1 质量控制 1 样本 异常血浆蛋白质 高脂血症 白细胞数超过30 109 L 脂滴等可产生浊度 干扰Hb测定 2 采血部位 部位不同 结果不同 静脉血比毛细血管血低10 15 3 结果分析 测定值假性增高的原因是稀释倍数不准 红细胞溶解不当 血浆中脂质或蛋白质量增加 4 HiCN参考液 是制备标准曲线 计算K值 校准仪器和其他测定方法的重要物质 ICSH公布了制备方法和规格 我国HiCN部级参考品质量标准为 1 图形扫描波峰 540 1 nm 波谷502 504nm 2 A 540nm A 504nm 1 590 1 630 3 A 750nm 0 002 4 无菌试验 普通培养和厌氧培养阴性 5 精密度 随机抽样10支测定 CV 0 5 6 准确度 以WH0的HiCN参考品为标准进行测定 测定值与标示值之差 0 5 7 稳定性 3年内不变质 测定值不变 8 分装于棕色安瓿内 每支不少于10ml 9 标签应写明产品名称 批号 含量 有效期 生产日期 贮存法等 质控物常用质控物有 ACD抗凝全血 进口全血质控物 醛化半固定红细胞 溶血液和冻干全血等 参考值 成年 男性120 170g L 女性 110 150g L 新生儿 170 200g L 老年 70岁以上 男性94 2 122 2g L 女性86 5 111 8g L 生理性变化 1 年龄 随年龄增长 Hb可增高或减低 和红细胞变化相似 2 时间 红细胞和血红蛋白量有日内波动 上午7时达高峰 随后下降 病理性变化 1 某些疾病 血红蛋白和红细胞浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量 如大量失血时 在补充液体前 虽循环血容量缩小 但血液浓度很少变化 从血红蛋白浓度来看 很难反映出存在贫血 如水潴留时 血浆容量增大 即使红细胞容量正常 但血液浓度减低 从血红蛋白浓度来看 已存在贫血 反之 失水时 血浆容量缩小 即使血液浓度增高 但红细胞容量减少 从血红蛋白浓度来看 贫血不明显 2 发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时 红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例 大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高 小细胞低色素贫血的血红蛋白减低 但红细胞计数可正常 红细胞形态检查 瑞氏染色血涂片成熟红细胞形态为双凹圆盘形 细胞大小一致 平均直径7 2 m 淡粉红色 中央1 3为生理性淡染区 胞质内无异常结构 异常红细胞形态 大小异常 1 小红细胞 直径 6 m的红细胞 正常人偶见 见于缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 遗传性球形细胞增多症 2 大红细胞 直径 10 m的红细胞 见于巨幼细胞性贫血 溶血性贫血 恶性贫血等 3 巨红细胞 直径 15 m的红细胞 见于叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血 4 红细胞大小不均 红细胞间直径相差一倍以上 见于严重的增生性贫血 如巨幼细胞性贫血 色素异常 1 正常色素性 红细胞呈淡红色 中央有生理性浅染区 见于正常人 急性失血 再生障碍性贫血和白血病等 2 低色素性 红细胞中央生理性浅染区扩大 成为环形红细胞 见于缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 铁幼粒细胞性贫血 某些血红蛋白病 3 高色素性 红细胞中央浅染区消失 整个红细胞染成红色 胞体增大 平均红细胞血红蛋白含量增高 平均血红蛋白浓度正常 见于巨幼细胞性贫血 4 多色性 是尚未完全成熟的红细胞 胞体较大 胞质内尚存少量嗜碱性物质 RNA 红细胞染成灰红色或淡灰蓝色 见于正常人 占1 左右 骨髓造红细胞功能活跃 如溶血性或急性失血性贫血 5 细胞着色不一 同一血涂片同时出现低色素 正常色素性两种细胞 又称双形性贫血 见于铁粒幼红细胞性贫血 形态异常 1 球形红细胞 细胞中央着色深 体积小 直径与厚度比小于2 4 1 正常值3 4 1 见于遗传性和获得性球形细胞增多症 如自身免疫溶血性贫血 直接理化损伤如烧伤等 和小儿 2 椭圆形红细胞 细胞呈椭圆形 杆形 两端钝圆 长轴增大 短轴缩短 长是宽的3 4倍 见于遗传性椭圆形细胞增多症 可达25 75 大细胞性贫血 可达25 缺铁性贫血 骨髓纤维化 巨幼细胞贫血 镰形细胞性贫血 正常人 约占1 不超过15 3 靶形红细胞 细胞中央染色较深 外围为苍白区域 而边缘又深染 形如射击之靶 有时 中央深染区呈细胞边缘延伸的半岛状或柄状 细胞直径比正常大 但厚度变薄 见于各种低色素性贫血 如珠蛋白生成障碍性贫血 HbC病 阻塞性黄疸 脾切除后 4 口形红细胞 细胞中央有裂缝 中央淡染区呈扁平状 似张开的口形或鱼口 见于口形红细胞增多症 小儿消化系统疾患引起的贫血 酒精中毒 某些溶血性贫血 肝病和正常人 4 5 镰形红细胞 细胞呈镰刀状 线条状或L S V形等 是含有异常血红蛋白S HbS 的红细胞 见于镰状细胞贫血 HbS S HbS C 镰状细胞特性样本 HbA S 6 棘红细胞 细胞表面有针状突起 间距不规则 长和宽不一 见于遗传性或获得性 脂蛋白缺乏症 高达70 80 脾切除后 酒精中毒性肝病 尿毒症 需与皱缩红细胞 锯齿状红细胞 鉴别 皱缩红细胞边缘呈锯齿形 排列紧密 大小相等 外端较尖 7 裂红细胞 为红细胞碎片或不完整红细胞 大小不一 外形不规则 呈刺形 盔形 三角形 扭转形等 见于弥漫性血管内凝血 微血管病性溶血性贫血 重型珠蛋白生成障碍性贫血 巨幼细胞性贫血 严重烧伤和正常人 2 8 缗钱状红细胞 红细胞互相连接如缗钱状 是因为血浆中某些蛋白 纤维蛋白原 球蛋白 增高 使红细胞正负电荷发生改变所致 见于多发性骨髓瘤 9 有核红细胞 幼稚红细胞 除1周内婴儿血涂片中可见少量有核红细胞外 其他则为病理现象 如溶血性贫血 如新生儿溶血性贫血 自身免疫性溶血性贫血 巨幼细胞性贫血 造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤 如各种急 慢性白血病 红白血病 慢性骨髓增生性疾病 如骨髓纤维化 脾切除后 新月形红细胞 红细胞着色极淡 残缺不全 体积大 状如新月形 直径约20 m 见于某些溶血性贫血 如阵发性睡眠性血红蛋白尿症 泪滴形红细胞 红细胞形如泪滴样或梨状 见于贫血 骨髓纤维化和正常人 红细胞形态不整 出现不规则的奇异形状 如豆状 梨形 蝌蚪状 麦粒状 棍棒形等 见于某些感染 严重贫血 巨幼细胞性贫血 结构异常 1 嗜碱性点彩红细胞 瑞氏染色后 胞质内出现形态不一的蓝色颗粒 变性RNA 属于未完全成熟红细胞 颗粒大小不一 多少不等 见于铅中毒 正常人 约占1 10000 2 豪焦小体 Howell Jolly小体 染色质小体 成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为1 2 m暗紫红色圆形小体 为核碎裂 溶解后的残余部分 见于脾切除后 无脾症 脾萎缩 脾功能低下 红白血病 某些贫血 如巨幼细胞性贫血 3 卡波环 在嗜多色性 碱性点彩红细胞胞质中出现紫红色细线圈状结构 呈环形 8字形 为核膜残余物 纺锤体残余物 脂蛋白变性物 见于白血病 巨细胞性贫血 增生性贫血 铅中毒 脾切除后 4 寄生虫 红细胞胞质内可见疟原虫 微丝蚴 杜利什曼原虫等病原体 血细胞比容测定 方法学评价1 手工法温氏法 采用中速离心 不能完全排除红细胞间残留血浆 测定结果偏高 微量法 采用高速离心 红细胞间残留血浆比温氏法少 约2 且样本用量小 操作简便 残留血浆1 3 2 血液分析仪法仪器法CV为1 手工法CV为2 仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压常时会出现误差 临床意义1 增高见于各种原因所致血液浓缩 如大量呕吐 大手术后 腹泻 失血 大面积烧伤 真性红细胞增多症 继发性红细胞增多症等 2 减低见于各种贫血 3 是临床输血 输液疗效观察的指标 4 作为红细胞平均体积 红细胞平均血红蛋白浓度计算的基础数据 操作方法 温氏法操作 离心 将离心管置于水平离心机以2264g 即有效半径22 5cm 3000r min 离心30min 观察结果 离心后血液分为5层 自上而下分别为血浆层 血小板层 白细胞层和有核红细胞层 还原红细胞层 紫黑红色 带氧红细胞层 鲜红色 读取红细胞层柱高 以紫黑红色层为准 的毫米数 乘以0 01 即为每升血液中红细胞体积的升数 红细胞平均指数要点27 方法学评价1 MCV红细胞凝集 如冷凝集综合征 严重高血糖症 葡萄糖高于6000mg L 可使MCV假性增高 2 MCH高脂血症 白细胞增多症可使MCH假性增高 3 MCHC受Hct 血浆残留或出现异常红细胞 和Hb 高脂血症 白细胞增多症 的影响 MCH是指平均红细胞血红蛋白量 MCHC是指平均血红蛋白浓度 此外还有一项MCV是指平均红细胞容积 此三项有助于分析贫血原因和诊断 一般来说MCH MCHC MCV三项小于正常值 常见于缺铁性贫血 一般来说MCH大于正常值 MCHC MCV略高于正常值 常见维生素B12和叶酸缺乏引起贫血 也有可能是慢性胃炎引起大细胞性贫血 红细胞体积分布宽度质量控制RDW异常受样本中红细胞碎片 红细胞凝集 双相性红细胞的影响 贫血MCV RDW分类法 RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95 以上 特异性不强 可作为IDA的筛选诊断指标 当铁剂治疗有效时 RDW开始增大 随后逐渐降至正常 网织红细胞计数 质量控制1 显微镜法影响因素有 操作人员对网织红细胞识别不同 血涂片质量好坏 计数红细胞数量多少 计数方法等 2 仪器法出现Howell Jolly小体 有核红细胞 巨大血小板会使结果假性增高 分型 根据网织红细胞发育阶段分为4型 分别是 型 丝球型 红细胞充满网状物 见于骨髓 型 网型 红细胞网状物结构松散 见于骨髓 型 破网型 红细胞网状物结构稀少 呈不规则枝点状排列 见于外周血 型 点粒型 红细胞内为分散的细颗粒 短丝状网状物 见于外周血 临床意义网织红细胞计数 尤其是网织红细胞绝对值 是反映骨髓造血功能的重要指标 当骨髓网织红细胞增多 外周血减少时 提示释放障碍 骨髓和外周血网织红细胞均增加 提示为释放增加 从网织红细胞成熟类型获得红细胞生成活性的其他信息 正常时 外周血网织红细胞中 型约占20 30 型约占70 80 若骨髓增生明显 可出现 型和 型网织红细胞 1 判断骨髓红细胞造血情况 1 增多 见于溶血性贫血 放射治疗和化学治疗后 2 减少 见于再生障碍性贫血 溶血性贫血再障危象 2 观察贫血疗效 缺铁性贫血 巨幼细胞性贫血患者治疗前 Ret仅轻度增高 也可正常或减少 给予铁剂或维生素B12 叶酸治疗后 用药3 5d后 Ret开始上升 7 10d达高峰 2周左右 Ret逐渐下降 表明治疗有效 3 骨髓移植后监测 骨髓移植后第21d 如Ret大于15 109 L 表示无移植并发症 小于15 109 L 伴中性粒细胞和血小板增高 可能为骨髓移植失败 显微镜法注意事项 1 网织红细胞必须在活体染色时才能显示 WH0推荐使用新亚甲蓝染液 其染色力强且稳定 煌焦油蓝染液操作简单 费用低廉 但易产生沉淀 工作效率不高 精度差 批内CV可达20 以上 染色时间不能过短 染色温度应控制在37 因为室温 25 染色Ret检出率明显低于37 染色 染液与血液比例以1 1为宜 严重贫血时 可适量增加血量 2 血涂片要薄而均匀 红细胞无重叠 选择红细胞分布均匀 网织红细胞着色好的部位进行计数 3 为提高网织红细胞计数精度和速度 ICSH推荐使用Miller窥盘 其精度CV约为10 4 注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体 Ret为蓝绿色网状或点粒状物质 分布不均 HbH包涵体为蓝绿色圆形小体 均匀散布于整个红细胞内 5 瑞氏染液复染可使网织红细胞值偏低 点彩红细胞计数点彩红细胞是尚未完全成熟的红细胞在发育过程中受到损害 其胞质中残存变性的嗜碱性RNA 染色后呈现大小 形状不一的蓝色颗粒 点彩红细胞计数时 采用碱性亚甲蓝液染色后 红细胞呈淡蓝绿色 颗粒呈深蓝色 采用瑞氏染色后 红细胞呈粉红色 颗粒呈蓝黑色 通常油镜下计数1000个红细胞中点彩红细胞数 换算成百分率 临床意义增高见于中毒 如铅 汞 银 铋 硝基苯 苯胺等 各类贫血 如溶血性贫血 巨幼细胞性贫血 恶性贫血 恶性肿瘤等 红细胞沉降率测定红细胞沉降率 ESR 血沉 指离体抗凝血静置后 红细胞在单位时间内沉降的速度 分为3期 缗钱状红细胞形成期 约数分钟至10min 快速沉降期 缗钱状红细胞以等速下降 约40min 细胞堆积期 缓慢沉积期 红细胞堆积到试管底部 方法学评价1 手工法 方法有魏氏法 潘氏法等 魏氏法简便实用 为ICSH推荐法 潘氏法用血量少 适用于儿童 因抗凝剂 用血量 血沉管规格 观察时间不同 所以各种方法参考值不同 2 血沉仪法 仪器测量时间短 重复性好 不受环境温度影响等 质量控制影响红细胞缗钱状形成的主要因素有 1 血浆中各种蛋白比例小分子蛋白如清蛋白 卵磷脂等使血沉减缓 大分子蛋白如纤维蛋白原 急性反应蛋白 免疫球蛋白 巨球蛋白 胆固醇 甘油三酯等使血沉加快 2 红细胞数量和形状 1 红细胞数量 数量减少使血沉加快 数量增多使血沉减慢 但数量太少 血沉也减慢 2 红细胞直径 直径越大血沉越快 球形红细胞 镰形红细胞使血沉减慢 3 血沉管血沉管应完全直立 若血沉管倾斜3 沉降率增加30 4 血样本抗凝剂浓度增加 血液凝固使血沉减慢 临床意义血沉增快 1 生理性 女性高于男性 妇女月经期 妊娠3个月以上者血沉增快 老年人血沉增快 病理性1 各种炎症 急性细菌性炎症 如 1胰蛋白酶 2巨球蛋白 C反应蛋白 转铁蛋白 纤维蛋白原等急性期反应物增多 2 3d后血沉增快 慢性炎症 如结核病 结缔组织炎症 风湿热等 活动期血沉增快 病情好转血沉减慢 非活动期血沉正常 2 组织损伤及坏死 组织损伤 手术创伤使血沉增快 若无并发症 2 3周内恢复正常 心肌梗死2 3d后血沉增快 持续1 3周 而心绞痛血沉正常 3 恶性肿瘤 因 2巨球蛋白 纤维蛋白原增高 肿瘤组织坏死 继发感染 贫血等因素使血沉增快 手术切除 治疗好转 血沉可正常 复发或转移时 血沉又增快 良性肿瘤血沉多正常 4 高球蛋白血症 如系统性红斑狼疮 恶性淋巴瘤 亚急性感染性心内膜炎 肝硬化 慢性肾炎等血沉增快 如多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症血沉正常或减慢 5 贫血 贫血使血沉轻度增快 遗传性红细胞增多症 镰形细胞性贫血 红细胞异形症等血沉可减慢 6 高胆固醇血症 如动脉粥样硬化 糖尿病 肾病综合征 黏液性水肿 原发性家族性高胆固醇血症等血沉增快 血沉减慢 如真性或相对性红细胞增多症 DIC消耗性低凝血期 继发性纤溶期等血沉减慢 白细胞检查 白细胞计数是测定单位体积血液中各种白细胞总数 包括显微镜计数法和血液分析仪计数法 白细胞计数是临床工作中重要的化验指标 应用大致有三个目的 1 用以肯定或肯定诊断 如白细胞异常增高非常显著 并辅助白细胞形态检查 可确立白血病的诊断 2 为疾病的鉴别诊断提供依据 如白细胞增多更支持心肌梗死的诊断 白细胞数正常较支持心绞痛的可能 3 揭示疾病的严重性或检测治疗结果 如可通过白细胞增高的程度判断感染的严重程度 急性细菌性感染时白细胞的增高更为明显 参考值 成人 4 0 10 Ox10上标9 l 4000 10000 L 新生儿 15 0 20 Oxl0上标9 L 15000 20000 L 6个月 2岁婴儿 11 0 12 0 x10上标9 L 11000 12000 L 儿童 5 0 12 OXl0上标9 L 5000 12000 L 1 与红细胞数比较 正常情况下 红细胞数 白细胞数约为 500 1000 1 根据红细胞计数值 可估计白细胞计数是否正确 2 与血涂片白细胞分布密度一致性 临床意义 1 生理性白细胞增多 1 胎儿及初生儿白细胞常在10 0 20 Oxl0上标9 L 1 孕妇妊娠5个月以上时 白细胞总数常可达10 5x10上标9 L或更高 后期可达20 0 x10上标9 L 分娩是因阵痛和产伤可进一步增高 但如无并发症 产后2周左右渐趋正常 3 剧烈的运动和劳动可使白细胞高达12 0 x10上标9 L 甚至20 0 x109 L以上 4 暴热和严寒 白细胞总数常有一过性增高 复温后迅速恢复至正常水平 2 病理性白细胞增高 1 某些细菌性感染所引发的疾病 特别是化脓性球菌引起的局部炎症和全身性感染 如 脓肿 化脓性脑膜炎 肺炎 阑尾炎 中耳炎 扁桃体炎 脓胸 肾盂炎 输卵管炎 胆囊炎及败血症等 2 某些病毒性感染所导致的疾病 乙型脑炎 传染性单核细胞增多症 麻疹等 3 严重的组织损伤或坏死 如大手术后 烧伤 急性出血严重创伤 血管栓塞等 4 过敏反应 如输血反应 药物过敏 急性变态反应性疾病等 5 中毒反应 如各种药物中毒 农药中毒 重金属中毒 糖尿病酸中毒 妊娠中毒症等 6 肿瘤及血液病 慢性粒细胞白血病 急性粒细胞白血病等 7 应用某些升白细胞的化学药物促使白细胞增高 多见于化疗和放疗治疗期间因白细胞数量急剧减少时 需要尽快提升白细胞而进行下一步疗程治疗的患者 3 病理性白细胞减少 1 某些病毒性感染 如流感 病毒性肝炎 风疹等 某些细菌性感染 如伤寒和副伤寒 2 血液系统疾病 如再生障碍性贫血 原发性粒细胞缺乏症 3 脾功能亢进 4 理化因素 如放射线 放射性治疗 化学治疗药物 解热镇痛药物等 抗肿瘤类细胞毒性药物等均可导致白细胞数量减少 操作方法 操作步骤 1 小试管1支 加白细胞稀释液0 38ml 2 用微量吸管准确吸取末梢血20 l 擦去管尖外部余血 将吸管插入小试管中稀释液的底部 轻轻将血放出 并吸取上层清液 清洗吸管二次 混匀 3 充池 静置2 3min 待白细胞下沉 4 用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数 5 计算白细胞数 L 4个大方格内白细胞总数 10 20 106 4即4个大方格内白细胞总数 50 106 白细胞数 L6 结果输入操作系统打印报告 注意事项 1 采血时不能挤压过甚 因此针刺深度必须适当 2大小方格内压线细胞应按数上不数下 数左不数右的原则进行计数 3稀释液要过滤 小试管 计数板均须清洁 以免杂质 微粒等被误认为细胞 4 一些贫血患者血液中有核红细胞增多 影响白细胞计数 应校正除去 校正公式 白细胞校正数 X 100 100 YX 未校正前白细胞数 Y 在分类计数时 计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数 5 计数时 两次重复计数误差不得超过10 白细胞分类计数 在某些情况下白细胞总数不能完全解决诊断中的问题 必须参考分类的结果作出有效的判断 白细胞分类计数的变化是与疾病病程有着密切关系 在某些病的初期 急性期 恢复期各类白细胞比例不断变化 某类白细胞增加的同时另一类白细胞相应会减少 应根据不同的情况结合临床具体分析 听从医生的指导和建议 当疾病恢复时各类白细胞应恢复到正常范围内 参考值 相对值 成人 中性分叶核粒细胞 GR NEU 50 70 中性杆状核粒细胞1 5 嗜酸性粒细胞 Eos 1 5 嗜碱性粒细胞 Bas 0 1 单核细胞 Mo 2 8 淋巴细胞 Ly 20 40 临床意义 中性粒细胞增多 急性化脓性感染 粒细胞白血病 急性出血 溶血 手术后 尿毒症 酸中毒 急性金属汞或铅中毒等 中性粒细胞减少 伤寒 副伤寒 疟疾 流感 化学药物中毒 放射线照射 化疗 极度严重感染 再生障碍性贫血 粒细胞缺乏等 嗜酸性细胞增多 见于变态反应性疾病 过敏性疾病 如过敏性哮喘和药物过敏反应 寄生虫病 某些皮肤病 如剥脱性皮炎 某些血液病 如恶性淋巴瘤 慢性粒细胞白血病 风湿性疾病等 嗜酸性细胞减少 某些急性传染病 如伤寒 副伤寒 长期应用肾上腺皮质激素治疗的患者 嗜碱粒细胞增多 见于慢性粒细胞白血病 何杰金病 转移癌 金属铅或铋中毒 减少意义不大 淋巴细胞增多 见于百日咳 传染性单核细胞增多症 慢性淋巴细胞白血病 麻疹 腮腺炎 结核 病毒性肝炎及病毒感染等 淋巴细胞减少 见于传染病急性期 放射病 长期应用激素治疗及细胞免疫缺陷病等 单核细胞增多 结核 伤寒 亚急性感染性心内膜炎 疟疾 黑热病 单核细 胞白血病 急性传染病的恢复期等 减少意义不大 异常白细胞形态检查 临床意义 1 核象变化 1 核左移 说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多 见于急性白血病 急性化脓性细菌感染 急性中毒 急性溶血 正常妊娠 缺氧及低血压也可出现细胞核左移现象 2 核右移 说明中性粒细胞核分叶过多 见于巨幼细胞性贫血 恶性贫血 化疗及炎症恢复期 遗传性中性粒细胞分叶过多 尿毒症等 3 分叶过少 乳酸缺乏症 假性Pelger Huet异常等 2 其他核异常 环形或面包圈型核 见于慢粒 慢性粒细胞白血病 骨髓异常增生综合征等 3 中性粒细胞胞质变化和异常 1 颗粒异常 中毒颗粒见于较严重的化脓菌感染 但轻微的中毒颗粒也可见于正常孕妇 2 空泡变性 常见于化脓性感染患者 也可能与粒细胞部分退化有关或遗传性疾病等 3 内涵物的存在 Dohle小体 主要见于细菌性感染 炎症和烧伤 也可偶见于骨髓异常增生综合征 慢性髓细胞性白血病等 4 中性粒细胞大小不均或出现中毒颗粒 见于较严重的化脓性感染 5 卫星核淋巴细胞 见于长期化疗 放疗 常作为致畸 致突变的指标之一 6 异形淋巴细胞 见于传染性单核细胞增多症 病毒性肝炎 风疹等 电阻抗法血液分析仪检测原理 1 红细胞检测原理 将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中 将小孔管 也称传感器 插进细胞悬液中 小孔管内充满电解质溶液 并有一个内电极 小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极 当接通电源后 位于小孔管两侧电极产生稳定电流 稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔 直径 100 m 厚度约75 m 向小孔管内部流动 使小孔感应区内电阻增高 引起瞬间电压变化形成脉冲信号 脉冲振幅越高 细胞体积越大 脉冲数量越多 细胞数量越多 由此得出血液中血细胞数量和体积值 2 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理 经溶血剂处理的 脱水的 不同体积的白细胞通过小孔时 脉冲大小不同 将体积为35 450fl白细胞 分为256个通道 其中 淋巴细胞为单个核细胞 颗粒少 细胞小 位于35 90fl的小细胞区 粒细胞 中性粒细胞 的核分多叶 颗粒多 胞体大 位于160fl以上的大细胞区 单核细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 原始细胞 幼稚细胞等 位于90 160fl的单个核细胞区 又称为中间型细胞 仪器根据各亚群占总体的比例 计算出各亚群细胞的百分率 并同时计算各亚群细胞的绝对值 显示白细胞体积分布直方图 3 血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后 红细胞溶解并释放出血红蛋白 血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物 在特定波长 530 550nm 下比色 吸光度变化与稀释液中Hb含量成正比 最终显示Hb浓度 不同类型血液分析仪 溶血剂配方不同 所形成血红蛋白衍生物不同 吸收光谱不同 如含氰化钾的溶血剂 与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白 其最大吸收峰接近540nm 光散射法血液分析仪检测原理 光散射法红细胞检测原理以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量1个红细胞 低角度 2 3 光散射能测量单个红细胞体积 高角度 5 15 光散射能测量单个红细胞血红蛋白浓度 得出MCV MCH MCHC值 并显示红细胞散射图 单个红细胞体积和血红蛋白含量直方图 光散射法血小板检测原理单个球形化血小板通过激光束照射后 高角度 5 15 光散射能测量细胞折射指数 RI 低角度 2 3 光散射能测量细胞大小 在二维散射图上得出血小板数量和相关参数 网织红细胞计数原理 1 利用新亚甲蓝使网织红细胞RNA着色 加入使红细胞内Hb溢出的试剂 使其成为 影细胞 然后采用VCS原理 得出网织红细胞数和相关参数 2 利用碱性槐黄O等荧光染料与网织红细胞内的RNA结合 以波长488nm氩氖激光束为激光源照射网织红细胞 得到前向散射光强度 细胞体积大小 和荧光强度 胞质内RNA多少 形成二维显示散点图 得出网织红细胞数和相关参数 正常红细胞直方图 在36 360fl范围内分布两个细胞群体 从50 125fl区域有一个两侧对称 较狭窄的曲线 为正常大小的红细胞 从125 200fl区域有另一个低而宽的曲线 为大红细胞 网织红细胞 当红细胞体积大小发生变化时 峰左移或右移 或出现双峰 正常血小板直方图 在2 30fl范围内分布 呈左偏态分布 集中分布于2 15fl内 当有大血小板或小红细胞 聚集血小板时 直方图显示异常 在三分类血细胞分析仪上 白细胞直方图形态为 两峰一谷 第一峰细胞体积在35fl 95 98 fl 代表成熟淋巴细胞 占白细胞总数的20 40 第二峰细胞体积在150fl 450fl 代