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文档简介
DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 DNA连接酶 DNA聚合酶 催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键 不需要模板 需要DNA的一条链为模板 游离的DNA片段 单个的脱氧核苷酸 形成完整的DNA分子 形成DNA的一条链 基因工程 DNA复制 相同点 不同点 模板 作用对象 作用结果 用途 PCR技术与DNA复制的比较 DNA复制 PCR技术 解旋酶催化 DNA在高温作用下变性解旋 细胞内 主要在细胞核内 细胞外 主要在PCR扩增仪内 DNA解旋酶 普通的DNA聚合酶等 耐热的DNA聚合酶 Taq酶 细胞内温和条件 需控制温度 在较高温度下进行 区别 解旋方式 场所 酶 温度条件 合成的对象 DNA分子 DNA片段或基因 联系 模板 均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 原料 均为四种脱氧核苷酸 酶 均需要DNA聚合酶进行催化 引物 均需要引物 使DNA聚合酶从引物的3 端开始连接脱氧核苷酸 基因工程的概念 基因工程的别名 DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切 拼接 导入 表达 结果 人类需要的新的生物类型和生物产品 目的基因导入受体细胞 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射法 常用方法 生物种类 体细胞或受精卵 将含有目的基因的表达载体提纯 取受精卵 显微注射 受精卵发育 获得具有新性状的动物 以农杆菌转化法为例 将目的基因插入Ti质粒的T DNA上 农杆菌 导入植物细胞 整合到受体细胞的DNA上 表达 转化过程 植物细胞 动物细胞 Ca2 处理法 受体细胞 受精卵 原核细胞 Ca2 处理细胞 感受态细胞 重组表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 目的基因的检测与鉴定 方法 检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因 采用DNA分子杂交技术 检测目的基因是否转录出了mRNA 采用分子杂交技术 分子水平检测 导入DNA分子 转录 翻译 除了分子检测外 还需要进行个体生物学水平的鉴定 如做抗虫或抗病接种实验等 检测目的基因是否翻译成蛋白质 采用抗原
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