液基薄层细胞制片术介绍.doc

液基薄层细胞制片术及注意事项 一、TCT的含义 TCT是液基薄层细胞检测的简称, 就是平常说宫颈的刮片,TCT检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断，对宫颈癌细胞的检出率为100%，同时还能发现部分癌前病变，微生物感染如霉菌、滴虫、病毒、衣原体等。所以TCT技术是应用于妇女宫颈癌的筛查的最先进的技术。二、液基薄层细胞制片术的特点及优点 经薄层液基细胞制片技术处理过的涂片均匀一致，背景干净清晰，细胞形态保存完美，有用诊断细胞成分充足。避免了传统涂片存在着大量的红细胞、白细胞、黏液及脱落坏死组织等而影响正确诊断,从而提高涂片阳性检出率。背景清晰、均匀薄层的细胞涂片，使阅片者更容易观察，从而提高诊断的准确性。 三、液基细胞学流程及注意事项1、收取标本 除去查体中心统一送标本并拿取报告外，妇产科、纤支镜室均是患者自行送标本，拿取报告。标本送达本科室时，需要在收取前核对申请单上的患者基本信息，包括姓名、年龄、电话号码、送检日期及时间、送检科室及医师，若有疑问需及时与送检科室联系。需要注意的是妇科的患者，还需要确认月经情况，是否绝经，经期时一般不建议做液基薄层细胞检测。确认申请单后，需查看保存液瓶是否完整，有无损坏、破裂，液体有无渗漏、干涸等，以上情况导致无法正常完成检验，应拒收，然后在拒收登记本上登记。如确认无误，收取费用时应在保存液瓶上注明患者的姓名，以确保与申请单一致。门诊病人嘱三日后拿取报告，病房检验报告与常规报告一同送往科室护士站，查体中心检验报告由查体中心专人领取2、制片前准备制片前应清点标本总数是否与申请单相符，然后进行查体中心、妇科、纤支镜室分类整理，同时再次确认标本与申请单姓名是否一致。确认无误后用打号机进行编号，按照标本瓶上的姓名在瓶盖处注明编号，准备制片。3、制片过程（1）振荡 将标本瓶按编号置于振荡器上。振荡时间约一分钟，有助于细胞在保存液中混匀。（2）离心 从振荡摇匀的保存液中取约12ml置于专用离心管内，离心管应要按照标本瓶上的编号标志号码，确保统一无误。放入离心机离心，放置时应注意离心管一定要两两对称，以免影响离心机正常工作。离心机选择2000转，离心时间为3-5分钟。（3）稀释 离心过后取出离心管，把上清液导入对应编号的保存液中，充分振荡摇匀离心管内留下的细胞沉淀。按其细胞量多少加以稀释，稀释可用专用保存液。稀释时注意细胞不可过多，过多的细胞容易导致涂片过厚，影响镜下诊断。（4）甩片 吸管吸取上述稀释后的细胞沉淀悬液约1ml加入已组装好的模具中（模具一般会在离心的3-5分钟准备，模具由过滤膜和专用玻片组成，在过滤膜和专用玻片上要提前按照保存液瓶上的编号注明，确保准确无误），开始甩片。本科室甩片机一组可制作四张液基细胞涂片，一般设置在1300转，制作时间为2-4分钟。（5）固定 甩片结束后，依次打开模具，取出专用玻片，置于95%酒精内固定，固定时间为5-10分钟。同时将拆下的一次性过滤膜丢弃在专用医疗垃圾桶中，玻璃模具用流动水清洗，医用棉签刷净后晾干，以备下一次制片。（6）染色 本科室所用染色试剂为快速巴氏染色剂，一套试剂染制1000张左右玻片。因科室每天标本数量不固定，所以关于染色试剂的更换，视镜下观察为准。具体的染色步骤如下：核染液染色时间为1分钟左右流动水冲时间为1分钟浆染液染色时间为1分钟增色液时间约10秒钟固定固定液为100%酒精，时间为1-2分钟（7）封片 本科室液基细胞片采用干封。将玻片从固定液中取出，放入玻片板上用吹风机吹干，然后用中性树胶封片。封片时应注意盖玻片质量，玻片表面清洁情况。封片后应保证无气泡和树胶溢出，否则将影响诊断和玻片的保存归档。4、制片完成后处理制片完成后，关闭机器电源，清理工作台，将玻片与送检申请单再次核对后送诊断室登记阅片。按照编号顺序依次登记，登记时许注意患者的性别、是否住院、住院科室及住院号，支气管刷检者需把标本类别注明，以免与妇科液基弄混。登记后需填写液基细胞制片质量控制记录。按照表格填入当日制片数量、编号，并签写制片人姓名、由诊断医师对制片质量和满意度打分。一张满意的液基涂片最低细胞数量为至少5000个保存完好、形态清晰的鳞状细胞。如有细胞数量少的玻片，应考虑是否由于血液、粘液及炎症细胞引起标本不满意，或单纯的取材时过于表浅，引起的鳞状细胞数量偏低。染色效果标准为： （1） 优良细胞核呈深蓝色，染色质清晰，核仁呈红色；不同分化类型的鳞状上皮细胞，其细胞质染色各异：角化细胞呈粉红色，不全角化细胞呈橙黄色，角化前细胞呈淡蓝色或淡绿色；红细胞呈橙红或鲜红色，白细胞的细胞质呈淡蓝色绿色；黏液呈淡蓝或粉红色。（2） 尚可细胞核呈深蓝黑色，染色质尚清晰，核仁呈红色；各分化类型的鳞状上皮细胞胞浆颜色正常；胞核胞浆分界尚清。（3） 重染细胞核呈深蓝黑色，染色质不清晰；各分化类型的鳞状上皮细胞胞浆颜色正常；胞核胞浆分界不清楚。 5、废弃物处理送检标本（含离心管提取细胞样本），等待发出报告并签收后2到3天，按照病理废弃物处理常规进行处理。 6、关于耗材、报告的登记情况液基耗材分别送往妇科门诊、查体中心、妇科病房及纤支镜室。每次都需要各相关科室人员签收，有专门的耗材交接本。液基报告分为，门诊、住院和查体中心三种。门诊患者的液基报告在取材室有专门登记本。取报告者需签名，并有本科室人员注明报告的患者的姓名、液基编号、日期，然后签字；住院患者的液基报告跟随常规病理报告登记于病理报告本中，需注明患者的姓名及编号，由各科室护士签收；查体中心的液基报告